H9 人T淋巴瘤细胞系

"H9 人T淋巴瘤细胞系
细胞背景资料：H９细胞是HUT７８（ATCCTIB１６１）的克隆系（Callo，RC，etal）。细胞表面带有CD３、CD４标记。研究表明，该细胞系对人体免疫缺陷病毒（HIV-１）敏感，可用于检测、分离和增殖HIV-１，也可用于其它人类Tcell病毒的研究。 
细胞形态：淋巴母细胞样 
细胞培养无菌操作的演示：凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精灯火焰操作。器皿使用前必须过火灭菌，继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在高处，使用时仍要过火。各种操作要靠近酒精灯，动作要轻、准确，不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自来水刷洗，除去灰尘。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小时以除去脏物、铅、等物。刷洗、烘干：１２小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲干净后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清洁液浸泡１２小时，然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗１５次，最后蒸馏水冲洗３-５次和用双蒸水过３次。烘干、包装：洗干净后先烘干，然后用牛皮纸(油光纸)包装。高压消毒：包装好的器皿装入高压锅内盖好盖子，打开开关和安全阀，当蒸气成直线上升时，关闭安全阀，当指针指向１５磅时，维持２０-３０分钟。高压消毒后烘干。二、旧的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中，泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清洁液(酸液)，１２小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗)，再用蒸馏水冲洗３次。烘干、包装：洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装。 
细胞生长：悬浮 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
H9 人T淋巴瘤细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
我们都知道世界宇宙浩瀚无极，除了我们知道的地球、太阳、月球、银河系以外还有好多其他宇宙行星，这样的世界对于很多人来说很陌生稀奇甚至无法想象，这样的世界同样也是我们无法触摸的，然而还有一个微观的世界也是我们无法接触的，这个就是——细胞里的微观世界。对于很多人来说，除了从书本上简单了解植物细胞的知识以外，在行业外人的意识里，细胞还是一个让人一头雾水的词语，甚至都是一个无形的存在，更别提描述和看见这个东西，但是对于行业内的生物科学研究者和医学研究者，这是个经常被运用到的必需之物，用宇宙世界的包含于被包含的关系把细胞的微观世界剖析开来，让我们了解到细胞是什么样的东西及应用和未来世界细胞在生命中的重要作用。细胞发炎——心脏疾病；DNA受损——癌症；细胞能量衰退——肾功能衰竭、关节炎、帕金森氏；老化蛋白堆积——糖尿病、痴呆症、心脑血管疾病；所有的衰老和疾病都是机体内细胞开的损伤、衰老和死亡造成的。所以细胞在科学研究和医学研究中有着重要的应用作用，尤其是原代细胞，它是从机体组织中分离提取培养，它可以作为一种科研材料帮助研究者进行项目研究和课题研究，也可以帮助医学者进行疾病研究和疾病试验，试想从人体组织中分离培养的细胞经过医学药物的试验再运用到人体身上，无论从功效还是结果上效果都是。 
细胞传代方法：１：３传代,２-３天传一代 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：悬浮生长 
H9 人T淋巴瘤细胞系
细胞培养过程中相关问题总结：悬浮性细胞应如何继代处理？一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００xg(约１,０００rpm)，５-１０分钟，过高之转速，将造成细胞死亡；细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因；细胞冷冻培养基之成份为何？动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成；DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO等级，必须为Tissue culture grade之DMSO，其本身即为无菌状况，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于４°C，避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质，并可减少污染之机会。若要过滤DMSO，则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜；冷冻保存细胞之方法？冷冻保存方法一：冷冻管置于４°C ３０~６０分钟→ (-２０°C ３０分钟)→-８０°C １６~１８小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase长期储存。-２０°C不可超过１小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？冷冻管内细胞数目一般为１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤细胞则以５x１０(６)cells/ml vial为宜；应如何避免细胞污染？细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法；如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？直接灭菌后丢弃之。 
细胞形态特性：淋巴母细胞样 
NOK细胞系相关产品：Biologics Standards-Cercopithecus-1细胞、RPMI 1846细胞、DoHH2细胞 
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