NCI-H2198 人肺癌细胞系

"NCI-H2198 人肺癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞传代培养的胰酶消化法：传代培养：是指细胞从一个培养瓶以１：２或１：２以上的比例转移，接种到另一培养瓶的培养。传代细胞，可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代，部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代，或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤：①入无菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒双手；②倒置显微镜下观察细胞形态，确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液３７℃下预热；③超净台台面应整洁，用７５%酒精棉球擦拭清洁；④打开超净工作台的紫外灯照射台面２０min左右，关闭紫外灯，打开风机清洁空气除去臭氧；⑤点燃酒精灯;取出无菌试管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内；⑥将培养用液瓶口用７５%酒精消毒，过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上；⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去残留的就培养基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每个大培养瓶加入１ml胰酶，小培养瓶用量酌减，盖好瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶，使细胞脱离胰酶，然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鲜培养基，反复吹打消化好的细胞使其脱壁并分散，再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成细胞悬液，然后分装到新培养瓶中。盖好瓶盖，适度拧紧后稍回转，以利于CO２的进入，将培养瓶放回CO２培养箱；⑩对悬浮培养细胞，步骤７-９不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清，加入新鲜培养基，然后分装到各瓶中。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
NCI-H2198 人肺癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
NCI-H2198 人肺癌细胞系
细胞培养实验相关问题总结：支原体(mycoplasma)污染的细胞，是否能以肉眼观察出异状？不能。除极有经验之专家外，大多数遭受支原体污染的细胞株，无法以其外观分辨之；支原体污染会对细胞培养有何影响？支原体污染几乎可影响所有细胞之生长参数，代谢及研究之任一数据。故进行实验前，必须确认细胞为mycoplasma-free，实验结果之数据方有意义；侦测出细胞株有支原体污染时，该如何处理？直接灭菌后丢弃，以避免污染其它细胞株；CO２培养箱之水盘如何保持清洁？定期(至少每两周一次) 以无菌蒸馏水或无菌去离子水更换之；为何培养基保存于４°C冰箱中，颜色会偏暗红色，且pH值会越来越偏碱性？培养基保存于４°C冰箱中，培养基内之CO２会逐渐溢出，造成培养基越来越偏碱性。而培养基中之酸碱指示剂(通常为phenol red)的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱之结果，将造成细胞生长停滞或死亡。若培养基偏碱时，可以通入无菌过滤之CO２，以调整pH值；购买之细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；购买之细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；收到之冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
SK-N-BE(2)细胞系相关产品：H2023细胞、NEC8细胞、CALU 1细胞 
L 363细胞系相关产品：WEHI 3B细胞、MDCK.2细胞、LU451细胞 
LUDLU-1细胞系相关产品：HOP62细胞、SY5Y细胞、NCIH1734细胞 
H-2286细胞系相关产品：WERI Rb-1细胞、LSC-1细胞、Hs-578-T细胞 
RKO细胞系相关产品：WM451Lu细胞、SKML-28细胞、HSC（Human Schwann）细胞 
D10细胞系相关产品：HDLM2细胞、ACC-2细胞、AAV293细胞 
SVG p12细胞系相关产品：NCI-H1688细胞、HEP3B2细胞、CAL78细胞 
PC.3细胞系相关产品：SK-NM-C细胞、AZ 521细胞、SK-NM-C细胞 
OCI Ly1细胞系相关产品：NCIH1437细胞、P3X63 Ag8.653细胞、SUDHL-2细胞 
ECC10细胞系相关产品：HCT116细胞、AM-38细胞、UPCISCC090细胞 
CAL-27细胞系相关产品：CAL-51细胞、My-La 2059细胞、NCI-747细胞 
CAL 62细胞系相关产品：NTC200细胞、TB1 Lu细胞、SP2-0-Ag14细胞 
NCIH2110细胞系相关产品：CL1.0细胞、SK-N-BE(1)细胞、LA 4细胞 
H157细胞系相关产品：CCRF-CEM C1细胞、NCIH1048细胞、NCIH841细胞 
NRK-49F细胞系相关产品：SK-MEL 28细胞、SK-N-BE细胞、MCCAR细胞 
CemT4细胞系相关产品：HCC-1937细胞、X63-Ag8细胞、GM2219C细胞 
NCI-128细胞系相关产品：SL1细胞、SW 48细胞、NCIH1651细胞 
McA-RH7777细胞系相关产品：H-1373细胞、SUM-149细胞、SMC-1细胞 
HFLS-OA细胞系相关产品：HFF-1细胞、L5178-R细胞、COV 434细胞 
HOS TE 85细胞系相关产品：293AD细胞、LI7细胞、MOVAS-1细胞 
NCI-H2198 人肺癌细胞系
