NCI-H1404 人乳头状腺癌细胞系

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细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞培养方面注意的几点：无菌意识要强：实验进行前，超净台以紫外灯照射３０分钟灭菌，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启超净工作台风扇运转数分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置，其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以７０%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域，一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约４５°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基：不同的细胞可能培养基不同，甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞，有文献就选用neurobase培养基，而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而这种培养基中含有抗氧化剂成分，此时，我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:４℃冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指５６℃，３０分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到５６℃后，将血清放入，待温度升高到５６℃后计时，一般５分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须，一般不要作此热处理，因为会造成沉淀物之显著增多，且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
NCI-H1404 人乳头状腺癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可。吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足够消化细胞。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后37℃消化。比较难消化的细胞（润洗方法5min还不能消化），这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育。不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性。如果和标准形态不一致，那可能是自己没消化好导致的，但如果消化方法正确，仍然成片分布，甚至完全吹打成单细胞悬液，贴壁后仍然成片分布，这是细胞的特性，是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布，你的细胞之后会对你越来越不好。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
NCI-H1404 人乳头状腺癌细胞系
细胞培养过程中相关问题总结：悬浮性细胞应如何继代处理？一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００xg(约１,０００rpm)，５-１０分钟，过高之转速，将造成细胞死亡；细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因；细胞冷冻培养基之成份为何？动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成；DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO等级，必须为Tissue culture grade之DMSO，其本身即为无菌状况，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于４°C，避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质，并可减少污染之机会。若要过滤DMSO，则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜；冷冻保存细胞之方法？冷冻保存方法一：冷冻管置于４°C ３０~６０分钟→ (-２０°C ３０分钟)→-８０°C １６~１８小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase长期储存。-２０°C不可超过１小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？冷冻管内细胞数目一般为１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤细胞则以５x１０(６)cells/ml vial为宜；应如何避免细胞污染？细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法；如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？直接灭菌后丢弃之。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
COLO 206F细胞系相关产品：PLA 802细胞、CCD 966 SK细胞、Hi-five细胞 
CHP212细胞系相关产品：CTV1细胞、T-98细胞、Farage Original Line细胞 
CCC-HSF-1细胞系相关产品：McArdle RH-7777细胞、UMNSAH-DF-1细胞、2780细胞 
MUTZ1细胞系相关产品：P3-X63Ag8细胞、Human Epithelioma-2细胞、HITT15细胞 
H647细胞系相关产品：DMS-273细胞、FRhK4细胞、Reuber-H-35 hepatoma细胞 
Colon-38细胞系相关产品：CEM/0细胞、786-0WT细胞、LTEP-s细胞 
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1细胞系相关产品：A 375细胞、RLE-6TN细胞、NCM-460细胞 
Strain L-929细胞系相关产品：LED-WiDr细胞、H1915细胞、MT-4细胞 
N-Tera-2细胞系相关产品：RBL-2H3细胞、IEC 18细胞、PC-3M IE8细胞 
Human Intestinal Epithelial Cell-6细胞系相关产品：QGY7701细胞、CNE-2细胞、PK (15)细胞 
