ANA-1 小鼠巨噬细胞系

"ANA-1 小鼠巨噬细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：淋巴母细胞样 
细胞培养方面注意的几点：无菌意识要强：实验进行前，超净台以紫外灯照射３０分钟灭菌，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启超净工作台风扇运转数分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置，其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以７０%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域，一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约４５°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基：不同的细胞可能培养基不同，甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞，有文献就选用neurobase培养基，而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而这种培养基中含有抗氧化剂成分，此时，我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:４℃冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指５６℃，３０分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到５６℃后，将血清放入，待温度升高到５６℃后计时，一般５分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须，一般不要作此热处理，因为会造成沉淀物之显著增多，且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。 
细胞生长：悬浮 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
ANA-1 小鼠巨噬细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
公司细胞库冻存并保种有2300多种各类细胞系。针对每种不同的细胞系，公司摸索并积累了大量细胞培养条件和优化参数，为您的细胞实验保驾护航。细胞培养是生命科学研究中最基础、也是最常用的实验手段。从冻存→复苏→传代→实验，在每一次细胞培养的过程中我们都是精心呵护，小心培养，心里都是默默承诺：我要护你一世周全！可是可是……无数次细胞都因污染而离我而去，投入的不只是我们貌美如花的青春，还有那一去不复返的经费！在细胞生物学，生物化学，免疫学，神经生物学，病理学……只要涉及细胞的研究领域，都面临着支原体污染的威胁。在众多污染物中，也就属支原体最狡猾了，他最善于隐藏自己，因为被支原体污染的细胞不会马上死亡，但会改变细胞的新陈代谢，甚至会改变细胞的基因表达谱，我们就这样被欺骗了无数次，谁让我们就是个看“颜值”的花痴了。可是我们通过被虐了几百次的经验中总结出来，当你的细胞出现了这些症状时：生长速率改变；活性减弱；形态改变；染色体畸变；转染效率显著降低；细胞复苏后存活率降低……。那你就得千万小心了，也许你的细胞已经被支原体欺凌了！ 
细胞传代方法：１：２传代 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：悬浮生长 
ANA-1 小鼠巨噬细胞系
如何把细胞养的形态更好更漂亮。１.不同的细胞，喜欢的环境是不一样的。这个不仅仅是说培养基的不同，还有就是细胞生长的空间密度问题。有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。２.对于有些人总是会遇到养的细胞形态怎么都不好的问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入３ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入３ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞我们只吹打，不消化的）；其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。１０分钟观察一次，２０分钟，３０分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入３ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。我称之为“二传”。呵呵。