KCL-22 人慢性粒细胞白血病细胞系

"KCL-22 人慢性粒细胞白血病细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：淋巴母细胞样 
细胞培养实验基本操作：①进无菌室前要彻底洗手，按规定穿隔离衣。开始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。②操作者动作要轻，安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意，金属器械不能在火焰中长时间烧灼，以防退火；烧过的器械要冷却后才能使用；已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼，因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质，吸管再用时会将其带到培养液中；胶塞、橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养细胞，同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用。③使用培养液前不宜过早开瓶，开瓶后的培养液应保持斜位，避免直立，以防止下落细菌的污染。不再使用的培养液应立即封闭瓶口，培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中。④操作时尽量不要谈话，咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染。⑤吸取培养液、细胞悬液时，应专管专用，一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去，以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染。⑥操作完毕后应整理好工作台面，用消毒水浸泡的纱布擦拭台面；防止细胞交叉污染：所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备，一旦怀疑发生交叉污染，可做细胞遗传学方面的鉴定，如发现原有的细胞遗传物发生改变，可以复苏早期冻存的细胞使用。重要细胞系的传代工作应由两人独立进行；无菌室的彻底消毒①新洁尔灭全面彻底擦洗无菌室。使用前应稀释即配即用。新洁尔灭和酒精相比，的优点是便宜，而且可以稀释５０倍用，而同样量的酒精价格可能是新洁尔灭的几十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一种广谱灭菌剂菌，其水溶液和气体对各种细菌、芽孢及真菌等微生物均有杀灭作用。甲醛价廉，熏蒸消毒时不损坏衣服、家具、皮革、橡胶等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。 
细胞生长：悬浮 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
KCL-22 人慢性粒细胞白血病细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
冻存和复苏的原则：慢冻快融》当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序：采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时，1~2℃/min；当温度达-25℃以下时，5~10℃/min；当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中。2.简易程序：将冷冻管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱布袋系以线绳，通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口，按每分钟温度下降1~2℃的速度，在40min内降至液氮表面过夜，次晨投人液氮中。3.传统程序：冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时（或隔夜）→液氮槽长期储存。细胞冻存方法：1.预先配制冻存液》（1）8%DMSO+细胞生长液（92%血清）2.取对数生长期细胞，经胰酶消化后，加入适量冻存液，用吸管吹打制成细胞悬液（1×10(6)~5×10(6)细胞/ml）。3.加入1ml细胞于冻存管中，密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法：1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，轻轻摇动冷冻管，使其在1分钟内全部融化（不要超过3分钟）。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养，24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液，以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂特别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂，然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。 
细胞传代方法：１：２传代 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：悬浮 
KCL-22 人慢性粒细胞白血病细胞系
细胞的冻存：目前，细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０(６)～１×１０(７)/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
PLC PRF 5细胞系相关产品：RLE-6TN细胞、U-2932细胞、DMS-53细胞 
NCIH1623细胞系相关产品：MRC5细胞、PLA801-95D细胞、HRA19细胞 
Highly Aggressively Proliferating Immortalized细胞系相关产品：THP 1细胞、IGR-OV1细胞、BHK-21细胞 
NCIH378细胞系相关产品：COLO320-DM细胞、COS-7细胞、EC9706细胞 
NRK-49F细胞系相关产品：SK-MEL 28细胞、SK-N-BE细胞、MCCAR细胞 
HCT116/L细胞系相关产品：PANC 1005细胞、LAC细胞、U-2-OS细胞 
HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞系相关产品：RPMI8402细胞、NIH3T3细胞、C 643细胞 
TK10细胞系相关产品：KY70细胞、SK HEP-1细胞、NCI-H1651细胞 
PE/CA-PJ34细胞系相关产品：HIT-T15细胞、NS20-Y细胞、Hce8693细胞 
MLE12细胞系相关产品：KATO 3细胞、Hs 606.T细胞、SK-ES1细胞 
