ARH-77 人浆细胞白血病细胞系

"ARH-77 人浆细胞白血病细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：淋巴母细胞样 
细胞传代注意事项：①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材；②每天观察细胞形态，掌握好细胞是否健康的标准：健康细胞的形态饱满，折光性好，生长致密时即可传代；③如发现细胞有污染迹象，应立即采取措施，一般应弃置污染的细胞，如果必须挽救，可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗，随后培养基中加入较大量的抗生素，并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持：细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的特点，要做好建系的维持必须记录好细胞档案,换液传代和做好细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。 
细胞生长：悬浮 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
ARH-77 人浆细胞白血病细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可。吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足够消化细胞。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后37℃消化。比较难消化的细胞（润洗方法5min还不能消化），这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育。不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性。如果和标准形态不一致，那可能是自己没消化好导致的，但如果消化方法正确，仍然成片分布，甚至完全吹打成单细胞悬液，贴壁后仍然成片分布，这是细胞的特性，是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布，你的细胞之后会对你越来越不好。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：悬浮生长 
ARH-77 人浆细胞白血病细胞系
细胞培养过程中相关问题总结：悬浮性细胞应如何继代处理？一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００xg(约１,０００rpm)，５-１０分钟，过高之转速，将造成细胞死亡；细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因；细胞冷冻培养基之成份为何？动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成；DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO等级，必须为Tissue culture grade之DMSO，其本身即为无菌状况，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于４°C，避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质，并可减少污染之机会。若要过滤DMSO，则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜；冷冻保存细胞之方法？冷冻保存方法一：冷冻管置于４°C ３０~６０分钟→ (-２０°C ３０分钟)→-８０°C １６~１８小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase长期储存。-２０°C不可超过１小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？冷冻管内细胞数目一般为１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤细胞则以５x１０(６)cells/ml vial为宜；应如何避免细胞污染？细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法；如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？直接灭菌后丢弃之。 
细胞形态特性：淋巴母细胞样  
RM-1细胞系相关产品：ChaGo K-1细胞、HOP-92细胞、159PT细胞 
UCD-MLA-144细胞系相关产品：SW-900细胞、L132细胞、SK MEL 5细胞 
Saos2细胞系相关产品：BHK21细胞、CL MC/9细胞、RH-30细胞 
SNU368细胞系相关产品：NB-4细胞、GM02219细胞、Detroit562细胞 
A-427细胞系相关产品：D407细胞、Centre Antoine Lacassagne-62细胞、SL-1细胞 
U-343-MG细胞系相关产品：OUMS-27细胞、CMT 93细胞、H1568细胞 
P-388D1细胞系相关产品：OV1063细胞、L-Wnt3A细胞、Neuro 2a细胞 
V79-4细胞系相关产品：LAN5细胞、Tissue Culture-1细胞、HPAFII细胞 
H1373细胞系相关产品：Opossum Kidney细胞、SUP-T1细胞、JEKO细胞 
