MH7A 关节炎成纤维细胞系

"MH7A 关节炎成纤维细胞系
细胞背景资料：关节；成纤维细胞；SV４０转化；女性 
细胞形态：成纤维细胞样 
购买细胞注意事项：１)收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系；２)仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等；３)用７５%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次；４)建议客户收到细胞后前３天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和公司技术部沟通交流。【细胞传代操作步骤】一、贴壁细胞传代：１)提前将培养基、PBS放入３７℃水浴锅内预热，用７５%酒精擦拭后再放入超净台内；２)吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞；３)加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，３７℃孵育，每隔２~３min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用；４)用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡；５)将细胞悬液分别接种到另外的２~３个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置３７℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。二、悬浮细胞传代：１)将细胞悬液转移到无菌离心管内，１０００rpm离心５min；２)弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液；３)将细胞悬液分别接种到另外的２~３个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置３７℃温箱培养。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
MH7A 关节炎成纤维细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁 
MH7A 关节炎成纤维细胞系
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞（绝大部分１min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-３细胞），吹打不超过２０次后（一般１０次即可），成小规模聚集（１０个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法５min还不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
H2073细胞系相关产品：253J B-V细胞、CSQT-2细胞、McA-RH8994细胞 
GM 2132细胞系相关产品：GM04154B细胞、GI-1细胞、EFM-192A细胞 
NFS60细胞系相关产品：HUT-125细胞、PLC PRF 5细胞、P1-Raji细胞 
GM00215A细胞系相关产品：HOSEpiC细胞、H2122细胞、GM02219D细胞 
SCC 25细胞系相关产品：NCI-H1650细胞、hESC细胞、PAN 02细胞 
NCI-H1755细胞系相关产品：BEAS2B细胞、Leukemia 1210细胞、LCLC103H细胞 
MS 751细胞系相关产品：OVCA5细胞、BALB 3T3 clone A31细胞、NCI-H520细胞 
ECGI10细胞系相关产品：CG4细胞、BDCM细胞、C3H/10T1/2 clone 8细胞 
VM-CUB1细胞系相关产品：HSC4细胞、MSCs（mUCMSCs）细胞、SW-948细胞 
LU165细胞系相关产品：WIL2-S细胞、hMSC-BM细胞、HCT 116细胞 
MDBK (NBL-1)细胞系相关产品：H378细胞、RIN-m细胞、COR-L23/P细胞 
MCF 7细胞系相关产品：293-GP细胞、MyLa2059细胞、NCI-H2444细胞 
WM 239细胞系相关产品：PAEC细胞、DLD-1细胞、HCT8细胞 
NOR 10细胞系相关产品：Capan1细胞、CTX TNA2细胞、Hut292细胞 
MUGCHOR1细胞系相关产品：no.11细胞、HCCC-9810细胞、WIL2S细胞 
GRSL细胞系相关产品：Granta519细胞、DBTRG-05MG细胞、NCI-H1836细胞 
GRSL细胞系相关产品：Granta519细胞、DBTRG-05MG细胞、NCI-H1836细胞 
OCM-1A细胞系相关产品：A.704细胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B细胞、OCILY3细胞 
DH 82细胞系相关产品：A549/DDP细胞、MEG01细胞、IMR 32细胞 
THP-1(ATCC)细胞系相关产品：J.E6-1细胞、BLO-11细胞、Vero 76细胞 
MH7A 关节炎成纤维细胞系
NCI-H-295细胞系相关产品：KM932细胞、LN-229细胞、NCCIT细胞 
3T3-Swiss albino细胞系相关产品：RPTEC/TERT1细胞、SVG(P12)细胞、ANA-1细胞 
KYSE-180细胞系相关产品：SUM190细胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞、SKNBE(1)细胞 
