HFF-1 人包皮成纤维细胞系

"HFF-1 人包皮成纤维细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：成纤维细胞样 
细胞培养方面注意的几点：无菌意识要强：实验进行前，超净台以紫外灯照射３０分钟灭菌，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启超净工作台风扇运转数分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置，其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以７０%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域，一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约４５°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基：不同的细胞可能培养基不同，甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞，有文献就选用neurobase培养基，而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而这种培养基中含有抗氧化剂成分，此时，我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:４℃冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指５６℃，３０分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到５６℃后，将血清放入，待温度升高到５６℃后计时，一般５分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须，一般不要作此热处理，因为会造成沉淀物之显著增多，且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
HFF-1 人包皮成纤维细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可。吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足够消化细胞。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后37℃消化。比较难消化的细胞（润洗方法5min还不能消化），这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育。不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性。如果和标准形态不一致，那可能是自己没消化好导致的，但如果消化方法正确，仍然成片分布，甚至完全吹打成单细胞悬液，贴壁后仍然成片分布，这是细胞的特性，是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布，你的细胞之后会对你越来越不好。 
细胞传代方法：１：５-１：７传代 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁生长 
HFF-1 人包皮成纤维细胞系
细胞冻存基本方法：１．细胞：选对数生长期细胞，收集细胞２４小时前换液一次。２．计数：按常规方法把细胞制成细胞悬液，计数，令细胞密度达５×１０(６)/ml，离心去上清，吸入离心管中。３．冻存液：先用培养液９分＋DMSO １分（或甘油）配成１０％的DMSO冻存液，按上法一滴滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。４．分装：分装入无菌安剖中，每安剖加１.５毫升细胞悬液。５．封口：用塑料安剖时拧紧瓶口即可；如用火焰封闭安剖口后，仔细检查，定要封严，必要时可浸入蓝色液中观察，为安全起见，把安剖缝入纱布小袋中，以防液氮浸入后，融解时因受热发生爆炸伤人；纱袋一端系以线绳，末端扎有小牌，注明：细胞名称，冻存日期，以便日后查找。细胞株(系)的使用，为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的，长期连续传代的细胞，不仅消耗大量的人力和物力，而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化，因而细胞失去原有的遗传特性，有时还会由于细胞污染而造成传代中断，种子丢失。因此，在实际工作中常需冻存一定数量的细胞，以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。 
细胞形态特性：成纤维细胞 
Hs 742.T细胞系相关产品：High5细胞、H-1435细胞、B16 subline B78细胞 
SU-DHL-1细胞系相关产品：DU-145细胞、H28细胞、A375-MEL细胞 
Bac12F5细胞系相关产品：RERF-LCMS细胞、WEHI 164细胞、H-28细胞 
Eph4 1424细胞系相关产品：HDMEC细胞、RBMVEC细胞、LC-2-Ad细胞 
P116细胞系相关产品：MH-22a细胞、DMS 114细胞、CHP 126细胞 
KS-SLK细胞系相关产品：SNU-668细胞、Mink Lung细胞、Nthy-ori 3-1细胞 
CALU1细胞系相关产品：LUDLU1细胞、NCI-HUT-69细胞、H1770细胞 
UACC 812细胞系相关产品：RL-952细胞、VMM5细胞、Tu212细胞 
GC1-SPG细胞系相关产品：SaOS-2细胞、SUM149-PT细胞、H-1048细胞 
D10.G4.1细胞系相关产品：CHP-126细胞、QGY-7703细胞、MDA-MB157细胞 
ReNcell CX细胞系相关产品：HM06.A1细胞、U251MG细胞、P3-x63-Ag8 653细胞 
NALM-6-M1细胞系相关产品：HCC-15细胞、KRCY细胞、LAD 2细胞 
KM12 SM细胞系相关产品：Madin Darby Bovine Kidney细胞、SCH细胞、GAK细胞 
Hepatoma 22细胞系相关产品：GM03190A细胞、NCI-H1563细胞、OCILY-19细胞 
Roswell Park Memorial Institute 8402细胞系相关产品：Centre Antoine Lacassagne-39细胞、NCI-H378细胞、CAL-33细胞 
201T细胞系相关产品：Fetal Bovine Heart Endothelial细胞、KALS-1细胞、MDBK (NBL-1)细胞 
