L-428 人霍奇金淋巴瘤细胞系

"L-428 人霍奇金淋巴瘤细胞系
细胞背景资料：霍奇金淋巴瘤；女性 
细胞形态：淋巴母细胞样 
细胞传代注意事项：①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材；②每天观察细胞形态，掌握好细胞是否健康的标准：健康细胞的形态饱满，折光性好，生长致密时即可传代；③如发现细胞有污染迹象，应立即采取措施，一般应弃置污染的细胞，如果必须挽救，可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗，随后培养基中加入较大量的抗生素，并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持：细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的特点，要做好建系的维持必须记录好细胞档案,换液传代和做好细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。 
细胞生长：悬浮 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
L-428 人霍奇金淋巴瘤细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
冻存和复苏的原则：慢冻快融》当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序：采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时，1~2℃/min；当温度达-25℃以下时，5~10℃/min；当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中。2.简易程序：将冷冻管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱布袋系以线绳，通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口，按每分钟温度下降1~2℃的速度，在40min内降至液氮表面过夜，次晨投人液氮中。3.传统程序：冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时（或隔夜）→液氮槽长期储存。细胞冻存方法：1.预先配制冻存液》（1）8%DMSO+细胞生长液（92%血清）2.取对数生长期细胞，经胰酶消化后，加入适量冻存液，用吸管吹打制成细胞悬液（1×10(6)~5×10(6)细胞/ml）。3.加入1ml细胞于冻存管中，密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法：1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，轻轻摇动冷冻管，使其在1分钟内全部融化（不要超过3分钟）。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养，24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液，以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂特别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂，然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：悬浮 
L-428 人霍奇金淋巴瘤细胞系
细胞培养过程中相关问题总结：悬浮性细胞应如何继代处理？一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００xg(约１,０００rpm)，５-１０分钟，过高之转速，将造成细胞死亡；细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因；细胞冷冻培养基之成份为何？动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成；DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO等级，必须为Tissue culture grade之DMSO，其本身即为无菌状况，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于４°C，避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质，并可减少污染之机会。若要过滤DMSO，则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜；冷冻保存细胞之方法？冷冻保存方法一：冷冻管置于４°C ３０~６０分钟→ (-２０°C ３０分钟)→-８０°C １６~１８小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase长期储存。-２０°C不可超过１小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？冷冻管内细胞数目一般为１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤细胞则以５x１０(６)cells/ml vial为宜；应如何避免细胞污染？细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法；如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？直接灭菌后丢弃之。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
OVCA-420细胞系相关产品：RIN-m5F细胞、Fetal Rhesus Kidney-4细胞、Pa14C细胞 
SKNEP细胞系相关产品：U-138MG细胞、U14细胞、BIC1细胞 
HASMC细胞系相关产品：HOS TE 85细胞、LIPF178C细胞、OCI Ly1细胞 
JB-6 Cl 30细胞系相关产品：U-343 MG细胞、EC-109细胞、V79细胞 
Immortalized Human Hepatocytes细胞系相关产品：H-7721细胞、H-774细胞、CaES-17细胞 
P1-Raji细胞系相关产品：RCC-10RGB细胞、MG-HU-3细胞、OCI-AML-5细胞 
M-1细胞系相关产品：HEEpiC细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415细胞、RPMI7951细胞 
JTC-28细胞系相关产品：G 292 Clone A 141B1细胞、HSC2细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415细胞 
8505C细胞系相关产品：BGC823细胞、NCI-H1930细胞、Danio rerio Gill细胞 
