MUS-M1 小鼠小肠平滑肌细胞系

"MUS-M1 小鼠小肠平滑肌细胞系
细胞背景资料：小肠；平滑肌 
细胞形态：成纤维细胞样 
细胞培养无菌操作的演示：凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精灯火焰操作。器皿使用前必须过火灭菌，继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在高处，使用时仍要过火。各种操作要靠近酒精灯，动作要轻、准确，不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自来水刷洗，除去灰尘。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小时以除去脏物、铅、等物。刷洗、烘干：１２小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲干净后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清洁液浸泡１２小时，然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗１５次，最后蒸馏水冲洗３-５次和用双蒸水过３次。烘干、包装：洗干净后先烘干，然后用牛皮纸(油光纸)包装。高压消毒：包装好的器皿装入高压锅内盖好盖子，打开开关和安全阀，当蒸气成直线上升时，关闭安全阀，当指针指向１５磅时，维持２０-３０分钟。高压消毒后烘干。二、旧的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中，泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清洁液(酸液)，１２小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗)，再用蒸馏水冲洗３次。烘干、包装：洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
MUS-M1 小鼠小肠平滑肌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞建议只吹打，不消化）其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁 
MUS-M1 小鼠小肠平滑肌细胞系
细胞的冻存：目前，细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０(６)～１×１０(７)/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
SJSA细胞系相关产品：CAL 12T细胞、MHCC-LM3细胞、Th17细胞 
H4-IIE-C3细胞系相关产品：CAL 27细胞、Human Embryonic Kidney 293细胞、Walker-Ca.256细胞 
H-661细胞系相关产品：PCI-4M细胞、MKN7细胞、HCC1359细胞 
MPC5细胞系相关产品：COLO-HSR细胞、CCRF.CEM细胞、H-2052细胞 
CCRF.CEM细胞系相关产品：OCIAML2细胞、SUDHL-16细胞、Hs 688(A).T细胞 
RCSMC细胞系相关产品：OVCAR.8细胞、H-2073细胞、LAN-5细胞 
HS-294T细胞系相关产品：HF-91细胞、Hep 2细胞、LIXC002细胞 
Kit225 K6细胞系相关产品：2780细胞、PA12细胞、NCI-H508细胞 
ACT-1细胞系相关产品：LC-2-Ad细胞、SW1990细胞、H1688细胞 
9L细胞系相关产品：ZYM-DIEC02细胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells细胞、HCC1008细胞 
OVCA432_Bast细胞系相关产品：NCI-A549细胞、130-T细胞、SW-1271细胞 
GM-346细胞系相关产品：OVHM细胞、KM H-2细胞、NBLS细胞 
NCI-446细胞系相关产品：RM1细胞、H1522细胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1细胞 
BSC-40细胞系相关产品：MC/9细胞、WiDrTC细胞、ANA1细胞 
MOLT.4细胞系相关产品：H295细胞、A2780S细胞、DCS细胞 
SK-N-AS细胞系相关产品：FDCP-1细胞、NCI N87细胞、CCRF细胞 
Adeno-293细胞系相关产品：VMRC-LCD细胞、TSCC1细胞、8402细胞 
HOPC细胞系相关产品：UACC-893细胞、Normal Rat Kidney细胞、H209细胞 
MFC细胞系相关产品：MC3T3-L1细胞、C-Li-7细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2细胞 
ECV 304细胞系相关产品：SK-MEL24细胞、NCI-H596细胞、THLE-2细胞 
MUS-M1 小鼠小肠平滑肌细胞系
TPC1细胞系相关产品：TE-4细胞、Mono Mac 1细胞、U-373MG细胞 
KYSE50细胞系相关产品：HMVEC细胞、OCI-Ly10细胞、EJ-1细胞 
SKNSH细胞系相关产品：OVCAR 432细胞、Pfeiffer细胞、AR41P细胞 
Panc 3.27细胞系相关产品：J774细胞、P3JHR-1细胞、HS852.T细胞 
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AZ-521细胞系相关产品：MADISON LUNG TA-109细胞、MOLT.4细胞、T98-G细胞 
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JROECL 19细胞系相关产品：BI-Mel细胞、KRC Y细胞、HBSMC细胞 
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WEHI 231细胞系相关产品：Tn 5B1-4细胞、H1793细胞、H647细胞 
H295细胞系相关产品：T173细胞、CMK细胞、KRCY细胞 
MUS-M1 小鼠小肠平滑肌细胞系
U 138 MG细胞系相关产品：A375-MEL细胞、R-1059-D细胞、32D-Cl3细胞 
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