SNK-6 人NK/T细胞淋巴瘤细胞系

"SNK-6 人NK/T细胞淋巴瘤细胞系
细胞背景资料：NK/T细胞淋巴瘤；男性 
细胞形态：淋巴母细胞样 
细胞传代注意事项：①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材；②每天观察细胞形态，掌握好细胞是否健康的标准：健康细胞的形态饱满，折光性好，生长致密时即可传代；③如发现细胞有污染迹象，应立即采取措施，一般应弃置污染的细胞，如果必须挽救，可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗，随后培养基中加入较大量的抗生素，并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持：细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的特点，要做好建系的维持必须记录好细胞档案,换液传代和做好细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。 
细胞生长：悬浮 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
SNK-6 人NK/T细胞淋巴瘤细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
公司细胞库冻存并保种有2300多种各类细胞系。针对每种不同的细胞系，公司摸索并积累了大量细胞培养条件和优化参数，为您的细胞实验保驾护航。细胞培养是生命科学研究中最基础、也是最常用的实验手段。从冻存→复苏→传代→实验，在每一次细胞培养的过程中我们都是精心呵护，小心培养，心里都是默默承诺：我要护你一世周全！可是可是……无数次细胞都因污染而离我而去，投入的不只是我们貌美如花的青春，还有那一去不复返的经费！在细胞生物学，生物化学，免疫学，神经生物学，病理学……只要涉及细胞的研究领域，都面临着支原体污染的威胁。在众多污染物中，也就属支原体最狡猾了，他最善于隐藏自己，因为被支原体污染的细胞不会马上死亡，但会改变细胞的新陈代谢，甚至会改变细胞的基因表达谱，我们就这样被欺骗了无数次，谁让我们就是个看“颜值”的花痴了。可是我们通过被虐了几百次的经验中总结出来，当你的细胞出现了这些症状时：生长速率改变；活性减弱；形态改变；染色体畸变；转染效率显著降低；细胞复苏后存活率降低……。那你就得千万小心了，也许你的细胞已经被支原体欺凌了！ 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：悬浮 
SNK-6 人NK/T细胞淋巴瘤细胞系
细胞传代时消化的问题：可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。（以难消化细胞为例）；具体操作：１)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗１-２遍，（这是前奏，即为步，目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。２)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。）３)吸干净瓶内剩余液体，加入０.３ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用，加入新培养基开始吹打，吹打２-３遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用２ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。（你也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比。）这是第三步。４)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，呵呵。继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况你自己把握）。这是第四步。其实还可以有第五步，对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话，你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态，更漂亮的样子，没办法，你必须分多批多次消化，这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低，保证细胞的状态能够。当然了，如果细胞是属于那种很容易消化的细胞，像RAW２６４.７，仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较，去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步，除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外，还有一个更重要的作用就是，可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态，不成片不连体。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
MV4II细胞系相关产品：Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8细胞、KYSE520细胞、HFLS-RA细胞 
SNU354细胞系相关产品：NCI522细胞、PK (15)细胞、BN-CL2细胞 
U87-MG细胞系相关产品：NCI-H1385细胞、C3H10T1-2细胞、C33-A细胞 
INS1细胞系相关产品：OVCAR-8细胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)细胞、MRCV细胞 
TE32细胞系相关产品：NIH-3T3细胞、LC1-Sq细胞、MDA-MB-415细胞 
MUTZ-1细胞系相关产品：SKM1细胞、HEK293-EBNA细胞、HIT-T15细胞 
2780CP细胞系相关产品：KOPN8细胞、TFH细胞、CHP-100细胞 
DI-TNC1细胞系相关产品：SN12CPM6细胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21细胞、hEM15A细胞 
J774A1细胞系相关产品：H676细胞、OVCAR 432细胞、CaEs17细胞 
SK HEP-1细胞系相关产品：HEK-293-H细胞、HTR8细胞、HTori 3细胞 
WEHI 3B细胞系相关产品：Tca-8113细胞、4T1.2细胞、Nb2-11细胞 
SMA560细胞系相关产品：Kit 225 K6细胞、CEM/0细胞、PECAPJ34细胞 
G-361细胞系相关产品：U-118MG细胞、U-87MG细胞、HCMEC细胞 
WERI细胞系相关产品：OV3121细胞、AHH1细胞、HAC-84细胞 
L Wnt-3A细胞系相关产品：HANK1细胞、FRO细胞、Ball 1细胞 
HCT-FET细胞系相关产品：KYSE 50细胞、H3255细胞、HCT-8细胞 
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NCI-H146细胞系相关产品：B16-F10细胞、HCC1143细胞、DLD-1细胞 
SW756细胞系相关产品：UCLA-SO-M14细胞、7860细胞、CAL120细胞 
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SNK-6 人NK/T细胞淋巴瘤细胞系
GM00215A细胞系相关产品：HOSEpiC细胞、H2122细胞、GM02219D细胞 
IGROV细胞系相关产品：HCT8细胞、NFHIOSE-80细胞、PA-1细胞 
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SK Mel 24细胞系相关产品：Earle's L cells细胞、SNK-6细胞、Mono Mac 6细胞 
NIH/3T3细胞系相关产品：MDAPC2B细胞、MDA-MB 468细胞、MX-1细胞 
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D324细胞系相关产品：IMR32细胞、NCI-H211细胞、RMC-1细胞 
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COLO-829细胞系相关产品：A-10细胞、SW48细胞、CA 46细胞 
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SW1573细胞系相关产品：JEKO细胞、MOLM-16细胞、Hs1.Tes细胞 
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