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞完美形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。３.关于培养瓶内加入培养基的量的问题。这个是要靠自己去摸索你所养的细胞的。并不是小的玻璃方瓶１２ml，大方瓶１４ml的。有些细胞反而是培养基少一点相反细胞形态会长得比较好。（可能也是竞争很大，有优胜劣汰吧。呵呵。）对于生长速度快的细胞，易生长的细胞加少一点培养基细胞形态会更好。但是要注意换液掌握。４.关于选择培养瓶的问题。个人发现生长速度快的细胞在玻璃瓶内生长的状态会比一次性相对好一些。而对于同一种细胞，在其生长旺盛快速的时期在玻璃瓶内的生长状态也比内好。这可能是因为比玻璃瓶更容易贴壁。生长速度快的细胞在这种相对“更安逸”的环境里反而长得状态不如玻璃瓶好。所以对于生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态，比玻璃瓶会好，对于生长速度慢的细胞，玻璃瓶则会更好。同样，对于同一种细胞，在其生长速度慢的时候，会好一点，比如刚刚复苏的时候，或者原代培养的时候。而在其生长旺盛的时候，玻璃瓶则相对会好一点。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
H520细胞系相关产品：EoL-1 cell细胞、NCIH660细胞、MLA-144细胞 
HSC1细胞系相关产品：PC 61 5.3细胞、HLMVEC细胞、HT1376细胞 
MA 104细胞系相关产品：IHHA-1细胞、NCIH1876细胞、NCI-H1568细胞 
NCI-841细胞系相关产品：AML-2细胞、Rat1细胞、LS180细胞 
L cell line细胞系相关产品：IBMF-7细胞、Hs839T细胞、SUM102PT细胞 
ZR751细胞系相关产品：PK (15)细胞、DI TNC1细胞、CHP-212细胞 
NCI-H2227细胞系相关产品：H-2286细胞、HC11细胞、FAT细胞 
KAT-5细胞系相关产品：NCIH2030细胞、NCIH1993细胞、CMT93细胞 
HPC-Y5细胞系相关产品：GM02131A细胞、H1694细胞、IEC 6细胞 
SHI1细胞系相关产品：RAG细胞、U266 Bl细胞、LIM1215细胞 
B958细胞系相关产品：J774A.1细胞、C4-2 Bone metastatic细胞、NCI-H2195细胞 
MNNG/HOS Cl #5细胞系相关产品：Chinese Hamster Lung细胞、CHP-212细胞、Hs 895 T细胞 
CAKI 2细胞系相关产品：RPMI-6666细胞、BNL 1MEA.7R.1细胞、CHL/IU细胞 
IGROV-1细胞系相关产品：G361细胞、PC-9/GR细胞、RPE-1细胞 
NB4细胞系相关产品：Hep G2细胞、H524细胞、COR-L105细胞 
NCI-H2135细胞系相关产品：DV90细胞、TGBC11T细胞、ISHI细胞 
NCI-H2135细胞系相关产品：DV90细胞、TGBC11T细胞、ISHI细胞 
NTERA-2/D1细胞系相关产品：RM-1细胞、H-520细胞、MAVER-1细胞 
MDA-MB 361细胞系相关产品：Roswell Park Memorial Institute 6666细胞、HUASMC细胞、SF-126细胞 
HEI193细胞系相关产品：DLD1细胞、138MG细胞、UMNSAH/DF-1细胞 
ANA-1 小鼠巨噬细胞系
NCl-H157细胞系相关产品：BC-027细胞、HITT15细胞、MDA-134细胞 
ID8细胞系相关产品：IPI-2I细胞、RA 1细胞、FHs 74 Int细胞 
NCIH1975细胞系相关产品：SW 480细胞、Tb 1 Lu细胞、ME-1 [Human leukemia]细胞 
H1650细胞系相关产品：H2171细胞、PLB-985细胞、HCCLM6细胞 
Adeno-293细胞系相关产品：VMRC-LCD细胞、TSCC1细胞、8402细胞 
MCF7-CTRL细胞系相关产品：SK HEP-1细胞、RS411细胞、Caco-2细胞 
WM 115细胞系相关产品：FU-OV-1细胞、N-2a细胞、BT325细胞 
NCIH1437细胞系相关产品：H1385细胞、Madison lung细胞、PL11细胞 
Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞系相关产品：UACC 893细胞、JVM2细胞、LS-411N细胞 
HEK293细胞系相关产品：U-343-MG细胞、HIMEC细胞、Murine Carcinoma-38细胞 
HR8348细胞系相关产品：DHL10细胞、LS174T细胞、DMS153细胞 
HCe-8693细胞系相关产品：MOLM-16细胞、UACC893细胞、OCIAML5细胞 
