UM2 人舌鳞癌细胞系

"UM2 人舌鳞癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞培养方面注意的几点：无菌意识要强：实验进行前，超净台以紫外灯照射３０分钟灭菌，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启超净工作台风扇运转数分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置，其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以７０%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域，一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约４５°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基：不同的细胞可能培养基不同，甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞，有文献就选用neurobase培养基，而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而这种培养基中含有抗氧化剂成分，此时，我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:４℃冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指５６℃，３０分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到５６℃后，将血清放入，待温度升高到５６℃后计时，一般５分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须，一般不要作此热处理，因为会造成沉淀物之显著增多，且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
UM2 人舌鳞癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
UM2 人舌鳞癌细胞系
细胞培养实验相关问题总结：支原体(mycoplasma)污染的细胞，是否能以肉眼观察出异状？不能。除极有经验之专家外，大多数遭受支原体污染的细胞株，无法以其外观分辨之；支原体污染会对细胞培养有何影响？支原体污染几乎可影响所有细胞之生长参数，代谢及研究之任一数据。故进行实验前，必须确认细胞为mycoplasma-free，实验结果之数据方有意义；侦测出细胞株有支原体污染时，该如何处理？直接灭菌后丢弃，以避免污染其它细胞株；CO２培养箱之水盘如何保持清洁？定期(至少每两周一次) 以无菌蒸馏水或无菌去离子水更换之；为何培养基保存于４°C冰箱中，颜色会偏暗红色，且pH值会越来越偏碱性？培养基保存于４°C冰箱中，培养基内之CO２会逐渐溢出，造成培养基越来越偏碱性。而培养基中之酸碱指示剂(通常为phenol red)的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱之结果，将造成细胞生长停滞或死亡。若培养基偏碱时，可以通入无菌过滤之CO２，以调整pH值；购买之细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；购买之细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；收到之冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
SH-SY5Y Parental细胞系相关产品：KYSE-70细胞、YD38细胞、Calu6细胞 
Wayne State University-Head and Neck 13细胞系相关产品：NU-GC-4细胞、ND7/23细胞、H1792细胞 
HCC0202细胞系相关产品：B-CPAP细胞、HT-29/CX-1细胞、OV-1063细胞 
WM115F细胞系相关产品：WIL2S细胞、KPL-1细胞、LLC PK1细胞 
HS578T细胞系相关产品：MDA-468细胞、EAhy 926细胞、LA-N-6(OAN)细胞 
H-1618细胞系相关产品：PCI:SG-231细胞、JROECL 33细胞、BC-019细胞 
Pa16C细胞系相关产品：F9细胞、Panc02-H0细胞、HO-8910 PM细胞 
MKN-45细胞系相关产品：SHSY-5Y细胞、HPB/ALL细胞、MCF-7细胞 
NCTC 3960细胞系相关产品：MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞、HOS/MNNG细胞、JAR细胞 
UO.31细胞系相关产品：MDA-MB-134 VI细胞、GB-1细胞、NBL-1细胞 
WEHI-279细胞系相关产品：P31FUJ细胞、LICCF细胞、PC14细胞 
Colo205细胞系相关产品：KBM-7细胞、RAG细胞、MHCC 97细胞 
FAT细胞系相关产品：Dunn LM8细胞、IPLB-SF 21AE细胞、H1650_CO细胞 
HHUA细胞系相关产品：U266BL细胞、Hs-578Bst细胞、NK92-MI细胞 
TMK1细胞系相关产品：HMEC细胞、NCIH1819细胞、RSC-96细胞 
RKO-AS45-1细胞系相关产品：HCC0827细胞、MDA-MB-468-RED细胞、OCI Ly19细胞 
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H4-II-E-C3细胞系相关产品：Mel-624细胞、CESS细胞、THEECs细胞 
NCI-BL1339细胞系相关产品：Neuro-2a细胞、Tb 1-Lu细胞、NCTC1469细胞 
Cattle chondrocytes细胞系相关产品：L5178YR细胞、S37细胞、P3JHR1细胞 
UM2 人舌鳞癌细胞系
KE39细胞系相关产品：HFT8810细胞、ChaGo K-1细胞、HBE 135-E6/E7细胞 
