BJAB 人Burkitt's淋巴瘤细胞系

"BJAB 人Burkitt's淋巴瘤细胞系
细胞背景资料：Burkitt's淋巴瘤 
细胞形态：淋巴母细胞样 
细胞传代培养的胰酶消化法：传代培养：是指细胞从一个培养瓶以１：２或１：２以上的比例转移，接种到另一培养瓶的培养。传代细胞，可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代，部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代，或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤：①入无菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒双手；②倒置显微镜下观察细胞形态，确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液３７℃下预热；③超净台台面应整洁，用７５%酒精棉球擦拭清洁；④打开超净工作台的紫外灯照射台面２０min左右，关闭紫外灯，打开风机清洁空气除去臭氧；⑤点燃酒精灯;取出无菌试管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内；⑥将培养用液瓶口用７５%酒精消毒，过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上；⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去残留的就培养基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每个大培养瓶加入１ml胰酶，小培养瓶用量酌减，盖好瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶，使细胞脱离胰酶，然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鲜培养基，反复吹打消化好的细胞使其脱壁并分散，再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成细胞悬液，然后分装到新培养瓶中。盖好瓶盖，适度拧紧后稍回转，以利于CO２的进入，将培养瓶放回CO２培养箱；⑩对悬浮培养细胞，步骤７-９不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清，加入新鲜培养基，然后分装到各瓶中。 
细胞生长：悬浮 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
BJAB 人Burkitt's淋巴瘤细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
冻存和复苏的原则：慢冻快融》当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序：采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时，1~2℃/min；当温度达-25℃以下时，5~10℃/min；当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中。2.简易程序：将冷冻管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱布袋系以线绳，通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口，按每分钟温度下降1~2℃的速度，在40min内降至液氮表面过夜，次晨投人液氮中。3.传统程序：冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时（或隔夜）→液氮槽长期储存。细胞冻存方法：1.预先配制冻存液》（1）8%DMSO+细胞生长液（92%血清）2.取对数生长期细胞，经胰酶消化后，加入适量冻存液，用吸管吹打制成细胞悬液（1×10(6)~5×10(6)细胞/ml）。3.加入1ml细胞于冻存管中，密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法：1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，轻轻摇动冷冻管，使其在1分钟内全部融化（不要超过3分钟）。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养，24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液，以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂特别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂，然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：悬浮 
BJAB 人Burkitt's淋巴瘤细胞系
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系，大部分的细胞都是要成片生长的，尤其是对于贴壁细胞，单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话，传代后细胞是不能贴壁的，这样抱团的细胞就会死亡。所以，消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态，这个啊是非常考究你的功夫的！细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个，因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开，受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊，这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来，又不能太过，一吹就整片脱落，要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-２细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到７０%左右的时候就要传代了，一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞，你在洗的时候如果是用无血清１６４０去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样，用１６４０培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话，可以用PBS来洗，洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的，对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清，防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先，是很关键的一点。先补充这么多，还会后续更新。再补充一点：传代时PBS洗是很重要的一步，最近发现，用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置１０-１５分钟，有些需要更长的时间，等到细胞一个个分离开来的时候，就可以直接吹打下来，但是和胰酶消化一样，要控制好时间，不能时间太过了，要不然损伤细胞，细胞不容易成活，状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候，或者临时没有胰酶了，可以选用此方法。不过一定要试试，看是否适合你的细胞。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
