H19-7 大鼠海马神经元细胞系

"H19-7 大鼠海马神经元细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞培养无菌操作的演示：凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精灯火焰操作。器皿使用前必须过火灭菌，继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在高处，使用时仍要过火。各种操作要靠近酒精灯，动作要轻、准确，不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自来水刷洗，除去灰尘。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小时以除去脏物、铅、等物。刷洗、烘干：１２小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲干净后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清洁液浸泡１２小时，然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗１５次，最后蒸馏水冲洗３-５次和用双蒸水过３次。烘干、包装：洗干净后先烘干，然后用牛皮纸(油光纸)包装。高压消毒：包装好的器皿装入高压锅内盖好盖子，打开开关和安全阀，当蒸气成直线上升时，关闭安全阀，当指针指向１５磅时，维持２０-３０分钟。高压消毒后烘干。二、旧的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中，泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清洁液(酸液)，１２小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗)，再用蒸馏水冲洗３次。烘干、包装：洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
H19-7 大鼠海马神经元细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
H19-7 大鼠海马神经元细胞系
细胞培养相关问题总结：冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后，须立即放入３７°C水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在１分钟内全部融化，并注意水面不可超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管之爆裂；细胞冷冻管解冻培养时，是否应马上去除DMSO？除少数特别注明对DMSO敏感之细胞外，绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞），在解冻之后，应直接放入含有１０-１５ml新鲜培养基之培养角瓶中，待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可，如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题；可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活；培养细胞时应使用５%或１０%CO２？或根本没有影响？一般培养基中大都使用HCO３-/CO３２-/H+作为pH的缓冲系统，而培养基中NaHCO３的含量将决定细胞培养时应使用的CO２浓度。当培养基中NaHCO３含量为每公升３.７g时，细胞培养时应使用１０%CO２；当培养基中NaHCO３为每公升１.５g时，则应使用５%CO２培养细胞。何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上之更换时间，按时更换培养基即可。培养基中是否须添加抗生素？除于特殊筛选系统中外，一般正常培养状态下，培养基中不应添加任何抗生素。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
SMC-1细胞系相关产品：GM07404A细胞、FRTL5细胞、Caki-2细胞 
KM12 SM细胞系相关产品：Madin Darby Bovine Kidney细胞、SCH细胞、GAK细胞 
DHL8细胞系相关产品：Rat Chondrosarcoma Swarm细胞、Hu-P-T4细胞、SBC5细胞 
SK-N-BE-2细胞系相关产品：ID8/MOSEC细胞、BpRc1细胞、SK-CO-1细胞 
HuT-102细胞系相关产品：102PT细胞、SK-UT-1细胞、P3-X63Ag8细胞 
Hs 729T细胞系相关产品：MDA175细胞、3T3-F442A细胞、SW1463细胞 
MSF细胞系相关产品：H2227细胞、U87-MG细胞、Panc 10.05细胞 
OCI Ly3细胞系相关产品：Tokyo Medical and Dental university 8细胞、MDAMB436细胞、CESS细胞 
RC92A细胞系相关产品：NCIH1648细胞、CCC-HEH-2细胞、HUT 125细胞 
H22细胞系相关产品：KYSE 70细胞、Y3Ag1.2.3细胞、Glioma 261细胞 
AE 1201细胞系相关产品：Ly10细胞、L-5178-Y细胞、SNU-1040细胞 
DMS-273细胞系相关产品：Hs840_T细胞、2780细胞、201T细胞 
HELA-GFP细胞系相关产品：251MG细胞、NCI-128细胞、HuPT4细胞 
HRPEpiC细胞系相关产品：HDQ-P1细胞、RSC-364细胞、QBI-HEK 293A细胞 
Sup T-1细胞系相关产品：NTERA-2 cl.D1细胞、MC116细胞、SK-MEL-MeWo细胞 
SW-1353细胞系相关产品：AZ521细胞、NCIH146细胞、C42细胞 
