P388 小鼠白血病细胞系

"P388 小鼠白血病细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：淋巴母细胞样 
细胞传代注意事项：①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材；②每天观察细胞形态，掌握好细胞是否健康的标准：健康细胞的形态饱满，折光性好，生长致密时即可传代；③如发现细胞有污染迹象，应立即采取措施，一般应弃置污染的细胞，如果必须挽救，可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗，随后培养基中加入较大量的抗生素，并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持：细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的特点，要做好建系的维持必须记录好细胞档案,换液传代和做好细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。 
细胞生长：悬浮 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
P388 小鼠白血病细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。 
细胞传代方法：１：２传代 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁生长 
P388 小鼠白血病细胞系
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞（绝大部分１min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-３细胞），吹打不超过２０次后（一般１０次即可），成小规模聚集（１０个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法５min还不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
MDA361细胞系相关产品：HCC0038细胞、RCC 786-O细胞、QG56细胞 
CAKI 2细胞系相关产品：RPMI-6666细胞、BNL 1MEA.7R.1细胞、CHL/IU细胞 
MGc80-3细胞系相关产品：Hep 3B细胞、T98-G细胞、OVCAR432细胞 
C8166-CD4细胞系相关产品：KRCY细胞、CAL 27细胞、SMMC 7721细胞 
High Five细胞系相关产品：KLN-205细胞、SW-48细胞、D-341细胞 
BEL7404细胞系相关产品：Detroit562细胞、LNCaP FGC细胞、SACC83细胞 
GM05384细胞系相关产品：RWPE1细胞、MCF10-A细胞、SW403细胞 
C4-1细胞系相关产品：IOSE80UBC细胞、HeLa S 3细胞、COR-L88细胞 
NCI-H2405细胞系相关产品：MDA-MB-134VI细胞、OV3121细胞、MHHCALL2细胞 
ZR751细胞系相关产品：PK (15)细胞、DI TNC1细胞、CHP-212细胞 
L6细胞系相关产品：SKCO 1细胞、DU4475细胞、Michigan Cancer Foundation-12F细胞 
BMSC/hBMSCs细胞系相关产品：NCI-SNU-398细胞、H-820细胞、251MG细胞 
FRTL 5细胞系相关产品：RAW264细胞、OCI/AML-5细胞、NS1-Ag 4/1细胞 
RM-1细胞系相关产品：ChaGo K-1细胞、HOP-92细胞、159PT细胞 
NIT-1细胞系相关产品：NPA 87细胞、Co-115细胞、HCC202细胞 
ME180细胞系相关产品：PNT1-a细胞、L78细胞、Fetal Human Colon细胞 
ME180细胞系相关产品：PNT1-a细胞、L78细胞、Fetal Human Colon细胞 
SK-MEL-28细胞系相关产品：HSF细胞、AQ-Mel细胞、4-1st细胞 
V79细胞系相关产品：MDCKII-WT细胞、SW-948细胞、Tokyo Medical and Dental university 8细胞 
MC-3T3-E1细胞系相关产品：NUGC-4细胞、Mo 59J细胞、NCI-SNU-182细胞 
P388 小鼠白血病细胞系
Human fetal lung fibroblast 1细胞系相关产品：OCI AML3细胞、LC-1 sq细胞、WM239细胞 
NPA'87细胞系相关产品：Lewis-Lung细胞、HBZY1细胞、87 MG细胞 
SUM 149细胞系相关产品：Detroit-562细胞、CHL1细胞、HT(H9)细胞 
KTC-1细胞系相关产品：RPMI 8226细胞、UMC11细胞、A 375细胞 
9L细胞系相关产品：ZYM-DIEC02细胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells细胞、HCC1008细胞 
PC-3/M细胞系相关产品：184A1细胞、NCM356细胞、H1155细胞 
MKN-45细胞系相关产品：SHSY-5Y细胞、HPB/ALL细胞、MCF-7细胞 