C4-2 Bone metastatic细胞系相关产品：H-82细胞、SW-527细胞、NBL-7细胞 
HEL 92.1.7细胞系相关产品：MA104细胞、MSTO-211 H细胞、T-24细胞 
HOS TE 85细胞系相关产品：293AD细胞、LI7细胞、MOVAS-1细胞 
WIL2 Secreting细胞系相关产品：H-441细胞、SNU-1细胞、Human fetal lung fibroblast 1细胞 
KPL4细胞系相关产品：GT1-1细胞、WML2细胞、ABC1细胞 
Tn5B1-4细胞系相关产品：PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞、B16/F10细胞、RCC10RGB细胞 
hFOB 1.19细胞系相关产品：HTR8细胞、MiaPaCa2细胞、THP-1(ATCC)细胞 
Centre Antoine Lacassagne-27细胞系相关产品：MDA435细胞、HIT-T15细胞、C17.2细胞 
B/C3T3细胞系相关产品：NCI-H1672细胞、HMC细胞、HNE3细胞 
HFL细胞系相关产品：HeLaS3细胞、hTERT RPE-1细胞、SKLU-1细胞 
SuDHL 4细胞系相关产品：Evsa T细胞、H-1876细胞、WTRL1细胞 
ARH-77 人浆细胞白血病细胞系
NCIH196细胞系相关产品：YES 2细胞、AZ521细胞、ZR75-1细胞 
Clone Y-1细胞系相关产品：C-Lu65细胞、H1666_DA细胞、CCLP1细胞 
HNTEC细胞系相关产品：MES-SA细胞、NRK clone 52E细胞、MCM细胞 
Hs 578.T细胞系相关产品：OUMS-23细胞、CT26WT细胞、UMUC-14细胞 
MOLM-13细胞系相关产品：NCI N87细胞、Sol8细胞、WEHI3B细胞 
D341MD细胞系相关产品：SHI-1细胞、Verda reno细胞、COLO-320-HSR细胞 
SJSA细胞系相关产品：CAL 12T细胞、MHCC-LM3细胞、Th17细胞 
P3HR1-BL细胞系相关产品：Pan02细胞、MCA-205细胞、SK-ES-1细胞 
Jurkat clone A3细胞系相关产品：LL/2 (LLC1)细胞、RTMC细胞、RIN m5F细胞 
Hs-688A-T细胞系相关产品：LNCaP.FGC细胞、ANA1细胞、HTR-8/SV-neo细胞 
PLB 985细胞系相关产品：SHI1细胞、OEC33细胞、FRH-0201细胞 
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EOC-20细胞系相关产品：SU-DHL-10细胞、KYSE-30细胞、MTC-TT细胞 
H2591细胞系相关产品：Hep G2-Luc细胞、SKOV-3细胞、CEMC7细胞 
CAL85-1细胞系相关产品：COLO-684细胞、GM03569D细胞、SGC-7901/DDP细胞 
C-33A细胞系相关产品：NCIH740细胞、CEM-T4细胞、PC3M-IE8细胞 
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BHK-21细胞系相关产品：QGP 1细胞、U266-B1细胞、SUM-190细胞 
A2780 CP70细胞系相关产品：Cor L88细胞、B958细胞、HELA-GFP细胞 
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J.E6-1细胞系相关产品：JROECL 33细胞、SU86_86细胞、18G3.cl 1细胞 
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H-1650细胞系相关产品：IPLB-SF 21细胞、DAKIKI Clone 1细胞、U 266细胞 
HPAFII细胞系相关产品：UM-UC-1细胞、SKG-3a细胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞 
McG-1细胞系相关产品：Y3.AG.1.2.3细胞、HPDEC细胞、ECV-304细胞 
C22 (Clara)细胞系相关产品：EFM-192C细胞、HCC1833细胞、NCI/ADRRES细胞 
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MCA 38细胞系相关产品：MeSoTheliOma-211H细胞、NSI/1-Ag4-1细胞、GC-1spg细胞 
Hep-3B细胞系相关产品：Hs445细胞、T24细胞、HOS/MNNG细胞 
J774 A1细胞系相关产品：Hs 895.T细胞、C-26细胞、OCIAML3细胞 
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SW-527细胞系相关产品：293E细胞、Capan-1细胞、PASMCS细胞 
Daoy细胞系相关产品：KMB-17细胞、UMRC-2细胞、Rat-2细胞 
OKT 3细胞系相关产品：SNU-638细胞、ROS17/2.8细胞、SK-N-BE(2)-M17细胞 
HEL-92-1-7细胞系相关产品：HCC-70细胞、Panc-3_27细胞、BNL.1ME A.7R.1细胞 
Baby Hamster Kidney 21细胞系相关产品：H2087细胞、DHBE细胞、H520细胞 
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Hep 2细胞系相关产品：RA细胞、MOLM-13细胞、LLC-PK-1细胞 
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