T2细胞系相关产品：HCC-38细胞、Mel-624细胞、Hs-695-T细胞 
PIEC细胞系相关产品：SK-SH-SY5Y细胞、GC-1 spg细胞、WiDr-TC细胞 
NE-1细胞系相关产品：159 PT细胞、MGC803细胞、HSC-6细胞 
UPCI:SCC154细胞系相关产品：PTK1细胞、Lu99A细胞、HSC3细胞 
Detroit562细胞系相关产品：NALM-6细胞、OE-33细胞、UCD-MLA-144细胞 
PL-5细胞系相关产品：CCRF-CEM细胞、UACC-893细胞、NTera2 cl.D1细胞 
COLO-394细胞系相关产品：H810细胞、T2 (174 x CEM.T2)细胞、NBL-12细胞 
MG-HU-3细胞系相关产品：TE-32细胞、CCD-1112sk细胞、LTEPa2细胞 
OE-19细胞系相关产品：Nthy-ori 3.1细胞、CTLA4Ig-24细胞、JM-1细胞 
HOS TE 85细胞系相关产品：293AD细胞、LI7细胞、MOVAS-1细胞 
GTL-16细胞系相关产品：H35 Reuber细胞、SNG-M细胞、Colo205细胞 
SK-HEP-1细胞系相关产品：SKM-1细胞、MC3T3-E1细胞、rRMECs细胞 
PL-12细胞系相关产品：MOLT-3细胞、NCIH747细胞、NIE-115细胞 
CAL-27细胞系相关产品：CAL-51细胞、My-La 2059细胞、NCI-747细胞 
S3-HeLa细胞系相关产品：Hi-five细胞、RPTEC/TERT 1细胞、HNTEC细胞 
SW-13细胞系相关产品：B35细胞、RH35细胞、MCF-7B细胞 
D324细胞系相关产品：IMR32细胞、NCI-H211细胞、RMC-1细胞 
SK HEP 01细胞系相关产品：HcaF细胞、Wien-133细胞、CAMA-1细胞 
ZR7530细胞系相关产品：Caco2-BBE细胞、293-F细胞、H-1092细胞 
COLO-738细胞系相关产品：Roswell Park Memorial Institute 1846细胞、M3 Clone M-3细胞、GM05862细胞 
NCI-H2198细胞系相关产品：Ca761细胞、OVCAR5细胞、DSL6A/C1细胞 
SU-DHL-1细胞系相关产品：DU-145细胞、H28细胞、A375-MEL细胞 
COLO 16细胞系相关产品：EFM192C细胞、MSTO-211H细胞、MES23.5细胞 
BE2M17细胞系相关产品：LLC-PK-1细胞、KU 19-19细胞、Ketr-3细胞 
Leukemic 1210细胞系相关产品：NCI-H2108细胞、H-1693细胞、Co320细胞 
T-HEECs细胞系相关产品：QBI-HEK 293A细胞、MV4;11细胞、MDA134细胞 
H-1770细胞系相关产品：RSC 96细胞、Fetal Human Lens-124细胞、PLC/PRF/5细胞 
Human Melanoma Cell Bowes细胞系相关产品：Jeko1细胞、hEM15A细胞、Ca 9-22细胞 
NCI-H2085细胞系相关产品：L-6细胞、H-7721细胞、HT55细胞 
NHDF细胞系相关产品：CAL 33细胞、UCLA-SO-M21细胞、D341 Med细胞 
MDCK Type II细胞系相关产品：LMH细胞、Michigan Cancer Foundation-12F细胞、HEC-1A细胞 
GM03573A细胞系相关产品：Panc 5.04细胞、NOMO1细胞、LLC-PK1细胞 
HPB-ALL细胞系相关产品：Eca 109细胞、H3396细胞、PCI-4.2细胞 
NCTC-1469细胞系相关产品：COLO-357细胞、Jeko1细胞、FRhK4细胞 
KYSE510细胞系相关产品：Eph4 1424细胞、AE1201细胞、Ramos 2G6.4C10细胞 
SUDHL-6细胞系相关产品：MCF-10 Attached细胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2细胞、RGC-5细胞 
UCLA SO M21细胞系相关产品：MAVER-1细胞、Mono Mac 6细胞、SF-295细胞 
Cloudman S91 melanoma细胞系相关产品：COLO 206细胞、CAL39细胞、NCI-522细胞 
MH7A 关节炎成纤维细胞系
COLO 684细胞系相关产品：NCI-SNU-620细胞、AtT-20细胞、SKMEL2细胞 
SK Hep1细胞系相关产品：D-324MED细胞、Murine Lung Epithelial-12细胞、CCD841CoTr细胞 
P3X63Ag8653细胞系相关产品：A704细胞、CHO cell clone K1细胞、HEC-1B细胞 
H22-H8D8细胞系相关产品：CHL1细胞、NCI-H69C细胞、HS-294-T细胞 
CCD-1095Sk细胞系相关产品：SCC 9细胞、hFOB 1.19细胞、HCO细胞 
SGC 7901细胞系相关产品：U-2932细胞、UK Pan-1细胞、P30/0HK细胞 
Jurkat E6.1细胞系相关产品：H-1869细胞、H2291细胞、NCI522细胞 
Suzhou Human Glioma-44细胞系相关产品：52PE细胞、H-157细胞、B16 melanoma F10细胞 
TE-8细胞系相关产品：Wien-133细胞、Daudi细胞、Wien 133细胞 
KYSE-140细胞系相关产品：MDA-MB-453细胞、Kato-III细胞、HEK 293细胞 
WM-2664细胞系相关产品：Mahlavu细胞、PAI细胞、GM00215A细胞 
NFS60细胞系相关产品：HUT-125细胞、NGEC细胞、RPMI 1846细胞 
"