Gejiu Lung Carcinoma-82细胞系相关产品：NCI-H1395细胞、87 MG细胞、OCILY-3细胞 
IHC-ST1细胞系相关产品：Be-Wo细胞、H-3255细胞、HPC-Y5细胞 
RIN m5F细胞系相关产品：H-2141细胞、ROS-17/2.8细胞、SF 295细胞 
HME1细胞系相关产品：MC 116细胞、LNCaP clone FGC细胞、NCIH1666细胞 
KS-1 [Human glioblastoma]细胞系相关产品：BEL 7405细胞、BC-021细胞、TE-7细胞 
AC16 [Human hybrid]细胞系相关产品：SU86.86细胞、L2细胞、L23/P细胞 
AC16 [Human hybrid]细胞系相关产品：SU86.86细胞、L2细胞、L23/P细胞 
P3X63 Ag8细胞系相关产品：H-2291细胞、FCCH1024细胞、SU-DHL6细胞 
HR-1细胞系相关产品：HEK293F细胞、Walker-256-TC细胞、SNU638细胞 
P-388D1细胞系相关产品：OV1063细胞、L-Wnt3A细胞、Neuro 2a细胞 
KCL-22 人慢性粒细胞白血病细胞系
NCI-H774细胞系相关产品：UMUC14细胞、BE2_C细胞、CCC-HEL-1细胞 
Normal fibroblast-10细胞系相关产品：58F细胞、PNT1A细胞、JVM-2细胞 
NCI-H378细胞系相关产品：WRL-68细胞、RC-4B细胞、KHYG细胞 
TM4细胞系相关产品：UC-3细胞、CWR22R-V1细胞、TE-11细胞 
Panc8.13细胞系相关产品：GM04680细胞、Nb2a细胞、NCIH660细胞 
RCF细胞系相关产品：HA细胞、Malme-3 M细胞、MRASMC细胞 
FDCP1细胞系相关产品：RT4P细胞、CCRF/CEM细胞、COR-L23细胞 
V 79细胞系相关产品：Liver-02细胞、LS 123细胞、Microbiological Associates-104细胞 
SUM159PT细胞系相关产品：DMS153细胞、KMH2细胞、BJA-B-1细胞 
COLO 320 HSR细胞系相关产品：DR2R1610细胞、E0771细胞、H-498细胞 
HPaSteC(HPSC)细胞系相关产品：C3H-10T1/2细胞、MyLa 2059细胞、HEL-92细胞 
MX1细胞系相关产品：BXPC3细胞、ASH-3细胞、Lu-65细胞 
NPA87-1细胞系相关产品：SUM 52PE细胞、Y3细胞、HT 1376细胞 
L540细胞系相关产品：MES-SA/Dx5细胞、P31 FUJ细胞、RS(4;11)细胞 
BeWo细胞系相关产品：SU-DHL-5细胞、TE-3A细胞、UM-UC-3细胞 
Large Cell Lung Cancer-103H细胞系相关产品：WPMY-1细胞、A2780CP细胞、NCI-SNU-423细胞 
Hs.27细胞系相关产品：H-526细胞、Hs 578Bst细胞、Nb 2细胞 
HFTF细胞系相关产品：HeLa细胞、AX-Mel细胞、NCIH1048细胞 
CNE-2细胞系相关产品：HCT15细胞、RMC-1细胞、MDA-330细胞 
Intestinal Epithelioid Cell line No. 18细胞系相关产品：Hx-147细胞、H510A细胞、NIH:OVCAR3细胞 
MS1细胞系相关产品：H1522细胞、MS-751细胞、YES-2细胞 
KPL4细胞系相关产品：GT1-1细胞、WML2细胞、ABC1细胞 
M-G63细胞系相关产品：SKMel-5细胞、SUIT-2细胞、HLE-B3细胞 
EOC20细胞系相关产品：COV-434细胞、AgC11x3A细胞、Madin-Darby Canine Kidney细胞 
TYKnu细胞系相关产品：NCIH1915细胞、OVSAHO细胞、Fortner's melanotic melanoma #3细胞 
HCV29细胞系相关产品：GS9L细胞、HCC-1171细胞、WEHI 164细胞 
SNU-520细胞系相关产品：H-1648细胞、H-460细胞、TE-3A细胞 
AN3 CA细胞系相关产品：BV-2细胞、Ishikawa细胞、COLO 679细胞 
OVCAR 8细胞系相关产品：CCRF-CEM/S细胞、Ball 1细胞、JIMT细胞 
L 132细胞系相关产品：Roswell Park Memorial Institute 8226细胞、MES-13细胞、H1694细胞 
TE13细胞系相关产品：H1944细胞、GM05372细胞、CT26.CL25细胞 
Ect1/E6E7细胞系相关产品：NIH-3T3-L1细胞、H-676B细胞、End1/E6E7细胞 
1.1B4细胞系相关产品：LN-18细胞、GM637A细胞、Human Kidney-2细胞 
DSL-6A-C1细胞系相关产品：HTh 74细胞、SW-1271细胞、HMEC细胞 
SW 480细胞系相关产品：Balb/c 3T3细胞、CAL120细胞、NCI/ADR-RES细胞 
IB-RS2细胞系相关产品：SW-1417细胞、MKN-45细胞、OUMS-23细胞 
IB-RS2细胞系相关产品：SW-1417细胞、MKN-45细胞、OUMS-23细胞 
PL 45细胞系相关产品：RK 13细胞、HC-11细胞、Human Embryo Lung-1细胞 
A-498细胞系相关产品：Raji细胞、HBSMC细胞、A2780/CP细胞 
MCF-7ADR细胞系相关产品：Walker-Ca.256细胞、KASUMI1细胞、EJ 138细胞 
Cloudman S91 melanoma clone M-3细胞系相关产品：451Lu细胞、BNL CL.2细胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞 
KCL-22 人慢性粒细胞白血病细胞系
HEL299细胞系相关产品：SKOV3细胞、SK.OV.3细胞、TGBC11T细胞 
MDA-MB-231 #4175细胞系相关产品：REC 1细胞、EBNA293细胞、ROS17/28细胞 
MC9细胞系相关产品：CCD1112Sk细胞、KYSE-180细胞、0V-1063细胞 
P3-X63Ag8.653细胞系相关产品：PL-11细胞、RMS1598细胞、MUTZ-1细胞 
ROS1728细胞系相关产品：T_T_细胞、SW962细胞、SW 954细胞 
HCCC-9810细胞系相关产品：ES2细胞、CAL-148细胞、MDA-MB-231细胞 
MDA-MB 231细胞系相关产品：HCT 116细胞、UM-UC-1细胞、HCC1806细胞 
NBLAN5T细胞系相关产品：KFB细胞、HEL-299细胞、CEK细胞 
MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞系相关产品：SHP-77细胞、JF305细胞、SKMEL28细胞 
H-1395细胞系相关产品：A549-Taxol细胞、PC-3M-IE8细胞、NCI-522细胞 
AHH-1细胞系相关产品：Be Wo细胞、VCaP细胞、BAEC细胞 
High-5细胞系相关产品：NCIH446细胞、OKAC1细胞、C4 I细胞 
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