CHP 126细胞系相关产品：H-23细胞、OVCAR.3细胞、Cates-1B细胞 
P-19细胞系相关产品：HPAF/CD18细胞、184A1细胞、Spodoptera frugiperda clone 9细胞 
hFOB1.19细胞系相关产品：Helacyton gartleri细胞、IPLB-SF 21细胞、Ramos细胞 
NT2D1细胞系相关产品：GAK细胞、NL20SV细胞、D10细胞 
GM04671细胞系相关产品：HONE-1细胞、Karpas-299细胞、H735细胞 
TCam-2细胞系相关产品：SKMES-1细胞、NB-9细胞、HFF细胞 
TE-12细胞系相关产品：SKNBE细胞、U2-OS细胞、SuDHL 1细胞 
AC29细胞系相关产品：HEC-1-B细胞、H8细胞、GM3190细胞 
MDA-MB-134细胞系相关产品：OVCA432细胞、Tu212细胞、624-mel细胞 
LCMS细胞系相关产品：KRC-Y细胞、Tj-905细胞、CT-26细胞 
RCCJF细胞系相关产品：HSC-1细胞、UMUC1细胞、CLONE M3细胞 
NCI-H1963细胞系相关产品：IMR-90细胞、MSB1细胞、OsA-CL细胞 
NSI/1-Ag4-1细胞系相关产品：NCI-H2066细胞、Nthy-ori 3.1细胞、alpha TC1 clone 6细胞 
TMK-1细胞系相关产品：MGHU3细胞、SF 295细胞、BOWES细胞 
SKNBE(2c)细胞系相关产品：Melan-a细胞、HCA 7细胞、NCI-H522细胞 
LC-2-Ad细胞系相关产品：SKRC 39细胞、HLFa细胞、WB-F344细胞 
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GM00346细胞系相关产品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3细胞、BT474细胞、HFL-1细胞 
Panc2_03细胞系相关产品：H-1836细胞、D 407细胞、UCLA SO M21细胞 
Panc 02细胞系相关产品：T47-D细胞、Hs675T细胞、Pan02细胞 
BJAB 人Burkitt's淋巴瘤细胞系
BPH1细胞系相关产品：U118MG细胞、MDA-MB-435-S细胞、Lewis lung carcinoma line 1细胞 
IOSE80UBC细胞系相关产品：HBL1细胞、SW 962细胞、NCIH2141细胞 
K 562细胞系相关产品：Walker/LLC-WRC 256细胞、RPMI2650细胞、H-1568细胞 
MDA-MB-330细胞系相关产品：U-226AR1细胞、SNU-216细胞、HLE B-3细胞 
MDA-MB-157细胞系相关产品：A 172细胞、KGN细胞、LOUNH91细胞 
SKNBE(2)细胞系相关产品：786-0WT细胞、HEL细胞、MDCK-2细胞 
LM-TK-细胞系相关产品：RPTC细胞、ID8细胞、GC-2spd(ts)细胞 
YD-38细胞系相关产品：H64细胞、293-FT细胞、MS 751细胞 
MDCK-II细胞系相关产品：C-Lu-65细胞、MN-60细胞、HCC94细胞 
2E8细胞系相关产品：HCT 8细胞、U-87细胞、SKUT1细胞 
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Fox/NY细胞系相关产品：ZR751细胞、HCS-2/8细胞、SNB-19细胞 
NCI/ADRRES细胞系相关产品：118 MG细胞、WiDr/S细胞、ACCM细胞 
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BEL 7402细胞系相关产品：HTR-8/SVneo细胞、SW403细胞、NT-2细胞 
NCI-H322T细胞系相关产品：Rh30细胞、H-660细胞、BC-PAP细胞 
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Nthy-ori 3.1细胞系相关产品：CL 1-5细胞、LLC-PK(1)细胞、IPEC1细胞 
Mv 1 Lu (NBL-7)细胞系相关产品：BCaP 37细胞、H-1944细胞、NCI-UMC-11细胞 
NCI-H1944细胞系相关产品：RBL2H3细胞、RA细胞、NCI-H596细胞 
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PC-3/M细胞系相关产品：184A1细胞、NCM356细胞、H1155细胞 
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NT2细胞系相关产品：T1-73细胞、C 643细胞、NFHIOSE-80细胞 
IGROV1细胞系相关产品：NCI.H226细胞、GH3细胞、SW982细胞 
Experimental Mammary Tumour-6细胞系相关产品：TE 354.T细胞、bEND.3细胞、QGY7703细胞 
MES 23.5细胞系相关产品：C2A细胞、Mono Mac6细胞、P3/ag细胞 
SK-N-BE-2细胞系相关产品：ID8/MOSEC细胞、BpRc1细胞、SK-CO-1细胞 
NCIH226细胞系相关产品：H-524细胞、LTPA细胞、COLO320DM细胞 
HO-8910PM细胞系相关产品：3T6细胞、TYKnu细胞、T98G细胞 
Hs 27细胞系相关产品：TE-13细胞、A101D细胞、HEP-3B2细胞 
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Mouse INsulinoma 6细胞系相关产品：U251MG细胞、H1436细胞、WI38细胞 
SUM-149PT细胞系相关产品：AU 565细胞、LIM 1215细胞、HEYA8细胞 
Bac12F5细胞系相关产品：RERF-LCMS细胞、WEHI 164细胞、H-28细胞 
SU4细胞系相关产品：NW38细胞、MCA-38细胞、CAL-39细胞 
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K 562细胞系相关产品：Walker/LLC-WRC 256细胞、RPMI2650细胞、H-1568细胞 
Walker-256-TC细胞系相关产品：CWR22R细胞、EFM192细胞、MV(4;11)细胞 
V-79-4细胞系相关产品：HBZY 1细胞、C3H/10T1/2 clone 8细胞、A204细胞 
T-T细胞系相关产品：CWR22-Rv1细胞、32D clone3细胞、SBC-5细胞 
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Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞系相关产品：UACC 893细胞、JVM2细胞、LS-411N细胞 
Colon26细胞系相关产品：ABE­8.1/2细胞、TE 85.T细胞、BCECs细胞 
HPDEC细胞系相关产品：COLO_320DM细胞、Jurkat Clone E6-1细胞、HRGEC细胞 
MCA-38细胞系相关产品：MILE SVEN 1细胞、MOLT 3细胞、OCI Ly10细胞 
Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞系相关产品：U-87 MG细胞、SR细胞、SKLU-1细胞 
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