SW-1353细胞系相关产品：AZ521细胞、NCIH146细胞、C42细胞 
NEC细胞系相关产品：U14细胞、H1355细胞、Clone M-3细胞 
D10G41细胞系相关产品：SUM-102细胞、AR4IP细胞、bEnd3细胞 
HIT-T15细胞系相关产品：SMA560细胞、H747细胞、SNU886细胞 
H19-7 大鼠海马神经元细胞系
CCD-112 CoN细胞系相关产品：266 Bl细胞、H211细胞、Panc-02细胞 
H-526细胞系相关产品：HMEC-1细胞、GM05384细胞、Mono-Mac-1细胞 
PE CA PJ34细胞系相关产品：H-716细胞、H-2286细胞、U-hth74细胞 
MUTZ3细胞系相关产品：Vero-76细胞、HCC202细胞、HUCCT1细胞 
P3HR1细胞系相关产品：SNU119细胞、KYSE 450细胞、Clone 166细胞 
UCLA-SO-M21细胞系相关产品：NK92MI细胞、STO细胞、MV-3细胞 
SK RC 52细胞系相关产品：RCC-10细胞、NCI-BL2141细胞、H-322细胞 
BC-3H-1细胞系相关产品：H766T细胞、BALB/3T3 (clone A31)细胞、MCA 205细胞 
HMVEC细胞系相关产品：NCI H226细胞、MCF12A细胞、H4细胞 
HN 4细胞系相关产品：NTERA2细胞、EFM-192A细胞、NCI-H1915细胞 
H-1373细胞系相关产品：HCO细胞、CHP 212细胞、MCFs细胞 
Panc_05_04细胞系相关产品：JIMT1细胞、H2172细胞、McARH7777细胞 
EnCa1细胞系相关产品：K7M2-WT细胞、CHL-11细胞、NCI-H2023细胞 
HSC-I细胞系相关产品：NCI-H69细胞、Co 205细胞、HKC细胞 
H-1944细胞系相关产品：SNB.19细胞、H-35细胞、Rat 2细胞 
COLO 357细胞系相关产品：MB-49细胞、PC 61-5-3细胞、AR42J细胞 
IA-LM细胞系相关产品：CCD-19Lu细胞、H2009细胞、H-220细胞 
IA-LM细胞系相关产品：CCD-19Lu细胞、H2009细胞、H-220细胞 
SW 1353细胞系相关产品：Hs 729.T细胞、WM266-4细胞、alphaTC clone 6细胞 
FU-MMT-1细胞系相关产品：KG-1a细胞、H-522细胞、SK-Mel 2细胞 
SJRH30细胞系相关产品：HMEL细胞、SKOV3细胞、WEHI 164 TC细胞 
H-1915细胞系相关产品：S180细胞、NPC-TW039细胞、Pt-K2细胞 
UPCI-SCC-90细胞系相关产品：OCI AML4细胞、SU-DHL-10细胞、HCCC-9810细胞 
HUCEC细胞系相关产品：RKO细胞、SUD-4细胞、HT-29/CX-1细胞 
COS1细胞系相关产品：Pa14C细胞、H-1373细胞、YT细胞 
HFL1细胞系相关产品：MC3T3细胞、COLO-684细胞、SKO-007细胞 
OCIAML4细胞系相关产品：NG10815细胞、A2780/Taxol细胞、3T3 clone A31细胞 
Hs 675.T细胞系相关产品：PanC1细胞、KYSE-270细胞、NHEK细胞 
C-26细胞系相关产品：NCI-SNU-878细胞、NS-1-Ag4-1细胞、J-774A.1细胞 
NK62a细胞系相关产品：OV-1063细胞、ZYM-SVEC01细胞、PG-LH7细胞 
D341细胞系相关产品：hFOB1.19细胞、CAL-120细胞、KASUMI6细胞 
BRL-3A细胞系相关产品：Calu-6细胞、Hi5细胞、KM.12细胞 
ECV 304细胞系相关产品：SK-MEL24细胞、NCI-H596细胞、THLE-2细胞 
OCI/AML5细胞系相关产品：ACC3细胞、Panc 8.13细胞、B16 F10细胞 
C 643细胞系相关产品：NPC-TW 01细胞、HTh74细胞、MDA-453细胞 
B35细胞系相关产品：HT-3细胞、NCI-H1688细胞、MeT-5A细胞 
KBM5细胞系相关产品：KMM-1细胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z细胞、NW38细胞 
NCTC929细胞系相关产品：OAW-42细胞、GM07404细胞、SK-N-BE(1)n细胞 
HR1K细胞系相关产品：JB6 Cl 30-7b细胞、TM-4细胞、IB-RS2细胞 
A7r5细胞系相关产品：SKCol1细胞、HuH6细胞、NCI-H64细胞 
Hs600T细胞系相关产品：SNK1细胞、Hs832T细胞、U20-S细胞 
H19-7 大鼠海马神经元细胞系
HCT.116细胞系相关产品：SO-Rb 50细胞、P3-X63-Ag8-653细胞、SHSY-5Y细胞 
NCI-SNU-C2B细胞系相关产品：X63-Ag8细胞、SUM 52细胞、GL261细胞 
Hs 606细胞系相关产品：L132细胞、NCI-H2081细胞、NTERA-2 clone D1细胞 
HT细胞系相关产品：WM35细胞、MIHA细胞、SNU1细胞 
HConEpic细胞系相关产品：Vero 76 clone E-6细胞、KP-N-RT细胞、NCIH929细胞 
WSU-DLCL-2细胞系相关产品：UWB1.289+BRCA1细胞、MuM-2C细胞、H.Ep.-2细胞 
UMUC-3细胞系相关产品：P388D1细胞、Psi-2 DAP细胞、MOLT 16细胞 
T 24细胞系相关产品：MDA-MB415细胞、ECC 10细胞、SUNE1细胞 
Bx-PC3细胞系相关产品：Hs832T细胞、HOMEC细胞、L78细胞 
8505C细胞系相关产品：BGC823细胞、T/G HA-VSMC细胞、Capan 1细胞 
Onda 11细胞系相关产品：SK-N-BE(2)C细胞、RCC4细胞、DMS-79细胞 
DHL8细胞系相关产品：Rat Chondrosarcoma Swarm细胞、G292细胞、N87细胞 
"