IM 9细胞系相关产品：3T3 J2细胞、16HBEo-细胞、PANC 203细胞 
RGC6细胞系相关产品：SF-295细胞、MFE 296细胞、KYSE 180细胞 
CCK81细胞系相关产品：HLE-B3细胞、IOSE29细胞、NCI H23细胞 
SNU520细胞系相关产品：H2170细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6细胞、MPASMC细胞 
SCC-25细胞系相关产品：ZR75-1细胞、HUT 28细胞、RPMI #1846细胞 
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞系相关产品：H211细胞、CLL-CII细胞、bEnd.3[BEND3]细胞 
HCC1171细胞系相关产品：Wistar Institute-38细胞、MiaPaCa-2细胞、DSL-6A/C1细胞 
HUVSMC细胞系相关产品：H1436细胞、H2081细胞、SKMEL-1细胞 
EL 4细胞系相关产品：L5178Y细胞、Hs 294T细胞、HuH-28细胞 
OCILY3细胞系相关产品：Madison细胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3细胞、HEK AD293细胞 
SupB15W细胞系相关产品：SNU387细胞、EOMA细胞、COLO-16细胞 
TK 10细胞系相关产品：MC-116细胞、AG06814-N细胞、CAL851细胞 
P31/FUJ细胞系相关产品：SNUC2A细胞、NFS-60细胞、MIA-Pa-Ca-2细胞 
BHT101细胞系相关产品：NBL-7细胞、MB231细胞、UMUC-3细胞 
Hepatoma 22细胞系相关产品：GM03190A细胞、NCI-H1563细胞、OCILY-19细胞 
SUNE-1细胞系相关产品：D10G41细胞、SCC 15细胞、Hs822T细胞 
OE33细胞系相关产品：HPMC细胞、Ramos 2G6 4C10细胞、SK Hep1细胞 
BT-474细胞系相关产品：T-47-D细胞、Ly10细胞、BC-028细胞 
DMS-53细胞系相关产品：HPDEC细胞、Hs 695.T细胞、HL-7702细胞 
H-209细胞系相关产品：253J-BV细胞、UCLA RO-81A-1细胞、KS-1 [Human glioblastoma]细胞 
HEK-293-H细胞系相关产品：LK-2细胞、Reh细胞、SHG 44细胞 
TE-8细胞系相关产品：Wien-133细胞、Daudi细胞、Wien 133细胞 
Epstein-Barr-3细胞系相关产品：SHG44细胞、Roswell Park Memorial Institute 2650细胞、NEC-8细胞 
SW 837细胞系相关产品：NCIH2122细胞、NCM-460细胞、Kasumi-1细胞 
C4-2 Bone metastatic细胞系相关产品：H-82细胞、SW-527细胞、NBL-7细胞 
Caov-3细胞系相关产品：BLO 11细胞、LUDLU 1细胞、SUM-52细胞 
PTK2细胞系相关产品：JIII细胞、OVCAR3细胞、MDA-MB-435 S细胞 
VK-2/E6E7细胞系相关产品：HS-445细胞、HT(H9)细胞、GLC82细胞 
SPDC-CCL141细胞系相关产品：CCC-HEH-2细胞、CHP-126细胞、LTEP a2细胞 
ES2细胞系相关产品：OCI AML5细胞、ChaGo-K1细胞、32D/cl3细胞 
A20细胞系相关产品：HNE2细胞、HME1细胞、95C细胞 
SNU-601细胞系相关产品：NT2/D1细胞、PANC-03-27细胞、DSL-6A-C1细胞 
QBC(939)细胞系相关产品：HSC（Human Schwann）细胞、ARPE-19细胞、MuM-2C细胞 
M619细胞系相关产品：H498细胞、PC-10细胞、UM-RC-2细胞 
P388 小鼠白血病细胞系
HT115细胞系相关产品：OCI-AML-5细胞、SNU5细胞、SKMEL3细胞 
MT4细胞系相关产品：B6Tert-1细胞、XWLC-05细胞、MRC-5细胞 
Duck embryo细胞系相关产品：ECC12细胞、SCLC21H细胞、Sp 2817细胞 
H2135细胞系相关产品：HCC-1143细胞、Pa14C细胞、OCI-Ly19细胞 
CHL-CL-11细胞系相关产品：AE1201细胞、H-2228细胞、H125细胞 
J774.A1细胞系相关产品：DMS114细胞、UMR 106细胞、RGC-6细胞 
ARPE19细胞系相关产品：Balb/3T3-4-Cl31细胞、U 937细胞、IM 9细胞 
HUT-28细胞系相关产品：P-815细胞、Hut292细胞、NMCG1细胞 
PL 45细胞系相关产品：RK 13细胞、HC-11细胞、Human Embryo Lung-1细胞 
MOLM-13细胞系相关产品：NCI N87细胞、NCIH2228细胞、COLO 357细胞 
MD Anderson-Metastatic Breast-231细胞系相关产品：95D细胞、SKMES细胞、HLF-a细胞 
MGc80-3细胞系相关产品：Hep 3B细胞、IOSE-29细胞、Vero-E6细胞 
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