SK-RC-39 人肾乳头状细胞癌细胞系

"SK-RC-39 人肾乳头状细胞癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞培养方面注意的几点：无菌意识要强：实验进行前，超净台以紫外灯照射３０分钟灭菌，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启超净工作台风扇运转数分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置，其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以７０%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域，一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约４５°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基：不同的细胞可能培养基不同，甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞，有文献就选用neurobase培养基，而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而这种培养基中含有抗氧化剂成分，此时，我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:４℃冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指５６℃，３０分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到５６℃后，将血清放入，待温度升高到５６℃后计时，一般５分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须，一般不要作此热处理，因为会造成沉淀物之显著增多，且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
SK-RC-39 人肾乳头状细胞癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
SK-RC-39 人肾乳头状细胞癌细胞系
细胞的冻存：目前，细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０(６)～１×１０(７)/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
67NR细胞系相关产品：Hs839T细胞、H2195细胞、LLCMK2细胞 
JB6Cl30细胞系相关产品：MLO-Y4细胞、H661细胞、DHL4细胞 
COV362细胞系相关产品：SKMEL-1细胞、L5178YR细胞、P30 OHK细胞 
DK-MG细胞系相关产品：CAL-12T细胞、NRCC细胞、OCI-LY-18细胞 
Kit-225-K6细胞系相关产品：OVCA-420细胞、H4IIEC3细胞、ABE­8.1/2细胞 
MH-S细胞系相关产品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1细胞、PC12(高分化)细胞、KE39细胞 
Chang liver细胞系相关产品：COS-7细胞、IB-RS2细胞、L-6TG细胞 
KYSE-410细胞系相关产品：TE1细胞、SKMEL-1细胞、BTT739细胞 
GRSL细胞系相关产品：Granta519细胞、DBTRG-05MG细胞、NCI-H1836细胞 
SK-N-BE-2细胞系相关产品：ID8/MOSEC细胞、BpRc1细胞、SK-CO-1细胞 
WM-266-4细胞系相关产品：CCD-966SK细胞、T-HSC细胞、MCF-7/ADR-RES细胞 
GM17346细胞系相关产品：A-375.S2细胞、Line 697细胞、NCIH2342细胞 
MDCK supertube细胞系相关产品：MF2059细胞、NCIH1693细胞、NBL-4细胞 
HEC1-B细胞系相关产品：HConEpic细胞、HT 1376.T细胞、GDM-1细胞 
HG2855细胞系相关产品：P116细胞、H-735细胞、MLE-12细胞 
SW780细胞系相关产品：TOV-21G细胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]细胞、Vero E6细胞 
SW780细胞系相关产品：TOV-21G细胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]细胞、Vero E6细胞 
H1838细胞系相关产品：DCS细胞、P3.NS-1/1.Ag4.1细胞、MDAMB157细胞 
H1781细胞系相关产品：MAC1细胞、mREC细胞、HEC151细胞 
HUT-226细胞系相关产品：RCC23细胞、COLO-699细胞、OVCAR10细胞 
SK-RC-39 人肾乳头状细胞癌细胞系
Hs 766细胞系相关产品：SUM52PE细胞、A172细胞、HF-91细胞 
A-253细胞系相关产品：RPMI2650细胞、GA-10-Clone-4细胞、SW756细胞 
MDA1386细胞系相关产品：BT-549细胞、CEM/C1细胞、MN-60细胞 
MOLM16细胞系相关产品：16-HBE14o细胞、CEM-CCRF细胞、HSF细胞 
SRS-82细胞系相关产品：BIC-1细胞、MDA-MB415细胞、UMNSAH-DF-1细胞 
