MDCC-MSB1 鸡淋巴瘤细胞系

"MDCC-MSB1 鸡淋巴瘤细胞系
细胞背景资料：淋巴瘤 
细胞形态：淋巴母细胞样 
细胞培养实验基本操作：①进无菌室前要彻底洗手，按规定穿隔离衣。开始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。②操作者动作要轻，安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意，金属器械不能在火焰中长时间烧灼，以防退火；烧过的器械要冷却后才能使用；已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼，因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质，吸管再用时会将其带到培养液中；胶塞、橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养细胞，同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用。③使用培养液前不宜过早开瓶，开瓶后的培养液应保持斜位，避免直立，以防止下落细菌的污染。不再使用的培养液应立即封闭瓶口，培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中。④操作时尽量不要谈话，咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染。⑤吸取培养液、细胞悬液时，应专管专用，一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去，以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染。⑥操作完毕后应整理好工作台面，用消毒水浸泡的纱布擦拭台面；防止细胞交叉污染：所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备，一旦怀疑发生交叉污染，可做细胞遗传学方面的鉴定，如发现原有的细胞遗传物发生改变，可以复苏早期冻存的细胞使用。重要细胞系的传代工作应由两人独立进行；无菌室的彻底消毒①新洁尔灭全面彻底擦洗无菌室。使用前应稀释即配即用。新洁尔灭和酒精相比，的优点是便宜，而且可以稀释５０倍用，而同样量的酒精价格可能是新洁尔灭的几十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一种广谱灭菌剂菌，其水溶液和气体对各种细菌、芽孢及真菌等微生物均有杀灭作用。甲醛价廉，熏蒸消毒时不损坏衣服、家具、皮革、橡胶等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。 
细胞生长：悬浮 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
MDCC-MSB1 鸡淋巴瘤细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：悬浮 
MDCC-MSB1 鸡淋巴瘤细胞系
细胞培养过程中相关问题总结：悬浮性细胞应如何继代处理？一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００xg(约１,０００rpm)，５-１０分钟，过高之转速，将造成细胞死亡；细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因；细胞冷冻培养基之成份为何？动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成；DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO等级，必须为Tissue culture grade之DMSO，其本身即为无菌状况，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于４°C，避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质，并可减少污染之机会。若要过滤DMSO，则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜；冷冻保存细胞之方法？冷冻保存方法一：冷冻管置于４°C ３０~６０分钟→ (-２０°C ３０分钟)→-８０°C １６~１８小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase长期储存。-２０°C不可超过１小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？冷冻管内细胞数目一般为１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤细胞则以５x１０(６)cells/ml vial为宜；应如何避免细胞污染？细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法；如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？直接灭菌后丢弃之。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
SNU638细胞系相关产品：NIH:OVCAR3细胞、SP2-0-Ag14细胞、AD293细胞 
HEK-AD 293细胞系相关产品：H184A1细胞、M059K细胞、CNLMG-B5537SKIN细胞 
LS180细胞系相关产品：SW982细胞、MDA-MB453细胞、Hs 294T细胞 
GA-10 (Clone 4)细胞系相关产品：JM细胞、CEM细胞、KMY1022细胞 
OVSAHO细胞系相关产品：WM-266-mel细胞、Hs683T细胞、UWB1.289+BRCA1细胞 
HCC1569细胞系相关产品：MC57细胞、UPCI-SCC-154细胞、SU86-86细胞 
Sp2/0细胞系相关产品：H1623细胞、LS180细胞、NCIH187细胞 
OCIAML4细胞系相关产品：NG10815细胞、A2780/Taxol细胞、3T3 clone A31细胞 
TNC-1B12B4细胞系相关产品：Pa18C细胞、G-402细胞、U373MG细胞 
NCI-SNU-620细胞系相关产品：NCI-441细胞、MKN 28细胞、MHCC97-L细胞 
NOMO1细胞系相关产品：Keio University-19-19细胞、Evsa T细胞、Kit 225 K6细胞 