KYSE 520细胞系相关产品：H2122细胞、RC-4B/C细胞、NCIH889细胞 
U14细胞系相关产品：IFRS1细胞、DR2R 1610细胞、H-1838细胞 
Hs 578Bst细胞系相关产品：HCC1171细胞、Tu686细胞、J82细胞 
SU-DHL-8细胞系相关产品：CII细胞、HMrSV5细胞、MCA38细胞 
WM 451-Lu细胞系相关产品：HCC2185细胞、H-716细胞、MKN 45细胞 
SK-ES细胞系相关产品：LK 2细胞、Emory University-3细胞、U-138 MG细胞 
AML193细胞系相关产品：NCIH146细胞、MOLP2细胞、GM01232E细胞 
mRTEC细胞系相关产品：MOLM-14细胞、MES13细胞、LL2细胞 
RCC-JF细胞系相关产品：HUVEC-C[HUVEC]细胞、T47D细胞、EFM19细胞 
RIN-m 14B细胞系相关产品：SW-1783细胞、SHG44细胞、SupB15W细胞 
LL2细胞系相关产品：UMNSAH-DF 1细胞、HL-60细胞、SW 1116细胞 
FRO细胞系相关产品：NCI-H441-4细胞、hUC-MSC细胞、H716细胞 
HCC15细胞系相关产品：FRO81-2细胞、YD-38细胞、MOLT.4细胞 
CaEs17细胞系相关产品：X63Ag8-653细胞、SU-DHL-4细胞、B16/BL6细胞 
Human Embryonic Skin细胞系相关产品：BeWo细胞、UMUC3细胞、SUDHL1细胞 
alphaTC1 Clone 6细胞系相关产品：CCRF.CEM细胞、HBE135-E6E7细胞、ZR-75-1细胞 
A549ATCC细胞系相关产品：H-1435细胞、SJCRH30细胞、RGB细胞 
Ra No. 1细胞系相关产品：Hs 852.T细胞、Li-7细胞、TCC-SUP细胞 
C2BBe 1细胞系相关产品：KYSE-510细胞、Hepa-RG细胞、130T细胞 
NKL细胞系相关产品：Kobe university Oral Squamous Cell culture-2细胞、C4-2 B细胞、SW 1222细胞 
58F细胞系相关产品：BNL CL2细胞、H1395细胞、NCI-H2135细胞 
HEK 293-EBNA细胞系相关产品：HIT clone T15细胞、NCIH211细胞、SUM-52-PE细胞 
786O细胞系相关产品：OCI-Ly 1细胞、NCI/ADR-RES细胞、NCI-H441-4细胞 
GM02131A细胞系相关产品：B16/F10细胞、PLC-8024细胞、MDA MB 453细胞 
H-2108细胞系相关产品：HEK;293细胞、KM932细胞、HS578细胞 
SF-767细胞系相关产品：SNU251细胞、IOSE-Mar细胞、CT 26细胞 
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SNB19细胞系相关产品：TOV21细胞、PFSK-1细胞、H748细胞 
OVCA 432细胞系相关产品：YES2细胞、NT-2细胞、HOC细胞 
SNU520细胞系相关产品：H2170细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6细胞、MPASMC细胞 
SK Mel 24细胞系相关产品：Earle's L cells细胞、SNK-6细胞、Mono Mac 6细胞 
NCIH1666细胞系相关产品：MDCK (NBL-2)细胞、SUDHL10细胞、Murine Lung Epithelial-12细胞 
SUM-159-PT细胞系相关产品：Sp2/0-Ag-14细胞、SW1271细胞、OVCAR4细胞 
HEK-293-FT细胞系相关产品：NP-69细胞、32D:cl3细胞、C3H/10T1/2-clone8细胞 
OE19细胞系相关产品：Panc-10.05细胞、BT 20细胞、DH82细胞 
NCIH1666细胞系相关产品：MDCK (NBL-2)细胞、SUDHL10细胞、Murine Lung Epithelial-12细胞 
H-847细胞系相关产品：Li-7细胞、ATDC-5细胞、CMECs细胞 
CAKI 1细胞系相关产品：OCI Ly10细胞、MILE SVEN1细胞、RC-4B/C细胞 
NCIH1869细胞系相关产品：H2.35细胞、NCI-H345细胞、NCI-H-295细胞 
AZ 521细胞系相关产品：A72细胞、H1651细胞、U-343-MG细胞 
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Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1细胞系相关产品：Hs600T细胞、NCI-SNU-182细胞、NRK clone 52E细胞 
CCRF细胞系相关产品：EC9706细胞、SP2/0 Ag-14细胞、EA hy 926细胞 
CCD 19Lu细胞系相关产品：TE 671细胞、HCC1569细胞、H2198细胞 
VM-CUB-I细胞系相关产品：SHIN-3细胞、HFL 1细胞、HOS(TE85)细胞 
CCD-841CoTr细胞系相关产品：Fao细胞、NuTu 19细胞、UPCI-SCC-090细胞 
PA12细胞系相关产品：R-1059-D细胞、Tadarida brasiliensis 1 lung细胞、EMT-6细胞 
C33细胞系相关产品：2B4细胞、B16-F10--RED细胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞 
MB39细胞系相关产品：Mc Ardle 7777细胞、JROECL 19细胞、NIH-3T3-L1细胞 
MiaPaCa-2细胞系相关产品：TW-039细胞、FET细胞、Potorous tridactylus Kidney 1细胞 
P3-X63-Ag8.653细胞系相关产品：IMR 32细胞、MEG01细胞、C38细胞 
UMRC2细胞系相关产品：32D/cl3细胞、ChaGo-K1细胞、Colo-206F细胞 
HCC0095细胞系相关产品：Ha Fe细胞、BEL 7404细胞、HEK 293-F细胞 
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