786O细胞系相关产品：OCI-Ly 1细胞、NCI/ADR-RES细胞、NCI-H441-4细胞 
SUDHL5细胞系相关产品：T98-G细胞、NEC-8细胞、KP 4细胞 
P3X63Ag8653细胞系相关产品：A704细胞、CHO cell clone K1细胞、HEC-1B细胞 
MDA-MB-231-GFP细胞系相关产品：EJ细胞、LuCL4细胞、BTI-Tn-5B1-4细胞 
Vero 76 clone E-6细胞系相关产品：SK HEP 01细胞、JEKO细胞、SKNSH细胞 
BNL CL2细胞系相关产品：BT 20细胞、MDA2B细胞、Hs-600-T细胞 
NPC-TW039细胞系相关产品：Madison lung细胞、HCC-1954细胞、Ramos (RA)细胞 
CoCL2细胞系相关产品：HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞、143BTK-细胞、J774A.1细胞 
B104 [Rat neuroblastoma]细胞系相关产品：C57/B6-L细胞、HHL5细胞、C166细胞 
MDBK (NBL-1)细胞系相关产品：H378细胞、RIN-m细胞、COR-L23/P细胞 
NCIH2135细胞系相关产品：MES-SA-Dx5细胞、OE-21细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468细胞 
McA-RH7777细胞系相关产品：H-1373细胞、SUM-149细胞、SMC-1细胞 
NCIH1694细胞系相关产品：GC1-SPG细胞、S3-HeLa细胞、Hs 636 T细胞 
S3-HeLa细胞系相关产品：Hi-five细胞、RPTEC/TERT 1细胞、HNTEC细胞 
751-NA细胞系相关产品：EFO27细胞、HeLa.S3细胞、138MG细胞 
COV 504细胞系相关产品：HGBEC细胞、NCI-H520细胞、L-132细胞 
5-8F细胞系相关产品：Hs852细胞、TE1细胞、NCI-H1417细胞 
LNCaP clone FGC细胞系相关产品：Centre Antoine Lacassagne-51细胞、H2330细胞、JKT-1细胞 
4T1-A细胞系相关产品：KU-812细胞、IMR 90细胞、OVCA5细胞 
Y 1细胞系相关产品：MESSA/Dx5细胞、U-251-MG细胞、P3J HR-1细胞 
WBF344细胞系相关产品：HCC1428细胞、TF-1细胞、WRL 68细胞 
Walker-256细胞系相关产品：AR4-IP细胞、HCC0366细胞、HEL-92_1_7细胞 
MDA PCa 2b细胞系相关产品：COLO357细胞、NCI-H78细胞、HCT/FU细胞 
PC-12细胞系相关产品：SW-13细胞、P3X63NS1细胞、KM933细胞 
SCC15细胞系相关产品：H1092细胞、NCI-H1694细胞、Colo699细胞 
NCI-Hut 125细胞系相关产品：R1800[RA]细胞、NMCG-1细胞、Strain V细胞 
J-82细胞系相关产品：293EBNA细胞、MDA-175细胞、NCI-H2172细胞 
DU 145细胞系相关产品：Fetal Human Lens-124细胞、McA-RH 8994细胞、U118-MG细胞 
HepG2细胞系相关产品：Centre Antoine Lacassagne-148细胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5细胞、JKT1细胞 
H-660细胞系相关产品：P3X63细胞、WM266mel细胞、Y3-Ag123细胞 
CA-OV-3细胞系相关产品：HIT T15细胞、VK2 (E6/E7)细胞、L6565细胞 
Lec1细胞系相关产品：ChaGo-K-1细胞、Caco-2/BBe 1细胞、EOMA细胞 
DMS 153细胞系相关产品：Hs852T细胞、CHO细胞、T/G HA VSMC细胞 
SUM-159PT细胞系相关产品：Hs683细胞、OCI-LY-3细胞、LC2/Ad细胞 
ECV细胞系相关产品：S91细胞、NCIH522细胞、H1954细胞 
P3/NSI/1-AG4-1细胞系相关产品：SW 1088细胞、Alexander细胞、CAL-148细胞 
HT-144细胞系相关产品：RMC-1细胞、SU-DH-L5细胞、Line 522细胞 
H-441细胞系相关产品：769-P细胞、OVCAR 5细胞、SUM-190PT细胞 
Jurkat, Clone E6-1细胞系相关产品：H2452细胞、HEYA8细胞、MC3T3E1细胞 
F98细胞系相关产品：MC-CAR细胞、YES 2细胞、YAC-1细胞 
SCCVII细胞系相关产品：U-373MG ATCC细胞、Vx-2细胞、SiHa细胞 
NCI-H2198 人肺癌细胞系
AtT-20细胞系相关产品：H-1436细胞、HConEpic细胞、A-253细胞 
P3HR1-BL细胞系相关产品：Pan02细胞、MCA-205细胞、SK-ES-1细胞 
A375细胞系相关产品：LOUNH91细胞、NTC-200细胞、Lewis Lung Cancer细胞 
SKNO1细胞系相关产品：MDA-MB-175VII细胞、HCC-1937细胞、CT26细胞 
CAL 27细胞系相关产品：NIH:OVCAR-4细胞、OCI Ly19细胞、H1373细胞 
U-373MG ATCC细胞系相关产品：IPLB-Sf21-AE细胞、A2780-CP细胞、HK-2 [Human kidney]细胞 
NCTC 3960细胞系相关产品：MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞、HOS/MNNG细胞、JAR细胞 
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞系相关产品：NHEK细胞、T-HEECs细胞、SV40-MES13细胞 
H-2052细胞系相关产品：SUM149-PT细胞、SCL II细胞、Hs 863.T细胞 
RPMI-8226细胞系相关产品：Human Epithelioma-2细胞、P31/Fujioka细胞、X63.Ag8.653细胞 
OCILY3细胞系相关产品：Madison细胞、T-CAM2细胞、SK-MEL-1细胞 
LUDLU-1细胞系相关产品：HOP62细胞、HL-1细胞、BN-CL2细胞 
"