RCC23 人肾透明细胞癌细胞系

"RCC23 人肾透明细胞癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞培养无菌操作的演示：凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精灯火焰操作。器皿使用前必须过火灭菌，继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在高处，使用时仍要过火。各种操作要靠近酒精灯，动作要轻、准确，不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自来水刷洗，除去灰尘。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小时以除去脏物、铅、等物。刷洗、烘干：１２小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲干净后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清洁液浸泡１２小时，然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗１５次，最后蒸馏水冲洗３-５次和用双蒸水过３次。烘干、包装：洗干净后先烘干，然后用牛皮纸(油光纸)包装。高压消毒：包装好的器皿装入高压锅内盖好盖子，打开开关和安全阀，当蒸气成直线上升时，关闭安全阀，当指针指向１５磅时，维持２０-３０分钟。高压消毒后烘干。二、旧的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中，泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清洁液(酸液)，１２小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗)，再用蒸馏水冲洗３次。烘干、包装：洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
RCC23 人肾透明细胞癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
RCC23 人肾透明细胞癌细胞系
细胞培养过程中相关问题总结：悬浮性细胞应如何继代处理？一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００xg(约１,０００rpm)，５-１０分钟，过高之转速，将造成细胞死亡；细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因；细胞冷冻培养基之成份为何？动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成；DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO等级，必须为Tissue culture grade之DMSO，其本身即为无菌状况，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于４°C，避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质，并可减少污染之机会。若要过滤DMSO，则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜；冷冻保存细胞之方法？冷冻保存方法一：冷冻管置于４°C ３０~６０分钟→ (-２０°C ３０分钟)→-８０°C １６~１８小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase长期储存。-２０°C不可超过１小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？冷冻管内细胞数目一般为１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤细胞则以５x１０(６)cells/ml vial为宜；应如何避免细胞污染？细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法；如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？直接灭菌后丢弃之。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
H211细胞系相关产品：UCLA-SO-M21细胞、HCa/16A3-F细胞、HGE细胞 
SNUC2A细胞系相关产品：A 549细胞、Panc_02_03细胞、Michigan Cancer Foundation-12A细胞 
Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19细胞系相关产品：Mono Mac 6细胞、HOS-MNNG细胞、LN-229细胞 
WC00044细胞系相关产品：HEK 293 EBNA细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16细胞、MDA-175细胞 
ES2细胞系相关产品：OCI AML5细胞、ChaGo-K1细胞、32D/cl3细胞 
OCI/AML-5细胞系相关产品：EC-GI-10细胞、253J-Bladder-V细胞、MHCC97-H细胞 
SAS细胞系相关产品：GA-10-Clone-4细胞、NPA细胞、H-650细胞 
H-520细胞系相关产品：QGP-1细胞、UPCI-SCC090细胞、CPAE细胞 
NCI-H524细胞系相关产品：DHL8细胞、IMR32细胞、UPCI-SCC090细胞 
H-1436细胞系相关产品：PNT1/A细胞、SUM-52-PE细胞、Hca-F细胞 
VMM5细胞系相关产品：NuTu 19细胞、HCC9724细胞、EM3细胞 
H-526细胞系相关产品：HMEC-1细胞、GM05384细胞、Mono-Mac-1细胞 
MGHU1细胞系相关产品：WM2664细胞、MDA-MB-415细胞、RC-K8细胞 
MIA PaCa-2细胞系相关产品：NCI H82细胞、SP2细胞、DoTc2-4510细胞 
UMRC2细胞系相关产品：32D/cl3细胞、Malme3M细胞、HBZY-1细胞 
H-716细胞系相关产品：CHL-IU细胞、KYSE140细胞、MGH-U3细胞 