MIHA细胞系相关产品：HCS-2/8细胞、NPC-039细胞、PaTu8988s细胞 
RCC4细胞系相关产品：KM933细胞、NCI-SNU-423细胞、HEK 293-F细胞 
SKO007细胞系相关产品：L1210细胞、BL-6细胞、HNE-3细胞 
PC 12细胞系相关产品：RPMI-2650细胞、RPMI 6666细胞、SKN-SH细胞 
F81细胞系相关产品：UPCI-SCC-90细胞、Natural Killer-92细胞、BHK21细胞 
SkMel31细胞系相关产品：CWR22R-V1细胞、LS-174细胞、32D:cl3细胞 
SkMel31细胞系相关产品：CWR22R-V1细胞、LS-174细胞、32D:cl3细胞 
TYKnu细胞系相关产品：NCIH1915细胞、OVSAHO细胞、Fortner's melanotic melanoma #3细胞 
MDAPC2B细胞系相关产品：M07e细胞、H2106细胞、SF539细胞 
Panc-08.13细胞系相关产品：C4-I细胞、Normal Rat, August 3, 1983细胞、MCF 7细胞 
NCI-H1404 人乳头状腺癌细胞系
A2058细胞系相关产品：SW-480细胞、AMC-HN8细胞、A7r5细胞 
MDA-330细胞系相关产品：SPC-A-1细胞、H87细胞、10RGB细胞 
MALME.3M细胞系相关产品：P3J细胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]细胞、SP-2细胞 
SP2-0-Ag14细胞系相关产品：KNS-81细胞、Toledo细胞、MHH-CALL2细胞 
NB-19细胞系相关产品：HREC细胞、PGLH7细胞、F98细胞 
MRC 5细胞系相关产品：BE2-C细胞、PE CA PJ34细胞、RC-4B细胞 
KMS-26细胞系相关产品：ARH-77细胞、H-2110细胞、HME1细胞 
MPP89细胞系相关产品：HNEpC细胞、MBdSMC细胞、KS-SLK细胞 
LC-1/sq细胞系相关产品：Panc 10.05细胞、Scott细胞、EC-GI细胞 
CCD-841CoN细胞系相关产品：HPF细胞、Tsup-1细胞、hTERT-RPE细胞 
NBLAN5T细胞系相关产品：KFB细胞、HEL-299细胞、CEK细胞 
IEC 6细胞系相关产品：NCI-H865细胞、H4细胞、Hs 606.T细胞 
OV433细胞系相关产品：HMO6细胞、SH-SY5Y细胞、RSC96细胞 
HT144细胞系相关产品：PCI-4.2细胞、COLO829细胞、HEK 293-H细胞 
OACP4C细胞系相关产品：B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞、EOC 20细胞、NB-4细胞 
PANC0203细胞系相关产品：SK-BR3细胞、SNU423细胞、HeLa 229细胞 
SKRC-20细胞系相关产品：NCI-H2342细胞、JOSK-M细胞、SUM 52细胞 
CT26.WT细胞系相关产品：NCIH1341细胞、SCC-25细胞、SN-12C细胞 
SF 295细胞系相关产品：MDA-MB 453细胞、SW-1116细胞、HuP-T3细胞 
HEK 293A细胞系相关产品：ESC-410细胞、LC-1/sq细胞、RGC5细胞 
3T3 Swiss Albino细胞系相关产品：OVTOKO细胞、BNL CL2细胞、CCK81细胞 
MuM-2C细胞系相关产品：Hs688(A)T细胞、Calu6细胞、OV2008细胞 
NCI-H1299细胞系相关产品：COR-L23细胞、Madison 109细胞、C643细胞 
Fox/NY细胞系相关产品：ZR751细胞、HCS-2/8细胞、SNB-19细胞 
U266细胞系相关产品：MV-4-11细胞、H1993细胞、AZ-521细胞 
MSTO211H细胞系相关产品：NFS-60细胞、SUM-159PT细胞、CATH-a细胞 
RKOE6细胞系相关产品：SUM 190PT细胞、BCECs细胞、BC-3-H-I细胞 
MTC-TT细胞系相关产品：UMC11细胞、MeWo细胞、HBVSMC细胞 
LX-2细胞系相关产品：MDA-MB-435S细胞、OVCA433_Bast细胞、GM04678细胞 
HM细胞系相关产品：HCC1143细胞、P388D1细胞、SK-Mel 1细胞 
TE 85 ClF-5细胞系相关产品：IGROV细胞、Neuro 2a细胞、NCI-SNU-886细胞 
H-1650细胞系相关产品：IPLB-SF 21细胞、DAKIKI Clone 1细胞、U 266细胞 
MDA361细胞系相关产品：HCC0038细胞、RCC 786-O细胞、QG56细胞 
H2141细胞系相关产品：Reuber H-35细胞、LP-1细胞、NCI-Hut 125细胞 
H322T细胞系相关产品：H676B细胞、MV-522细胞、U138MG细胞 
RKO-AS-45-1细胞系相关产品：SGC996细胞、SuDHL 5细胞、Vero 76 clone E6细胞 
UPCISCC154细胞系相关产品：FTC133细胞、SK-N-BE(1)n细胞、138 MG细胞 
NBL_S细胞系相关产品：KCL22细胞、HEK.EBNA细胞、Ocular Choroidal Melanoma-1细胞 
Hs 822.T细胞系相关产品：SK-N-MC细胞、CV 1细胞、GCT0404细胞 
D10G41细胞系相关产品：SUM-102细胞、AR4IP细胞、bEnd3细胞 
CAL39细胞系相关产品：SK-UT-1细胞、RBE细胞、BT-20细胞 
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Hs746-T细胞系相关产品：DU 4475细胞、NCI-H2126细胞、KY-270细胞 
SW-756细胞系相关产品：CD-18细胞、H250细胞、PTK2细胞 
HPaSteC(HPSC)细胞系相关产品：C3H-10T1/2细胞、MyLa 2059细胞、HEL-92细胞 
MDA-175细胞系相关产品：Tn-5细胞、KY180细胞、M4e细胞 
SMC-1细胞系相关产品：GM07404A细胞、FRTL5细胞、Caki-2细胞 
ECC-12细胞系相关产品：RCC10细胞、SCL1细胞、Lec1细胞 
PNT-1A细胞系相关产品：SV40 MES 13细胞、A9 (Hamprecht)细胞、GMK,BSC-1细胞 
NCIH64细胞系相关产品：Colo-201细胞、HL-1细胞、HOP62细胞 
HTSMC细胞系相关产品：LIM-1215细胞、Ej138细胞、HTori-3细胞 
MES-13细胞系相关产品：OSK-1细胞、LOU-NH-91细胞、NCI-H209细胞 
HCC0078细胞系相关产品：HT144细胞、MIA Paca2细胞、H-35细胞 
CCC-HSF-1细胞系相关产品：McArdle RH-7777细胞、SW 1463细胞、CCD1095Sk细胞 
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