Neukoplast细胞系相关产品：HKF细胞、Laboratory of Allergic Diseases 2细胞、TOV21G细胞 
DMS-153细胞系相关产品：H2052_MM细胞、OV 2008细胞、BJAB细胞 
ChaGo-K1细胞系相关产品：U-118 MG细胞、MDA-330细胞、alpha TC1.6细胞 
IMR90细胞系相关产品：Natural Killer-92细胞、Line 522细胞、COLO684细胞 
Hs 606.T细胞系相关产品：NCI-SNU-16细胞、TM3细胞、HDSMC细胞 
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Mv 1 Lu (NBL-7)细胞系相关产品：BCaP 37细胞、H-1944细胞、NCI-UMC-11细胞 
H-9细胞系相关产品：NCI-H1648细胞、NALM6细胞、H4IIE细胞 
UCLA RO-81-A-1细胞系相关产品：293 EBNA细胞、Molm 13细胞、SUDHL8细胞 
MDCC-MSB1 鸡淋巴瘤细胞系
JM-Jurkat细胞系相关产品：PFSK-1细胞、TE85细胞、Hs274T细胞 
P3HR-1细胞系相关产品：CA-OV-3细胞、REC 1细胞、KMS11细胞 
MDAMB468细胞系相关产品：HT1080细胞、BC-023细胞、IM9细胞 
KYSE0030细胞系相关产品：hOMF细胞、P31/Fujioka细胞、Human Epithelioma-2细胞 
CORL26细胞系相关产品：WM-239A细胞、KMS11细胞、MDAPC2B细胞 
C1498细胞系相关产品：EB-3细胞、BJA-B1细胞、Mono Mac 1细胞 
NOZC-1细胞系相关产品：F442A细胞、MFE-280细胞、Hs 636.T细胞 
Ca761细胞系相关产品：NCIH2170细胞、ST细胞、PTK 1细胞 
BIC-1细胞系相关产品：BALB/c 3T3 clone A31细胞、SW-756细胞、ONS76细胞 
GL261细胞系相关产品：GM02131细胞、SK-N-MC细胞、HuH-1细胞 
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Roswell Park Memorial Institute 7666细胞系相关产品：G-Olig2细胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞、Wistar Institute-38细胞 
MCF-7/ADR-RES细胞系相关产品：PT67细胞、B16-F0细胞、MDAMB-231细胞 
COR-L26细胞系相关产品：EJ 138细胞、Psi2 DAP细胞、JB-6细胞 
SUM159PT细胞系相关产品：DMS153细胞、KMH2细胞、BJA-B-1细胞 
NMCG1细胞系相关产品：HBVSMC细胞、SaOS-2细胞、HEK-EBNA细胞 
LC-2/ad细胞系相关产品：TE-85 clone 5细胞、SDBMSC细胞、AG 9细胞 
NOR 10细胞系相关产品：Capan1细胞、CTX TNA2细胞、Hut292细胞 
OLN 93细胞系相关产品：Co320细胞、NCI-H2452细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16细胞 
SK-N-MC细胞系相关产品：Panc-02细胞、TE354T细胞、MDA-MB231细胞 
Baby Hamster Kidney-21细胞系相关产品：UMC-11细胞、SW527细胞、HCC4006细胞 
P3-Jiyoye细胞系相关产品：M-NFS-60细胞、SHZ-88细胞、SK-RC-39细胞 
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T-98细胞系相关产品：SKml2细胞、MKN-28细胞、MDCK Type II细胞 
WERI-Rb 1细胞系相关产品：C4-2细胞、RK13细胞、Y3-Ag1,2,3细胞 
HUT 28细胞系相关产品：NCIH1666细胞、SNU-475细胞、MEG-01细胞 
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OVCAR.4细胞系相关产品：CCRF/CEM细胞、BeWo细胞、MDCC MSB1细胞 
Med 341细胞系相关产品：373MG细胞、HG2855细胞、U-87 MG细胞 
NCIH196细胞系相关产品：YES 2细胞、AZ521细胞、ZR75-1细胞 
Bowes melanoma cells细胞系相关产品：HCC-1187细胞、Panc327细胞、QGY-7701细胞 
LS-180细胞系相关产品：COLO678细胞、ABC1细胞、K1735细胞 
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NT2-D1细胞系相关产品：Lewis Lung细胞、SK-MES细胞、A253细胞 
TE1细胞系相关产品：H-2228细胞、COLO-320HSR细胞、Med 341细胞 
MEC-1细胞系相关产品：HPAF-I细胞、HCC-2935细胞、NCI-H889细胞 
OVCAR420细胞系相关产品：SiHa细胞、MDA MB 134VI细胞、SF767细胞 
MDCC-MSB1 鸡淋巴瘤细胞系
SKml2细胞系相关产品：P3/X63-Ag8细胞、C-32细胞、MOLM16细胞 
HGE细胞系相关产品：Hs343T细胞、ECGI10细胞、A-2058细胞 
SW13细胞系相关产品：NCIH1436细胞、WERI-Rb1细胞、hTERT-HME-1细胞 
Fu97细胞系相关产品：KRC/Y细胞、T 84细胞、LN 229细胞 
Mel-RM细胞系相关产品：MDAMB436细胞、DR2R1610细胞、SCC 4细胞 
D-283MED细胞系相关产品：293 Ad5细胞、KMS-18细胞、P3-NS1/1-Ag4-1细胞 
CHOK1细胞系相关产品：SKRC20细胞、R 1610细胞、KHYG-1细胞 
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U-2-OS细胞系相关产品：AM-38细胞、HGBEC细胞、VM-CUB-I细胞 
NCI-SNU-C2A细胞系相关产品：SU 86.86细胞、SKMEL3细胞、NK-92 MI细胞 
LS180细胞系相关产品：SW982细胞、Leydig细胞、DU_145细胞 
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