HS 683T细胞系相关产品：NCI-H522细胞、U266细胞、3T3-Swiss细胞 
TALL 1细胞系相关产品：Michigan Cancer Foundation-12F细胞、SW837细胞、MPC-5细胞 
686LN-M4e细胞系相关产品：HSC-2细胞、Dx5细胞、786-O RCC细胞 
BT483细胞系相关产品：SN-12C细胞、RPMI8226/S细胞、NCI-H1648细胞 
HEK293A细胞系相关产品：NK62a细胞、Panc 4.03细胞、L-540细胞 
HEC-251细胞系相关产品：GM17346细胞、SV40-MES13细胞、MDA-MB361细胞 
TK-10细胞系相关产品：Panc 03.27细胞、FLC-7细胞、Hep2细胞 
SF126细胞系相关产品：KMH-2细胞、MCA 205细胞、MKN 7细胞 
Madin-Darby Canine Kidney细胞系相关产品：U-251细胞、CCC-HEL-1细胞、RERF-LC-MS细胞 
MD Anderson-Metastatic Breast-453细胞系相关产品：Gingival carcinoma Neck Metastasis细胞、Okayama University Medical School-23细胞、FHL124细胞 
OCLY8细胞系相关产品：PF-382细胞、Hs940T细胞、U251MG细胞 
TK-1细胞系相关产品：TM3细胞、PC-3M细胞、GLC-15细胞 
RL细胞系相关产品：SCC90细胞、NCIH596细胞、C22细胞 
MT2细胞系相关产品：HS-294-T细胞、BIU87细胞、DMS273细胞 
Lewis lung carcinoma line 1细胞系相关产品：MDA157细胞、IPEC-1细胞、SNU119细胞 
NCI-SNU-C2B细胞系相关产品：X63-Ag8细胞、SUM 52细胞、GL261细胞 
MDA.MB.435细胞系相关产品：B-cell with DC Morphology细胞、PCI-4.2细胞、Liver-02细胞 
MDA-MB-435-S细胞系相关产品：Kit225-K6细胞、NTERA2D1细胞、Hs 737.T细胞 
BC-020细胞系相关产品：C-8161细胞、Vero E6细胞、B-16细胞 
IPLB-Sf21-AE细胞系相关产品：SNU1细胞、H-1648细胞、MT-2J细胞 
HLEB3细胞系相关产品：McA-RH 7777细胞、2780CP细胞、NRK-52E细胞 
P3/ag细胞系相关产品：HECCL-1细胞、NCI-HUT-292细胞、B-cell with DC Morphology细胞 
HCC-1419细胞系相关产品：Adeno 293细胞、MCFs细胞、INS-1E细胞 
HBVP细胞系相关产品：NCIH1793细胞、Panc-8_13细胞、Reuber H35细胞 
H838细胞系相关产品：E.G7-OVA细胞、Hs 600.T细胞、AML-2细胞 
University of Michigan-Renal Carcinoma-2细胞系相关产品：HT 1376.T细胞、OVCAR 433细胞、PANC 1005细胞 
TGBC11TKB细胞系相关产品：NCIH2085细胞、NCTC-3960细胞、OVCAR-433细胞 
NTERA-2 cl.D1细胞系相关产品：GM02219细胞、HMC3细胞、B16/F1细胞 
IR 983F细胞系相关产品：MDA-MB-231 #4175细胞、Detroit-562细胞、HCT GEO细胞 
ANA-1 小鼠巨噬细胞系
Tb 1 Lu细胞系相关产品：MCF.10A细胞、BEL 7402细胞、NHRF细胞 
MM.1S细胞系相关产品：HCC-1419细胞、C-4I细胞、F36P细胞 
T-84细胞系相关产品：SK-RC 39细胞、HCC1500细胞、BHP10-3细胞 
DHL-16细胞系相关产品：MyLa2059细胞、NS1-Ag4细胞、ARO81-1细胞 
HEL-92细胞系相关产品：Hs 737.T细胞、NCIH1184细胞、PT-K75细胞 
G-Olig2细胞系相关产品：C3H10T1-2细胞、SNUC1细胞、Calu 6细胞 
LTEP-a2细胞系相关产品：S37细胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1细胞、WRL68细胞 
H157细胞系相关产品：CCRF-CEM C1细胞、NCIH1048细胞、NCIH841细胞 
P30OHK细胞系相关产品：Rat-2细胞、H-4-II-E细胞、SK-MEL-5细胞 
HA细胞系相关产品：HOS/MNNG细胞、T24细胞、KMS-18细胞 
BNL CL.2细胞系相关产品：TF1细胞、PG-4 (S+L-)细胞、NCI-H647细胞 
MA 104细胞系相关产品：IHHA-1细胞、SCaBER细胞、HONE-1细胞 
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