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HM细胞系相关产品：HCC1143细胞、P388D1细胞、SK-Mel 1细胞 
MFHL-2细胞系相关产品：Normal fibroblast-10细胞、KLN205细胞、H-2198细胞 
MCF.10A细胞系相关产品：HEP-3B2细胞、P1-Raji细胞、F442A细胞 
HFF-1 人包皮成纤维细胞系
4T1-A细胞系相关产品：KU-812细胞、IMR 90细胞、OVCA5细胞 
HPaSteC(HPSC)细胞系相关产品：C3H-10T1/2细胞、MyLa 2059细胞、HEL-92细胞 
Hx-147细胞系相关产品：PLB 985细胞、MES-23.5细胞、PG-4细胞 
BNCL2细胞系相关产品：H647细胞、IGR.OV1细胞、U-251_MG细胞 
32D:cl3细胞系相关产品：Farage OL细胞、LS174细胞、HepG2/C3A细胞 
MN 60细胞系相关产品：NCI-H719细胞、639-V细胞、MZCRC1细胞 
3T3-Swiss albino细胞系相关产品：RPTEC/TERT1细胞、SVG(P12)细胞、ANA-1细胞 
Swiss 3T6细胞系相关产品：GM02219D细胞、C3H/10T1/2-clone8细胞、KM-12细胞 
MKN45细胞系相关产品：TE-671细胞、MCMEC细胞、SVG(P12)细胞 
KCL22细胞系相关产品：GC9811-P细胞、EC-GI细胞、Hs27F细胞 
NIH:OVCAR3细胞系相关产品：NRK 52E细胞、Epstein-Barr-2细胞、SR细胞 
Be-Wo细胞系相关产品：BC-022细胞、SIRC细胞、3T3(A31)细胞 
AdHek细胞系相关产品：BHT101细胞、WPE-int细胞、Hs 766细胞 
H1975细胞系相关产品：GM0637细胞、Spodoptera frugiperda clone 9细胞、Human Epidermoid carcinoma #2细胞 
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HT144细胞系相关产品：PCI-4.2细胞、COLO829细胞、HEK 293-H细胞 
MC3T3-L1细胞系相关产品：C-Li-7细胞、BV2细胞、MES-SA-Dx5细胞 
SVG p12细胞系相关产品：NCI-H1688细胞、HEP3B2细胞、CAL78细胞 
ME16C细胞系相关产品：NCI-H250细胞、Hs-611-T细胞、3T3J2细胞 
RPMI 8226/S细胞系相关产品：AC16 [Human hybrid]细胞、NCIH1650细胞、PANC-1细胞 
COR-L105细胞系相关产品：HSC1细胞、NCIH1435细胞、Tca-8113细胞 
IEC6细胞系相关产品：HEK 293-EBNA细胞、COR-L23细胞、ME-180细胞 
CCC-HEL-1细胞系相关产品：SF763细胞、MDA.MB.231细胞、WM-266-mel细胞 
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4细胞系相关产品：MDA-MB361细胞、SW-837细胞、Cloudman M3细胞 
HuT 102细胞系相关产品：CAKI 1细胞、GM15452细胞、SW954细胞 
JROECL21细胞系相关产品：OsA-CL细胞、HCMEC(BL12-H)细胞、EBC-1/original细胞 
NCIH2291细胞系相关产品：Mouse Colon 38细胞、WB F344细胞、KE37细胞 
H-1299细胞系相关产品：T98G细胞、P116细胞、MFE 296细胞 
Karpas-299细胞系相关产品：HCM细胞、SHIN-3细胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞 
TE-7细胞系相关产品：Human Intestinal Epithelial Cell-6细胞、MGH-UI细胞、H2291细胞 
LLC-WRC 256细胞系相关产品：HuNS1细胞、HEEpiC细胞、MHCC-LM3细胞 
SC细胞系相关产品：DU145细胞、HT 115细胞、H87细胞 
DHBE细胞系相关产品：SW900细胞、Suzhou Human Glioma-44细胞、Hep 3B2_1-7细胞 
Caco-2细胞系相关产品：M-1 myeloid leukemia细胞、HLF细胞、J774细胞 
MPC-83细胞系相关产品：PL9细胞、MC 116细胞、H1355细胞 
Strain V细胞系相关产品：NeHepLxHT细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4细胞、SUDHL6细胞 
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HuP-T4细胞系相关产品：LAN-6细胞、OCI/AML-2细胞、EL4细胞 
SK-N-BE(1)细胞系相关产品：AZ-521细胞、NOR-10细胞、RAMOS2G64C10细胞 
AE 1201细胞系相关产品：Ly10细胞、L-5178-Y细胞、SNU-1040细胞 
Functional Liver Cell-7细胞系相关产品：OK-WT细胞、BC-3H-1细胞、CAMA1细胞 
HFF-1 人包皮成纤维细胞系
HSC/mHSC细胞系相关产品：Human Embryonic Kidney 293细胞、Danio rerio Gill细胞、hESC细胞 
CT26WT细胞系相关产品：RAW-264.7细胞、hRMECs细胞、P3JHR-1细胞 
Wistar Institute-38细胞系相关产品：PK(15)细胞、WM115细胞、PC 61-5-3细胞 
NCTC929细胞系相关产品：OAW-42细胞、GM07404细胞、SK-N-BE(1)n细胞 
DKMG细胞系相关产品：NR8383.1细胞、ECC 12细胞、Hs821T细胞 
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HFL-I细胞系相关产品：Tregs细胞、HT1376细胞、H-295细胞 
SKOV3细胞系相关产品：MDA 1386细胞、3T3-L1细胞、SW-1088细胞 
TE-671细胞系相关产品：LM8细胞、P3/NS1/Ag4-1细胞、ROS 17/28细胞 
2780细胞系相关产品：aTC1 Clone 6细胞、SJRH-30细胞、624细胞 
PC-9/GR细胞系相关产品：PC 61-5-3细胞、Centre Antoine Lacassagne-39细胞、HCC-1143细胞 
Bac12F5细胞系相关产品：RERF-LCMS细胞、B-104细胞、D283-MED细胞 
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