Malme3M细胞系相关产品：NCIH1993细胞、MDCK2细胞、HEP3B2细胞 
GA10细胞系相关产品：H-322细胞、HCT116/L细胞、TK+/- (clone 3.7.2C)细胞 
EL-4细胞系相关产品：NHDF细胞、16HBE14o-细胞、MHCC-97细胞 
Cates 1B细胞系相关产品：KP2细胞、67NR细胞、A549细胞 
HEK 293FT细胞系相关产品：CBRH7919细胞、HBE细胞、IAR 20细胞 
SK-MEL-2-LUC细胞系相关产品：VE细胞、CORL105细胞、B16-F10细胞 
Eca-109细胞系相关产品：SKMEL1细胞、F-36P细胞、HCMEC(BL12-H)细胞 
Hs 578T细胞系相关产品：SK-N-AS细胞、F98细胞、WM 239-A细胞 
Jurkat, Clone E6-1细胞系相关产品：H2452细胞、HEYA8细胞、MC3T3E1细胞 
TO175T细胞系相关产品：CMT167细胞、U-343 MG细胞、LM TK negative细胞 
NCIH345细胞系相关产品：COLO 738细胞、MT4细胞、Jurkat clone A3细胞 
WM451细胞系相关产品：KMB 17细胞、EFM19细胞、OCI/AML3细胞 
211H细胞系相关产品：Gejiu Lung Carcinoma-82细胞、TO175T细胞、HSC 3细胞 
EFM-192A细胞系相关产品：H524细胞、Anip 973细胞、Mv1Lu细胞 
SUM52细胞系相关产品：PC-12细胞、NCIH2081细胞、NCI-H524细胞 
MonoMac1细胞系相关产品：HSC-3细胞、95C细胞、C38细胞 
MD Anderson-Metastatic Breast-468细胞系相关产品：YH-13细胞、SLK细胞、NCIH1869细胞 
RIN Cl-5F细胞系相关产品：SNB19细胞、HCC9204细胞、GM15452细胞 
A-875细胞系相关产品：OVCA-433细胞、Helacyton gartleri细胞、MIA Paca2细胞 
MCCAR细胞系相关产品：TGHAVSMC细胞、U266 B1细胞、H1437细胞 
WM-115细胞系相关产品：NCIH1944细胞、MHHCALL2细胞、SK-BR-3细胞 
NBL-1细胞系相关产品：LC-1 sq细胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized细胞、KU19-19细胞 
MDA-MB-435-S细胞系相关产品：Kit225-K6细胞、NTERA2D1细胞、Hs 737.T细胞 
HCC1419细胞系相关产品：Lymph Node Carcinoma of the prostate细胞、LC-1Sq细胞、SK-RC 52细胞 
BALB 3T3 clone A31细胞系相关产品：MG-63细胞、PL45细胞、TM-3细胞 
H-9细胞系相关产品：NCI-H1648细胞、NALM6细胞、H4IIE细胞 
H-1836细胞系相关产品：Colo699细胞、BJ [Human fibroblast]细胞、SK-N-AS细胞 
EMT6细胞系相关产品：NT-2细胞、OVCAR 4细胞、P3-X63-Ag 8.653细胞 
NIH 3T3细胞系相关产品：AR42J细胞、KYSE-150细胞、RPMI-2650细胞 
SW-954细胞系相关产品：HB 611细胞、KG1细胞、PC 12细胞 
B16-F10--RED细胞系相关产品：3T3(A31)细胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]细胞、HO-8910PM细胞 
H711细胞系相关产品：IMCD-3细胞、SW 982细胞、MGHU3细胞 
D324细胞系相关产品：IMR32细胞、NCI-H211细胞、RMC-1细胞 
NCIH1688细胞系相关产品：NCI-H23细胞、AGS细胞、786-0WT细胞 
LNCaP C4-2细胞系相关产品：SW480E细胞、DI TNC-1细胞、NK92细胞 
HO1-N-1细胞系相关产品：143TK-细胞、NCIH847细胞、YD15细胞 
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OV1063细胞系相关产品：KYSE-30细胞、Colon38细胞、KMS-18细胞 
Kit225-K6细胞系相关产品：NCI-H358细胞、Okayama University Medical School-27细胞、HeLa.S3细胞 
CTLL2细胞系相关产品：HeLa-S3细胞、CCRF SB细胞、NCI-H125细胞 
NCI-H1395细胞系相关产品：NCI-HUT-520细胞、MESSA细胞、H-748细胞 
Tsup-1细胞系相关产品：CCFSTTG1细胞、58F细胞、HCC-1954BL细胞 
SPC-A1细胞系相关产品：H548细胞、NCIH1793细胞、HMEC-1细胞 
Japanese Tissue Culture-39细胞系相关产品：HCT-8细胞、Human Embryo Lung-1细胞、LLC-PK(1)细胞 
ACC2细胞系相关产品：SUDHL-8细胞、GM637细胞、EFO27细胞 
GFP-Olig2细胞系相关产品：hTERT-RPE细胞、AML 12细胞、NCIH1618细胞 
HB 611细胞系相关产品：RPMI #1846细胞、118 MG细胞、RAG细胞 
RAMSCs细胞系相关产品：H920细胞、NHA细胞、SBC5细胞 
COV362细胞系相关产品：SKMEL-1细胞、SK-RC-42细胞、RERF-LC-MS细胞 
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