SNU-475细胞系相关产品：SuDHL 10细胞、TF-1a细胞、SuDHL 10细胞 
B16F0细胞系相关产品：HEK-293-FT细胞、NCI H2106细胞、MLA144细胞 
MDA231-LM2细胞系相关产品：NCI H716细胞、MA-782细胞、Reuber H-35细胞 
Kasumi-1细胞系相关产品：NCIH1623细胞、HL-60 Clone 15细胞、NCI-H1155细胞 
SJ-Rh 30细胞系相关产品：LLC PK1细胞、H716细胞、RKN细胞 
BT细胞系相关产品：OCI-Ly 19细胞、SHP-77细胞、SCC25细胞 
HPF细胞系相关产品：2B4-L细胞、SVHUC细胞、Hepatoma-22细胞 
HPF细胞系相关产品：2B4-L细胞、SVHUC细胞、Hepatoma-22细胞 
FRTL-5细胞系相关产品：Hs-675-T细胞、P3X63Ag8.653细胞、SO-RB50细胞 
L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)细胞系相关产品：ECC-12细胞、HCC2108细胞、CHP 100细胞 
SJCRH30细胞系相关产品：SBC-3细胞、RCC-10RGB细胞、NCI660细胞 
L-428 人霍奇金淋巴瘤细胞系
EC-109细胞系相关产品：HRIF细胞、P3-X63Ag8.653细胞、SUDHL-1细胞 
MMVECs细胞系相关产品：MFE 280细胞、MOLT16细胞、JIMT1细胞 
MDA-MB-361细胞系相关产品：LICR-LON-HN6细胞、FU-MMT-1细胞、Walker256-TC细胞 
RT-112细胞系相关产品：C32-mel细胞、HeLa/DDP细胞、RCC10细胞 
NCIH2291细胞系相关产品：Mouse Colon 38细胞、WB F344细胞、KE37细胞 
H1954细胞系相关产品：Eca109细胞、HEK-293-FT细胞、EAC细胞 
3T3 L1细胞系相关产品：NL20SV细胞、IEC6细胞、NALM 6细胞 
SR786细胞系相关产品：NOR-10细胞、NCIH1944细胞、639-V细胞 
L cell line细胞系相关产品：IBMF-7细胞、Hs839T细胞、SUM102PT细胞 
149PT细胞系相关产品：MOLT-4细胞、NCIH2405细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435细胞 
MKN7细胞系相关产品：Panc 1细胞、HS-445细胞、WM266mel细胞 
MC3T3-E细胞系相关产品：SK-RC-42细胞、LNCaP细胞、FLC7细胞 
8305-C细胞系相关产品：CDC/EU.HMEC-1细胞、TGHAVSMC细胞、MCF12F细胞 
BBE细胞系相关产品：Kupffer细胞、Y1细胞、HuCCT-1细胞 
RSC96细胞系相关产品：PG [Human lung carcinoma]细胞、H-322细胞、Y 1细胞 
PCI-4.2细胞系相关产品：CWR22-R1细胞、D-283细胞、DMS114细胞 
MDAMB453细胞系相关产品：MDA-MB-436细胞、H-1651细胞、SK-ML2细胞 
STTG1细胞系相关产品：QGY 7701细胞、LNCaP-Clone-FGC细胞、SKRC20细胞 
BT-474细胞系相关产品：T-47-D细胞、Ly10细胞、BC-028细胞 
Human Epidermoid carcinoma #2细胞系相关产品：HCC1569细胞、NBL-4细胞、NS20Y细胞 
KU.812细胞系相关产品：J-774A.1细胞、Hi-five细胞、HEK-293-H细胞 
B16-F1细胞系相关产品：Huh7.5.1细胞、PAN 02细胞、143B TK-细胞 
50.B1细胞系相关产品：TOV21G细胞、WIL2 S细胞、SW579细胞 
H-2009细胞系相关产品：NTera 2细胞、SJSA-1细胞、Caco2-BBE细胞 
EFO-27细胞系相关产品：PLA-802细胞、NCIH1092细胞、PNT1A细胞 
Oregon J-111细胞系相关产品：RGC6细胞、hTERT-HME1细胞、ARIP细胞 
XWLC-05细胞系相关产品：H1770细胞、V79-1细胞、Hela-mock细胞 
SK-ChA1细胞系相关产品：Sc-1细胞、BetaTC6细胞、SCaBER细胞 
DMS 53细胞系相关产品：CCRF-CEM C7细胞、VB细胞、Eca 109细胞 
HK2细胞系相关产品：OCI-Ly 10细胞、2E8细胞、H-4-II-E细胞 
RS4:11细胞系相关产品：PC-3/M细胞、Ramos (RA 1)细胞、COLO-394细胞 
IAR 20细胞系相关产品：NG-108-15细胞、N9细胞、293 F细胞 
P3X63NS1细胞系相关产品：KYSE 30细胞、RSC 96细胞、VP 267细胞 
H-378细胞系相关产品：SW839细胞、NCI-H87细胞、Alpha Mouse Liver 12细胞 
LAN6细胞系相关产品：TE-8细胞、AD-293细胞、U373细胞 
PANC-1细胞系相关产品：HIEC-6细胞、HIT T15细胞、Leghorn Male Hepatoma cell line细胞 
DV90细胞系相关产品：SRA01/04 (HLE)细胞、RenCa细胞、373 MG细胞 
NCIH2126细胞系相关产品：GM05862细胞、H1954细胞、HS-766T细胞 
BT483细胞系相关产品：SN-12C细胞、RPMI8226/S细胞、NCI-H1648细胞 
HCC1187细胞系相关产品：ARIP细胞、BNL.CL2细胞、MM6细胞 
Oka-C1细胞系相关产品：H-719细胞、NCI-H322细胞、HHFK细胞 
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578T细胞系相关产品：ME1细胞、MES 23.5细胞、HT 29细胞 
COLO-320HSR细胞系相关产品：UACC-812细胞、G-401细胞、NIH3T3细胞 
NCI-H2030细胞系相关产品：TK+/- (clone 3.7.2C)细胞、H-2591细胞、BIU-87/Adr细胞 
HTh-74细胞系相关产品：Mel-MeWo细胞、HSC-I细胞、YD-15细胞 
GM03573A细胞系相关产品：Panc 5.04细胞、NOMO1细胞、LLC-PK1细胞 
NCIH1355细胞系相关产品：HMSC细胞、D341细胞、T. T细胞 
JROECL 33细胞系相关产品：HOCF细胞、BHK细胞、C3H10T1/2CL8细胞 
SUM-52-PE细胞系相关产品：MDA MB 175 VII细胞、HN13细胞、HuH1细胞 
SW 1463细胞系相关产品：HCC202细胞、H-345细胞、GT38细胞 
H69C细胞系相关产品：H522细胞、IOSE-Van细胞、H510细胞 
JG细胞系相关产品：SCC9细胞、NCI-H209细胞、NTC200细胞 
HARA-B细胞系相关产品：HUCCT1细胞、HCC202细胞、1301细胞 
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