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A2780/Taxol细胞系相关产品：RT112细胞、OVMANA细胞、HSC/mHSC细胞 
BEL-7404细胞系相关产品：CO115细胞、RPMI.8226细胞、High5细胞 
U118-MG细胞系相关产品：SV-HUC细胞、brain-derived Endothelial cells.3细胞、GH 3细胞 
RCC23 人肾透明细胞癌细胞系
Strain L-929细胞系相关产品：LED-WiDr细胞、H1915细胞、MT-4细胞 
KP-N-NS细胞系相关产品：CV 1细胞、NTERA-2cl.D1细胞、OVCAR420细胞 
H378细胞系相关产品：McA-RH 8994细胞、H-929细胞、293H细胞 
Calu3细胞系相关产品：PY8119细胞、CV1细胞、TM3细胞 
RLE-6TN细胞系相关产品：C3H10T1/2CL8细胞、U-251MG细胞、RWPE-1细胞 
MeSoTheliOma-211H细胞系相关产品：BIU-87细胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2细胞、SU-DHL-1细胞 
TNC-1B12B4细胞系相关产品：Pa18C细胞、G-402细胞、U373MG细胞 
Panc 2.03细胞系相关产品：CC-LP-1细胞、SNU-368细胞、SKML-28细胞 
HOS-MNNG细胞系相关产品：GB1细胞、HUC细胞、H187细胞 
H-660细胞系相关产品：P3X63细胞、WM266mel细胞、Y3-Ag123细胞 
D-324 Med细胞系相关产品：NCI-SNU-182细胞、HCT-116细胞、H2066细胞 
P3 NS1 Ag4/1细胞系相关产品：OLN93细胞、Panc 2.03细胞、H-740细胞 
PBMC细胞系相关产品：kms 11细胞、LLC-MK-2细胞、526-mel细胞 
CP70细胞系相关产品：HUTU80细胞、HEL-92-1-7细胞、NCI-N87细胞 
NK-92.05细胞系相关产品：32D-Cl3细胞、H1573细胞、NCI-H146细胞 
COR-L105细胞系相关产品：HSC1细胞、NCIH1435细胞、Tca-8113细胞 
VK-2/E6E7细胞系相关产品：HS-445细胞、HT(H9)细胞、GLC82细胞 
SK-RC 42细胞系相关产品：SW 13细胞、Hs 870.T细胞、USMC细胞 
HR-8348细胞系相关产品：MV(4;11)细胞、NCI-H441细胞、PLC/PRF5细胞 
PC3M-2B4细胞系相关产品：COLO684细胞、Tu 212细胞、G361-mel细胞 
5-8F细胞系相关产品：Hs852细胞、TE1细胞、NCI-H1417细胞 
NCIH2085细胞系相关产品：Hs840T细胞、Mino细胞、IEC6细胞 
SK-Hep1细胞系相关产品：Hepatoma 22细胞、YH细胞、Mink Lung细胞 
DoTc2细胞系相关产品：Hs 688(A).T细胞、FU-OV-1细胞、MV4:11细胞 
TE 85 ClF-5细胞系相关产品：IGROV细胞、Neuro 2a细胞、NCI-SNU-886细胞 
National Medical Center-Glioma 1细胞系相关产品：HBE 135-E6E7细胞、HSCT6细胞、KYSE 410细胞 
HPMEC细胞系相关产品：Hela-mock细胞、GEO细胞、FAK+/+细胞 
P388-D1细胞系相关产品：SCL-I细胞、SU8686细胞、CoCL3细胞 
COLO 699细胞系相关产品：TE671/RD细胞、UCD-MLA-144细胞、ZR-75-30细胞 
H1618细胞系相关产品：TE-12细胞、TCMK-1细胞、H810细胞 
NCI-H774细胞系相关产品：UMUC14细胞、BE2_C细胞、CCC-HEL-1细胞 
UM-UC-14细胞系相关产品：CF-1 MEF细胞、GL261细胞、ZYM-DIEC02细胞 
NCIH146细胞系相关产品：NCI-H64细胞、A375SM细胞、293-F细胞 
PLCPRF5细胞系相关产品：SCL-II细胞、QBC939细胞、L929(NCTC)细胞 
Institute for Medical Research-32细胞系相关产品：MDA-415细胞、HCC1187细胞、COLO357细胞 
R D细胞系相关产品：CAL 120细胞、MDA-MB-175VII细胞、SUM 149细胞 
AHH-1细胞系相关产品：Be Wo细胞、3T6-Swiss albino细胞、WEHI231细胞 
TE-10细胞系相关产品：NGEC细胞、SK-N-BE(2)-C细胞、SUPB-15细胞 
NT-2细胞系相关产品：CATH.a细胞、CT 26细胞、3T3-L1细胞 
E304细胞系相关产品：SR-786细胞、3LL细胞、U138细胞 
CMT 167细胞系相关产品：LLC-PK(1)细胞、VERO76细胞、RL95-2细胞 
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A2780CP70细胞系相关产品：P3 NS1 Ag4/1细胞、THLE2细胞、B16 melanoma细胞 
TE353.SK细胞系相关产品：Calu-3细胞、P3/NSI/1-AG4-1细胞、BC-021细胞 
CHO-ori细胞系相关产品：FL 62891细胞、X63-Ag 8.6.5.3细胞、HCASMC细胞 
NTera2/D1细胞系相关产品：PK13细胞、LOUNH91细胞、HEK293A细胞 
TE 32细胞系相关产品：Pro-5 Lec1.3c细胞、T-ALL 1细胞、NCI-H23细胞 
NL20细胞系相关产品：RIN m5F细胞、MLFC细胞、LTEP-sm 1细胞 
Kit 225细胞系相关产品：NCC-IT细胞、MC3T3-L1细胞、NFHIOSE-29细胞 
SUIT 2细胞系相关产品：K562/ADR细胞、P-3J细胞、SUDHL5细胞 
NCI-H1184细胞系相关产品：H748细胞、L363细胞、Hs 870.T细胞 
HCC1954-BL细胞系相关产品：HEK-A细胞、RPMI8402细胞、WM115F细胞 
GCT细胞系相关产品：BRL-3A细胞、P3/ag细胞、HEK-293F细胞 
Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19细胞系相关产品：Mono Mac 6细胞、BJA-B1细胞、RT 112细胞 
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