SW527 人乳腺癌细胞系

"SW527 人乳腺癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞培养方面注意的几点：无菌意识要强：实验进行前，超净台以紫外灯照射３０分钟灭菌，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启超净工作台风扇运转数分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置，其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以７０%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域，一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约４５°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基：不同的细胞可能培养基不同，甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞，有文献就选用neurobase培养基，而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而这种培养基中含有抗氧化剂成分，此时，我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:４℃冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指５６℃，３０分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到５６℃后，将血清放入，待温度升高到５６℃后计时，一般５分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须，一般不要作此热处理，因为会造成沉淀物之显著增多，且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
SW527 人乳腺癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
细胞组成了组织，组织组成了器官，器官的组织就形成了一个个体，所有的组织和器官都是由细胞分化增殖形成的，通过汲取营养物质，最后形成个体。把人体的单个小细胞比喻成一个地球，人体组织呢就是一个太阳系，器官就是银河系，这样生动形象的比喻，可以让我们很容易了解到细胞与组织、组织与器官之间的关系。人的身体就像一个庞大的机器工厂，每时每秒都在进行着能量的传输与转化，它也像个巨大的产业链，一旦某个环节出了问题，同样伴随着的是人的身体也会出现不同程度的功能障碍，这也就是为什么人到某一定阶段以后身体的某些功能会逐渐衰退的原因。人的基本生命活动是通过细胞实现的，细胞的活动或功能异常，人体就容易生病。人之所以会得病就是人体内的细胞除了问题，一旦细胞有问题——组织就有问题——器官就有问题——系统就有问题——人就会得病。人体细胞每天都在分裂增殖，但是增长到一定阶段后就开始停止、病变或凋亡，如果不及时修复或增加，人体就会出现不同程度的疾病症状，小到病毒感冒，大到疑难杂症无一不都是因为人体内的细胞出了问题。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
SW527 人乳腺癌细胞系
细胞传代时消化的问题：可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。（以难消化细胞为例）；具体操作：１)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗１-２遍，（这是前奏，即为步，目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。２)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。）３)吸干净瓶内剩余液体，加入０.３ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用，加入新培养基开始吹打，吹打２-３遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用２ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。（你也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比。）这是第三步。４)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，呵呵。继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况你自己把握）。这是第四步。其实还可以有第五步，对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话，你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态，更漂亮的样子，没办法，你必须分多批多次消化，这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低，保证细胞的状态能够。当然了，如果细胞是属于那种很容易消化的细胞，像RAW２６４.７，仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较，去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步，除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外，还有一个更重要的作用就是，可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态，不成片不连体。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
GM03573A细胞系相关产品：Panc 5.04细胞、NOMO1细胞、LLC-PK1细胞 
VM Cub 1细胞系相关产品：INS1E细胞、HLEpiC细胞、22Rv1细胞 
Walker-256细胞系相关产品：AR4-IP细胞、HCC0366细胞、HEL-92_1_7细胞 
SDBMSC细胞系相关产品：hSCC-25细胞、HSAS4细胞、VMM39细胞 
PCI-4M细胞系相关产品：hTERT RPE1细胞、52PE细胞、WM451Lu细胞 
Mv1.Lu细胞系相关产品：MDA-MB-361细胞、H1975细胞、P3X63细胞 
DH 82细胞系相关产品：A549/DDP细胞、MEG01细胞、IMR 32细胞 
MEG01细胞系相关产品：OVCAR4细胞、Hs706T细胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4细胞 
Tu 177细胞系相关产品：KP-4细胞、NCI-SNU-1细胞、H-82细胞 
253JB-V细胞系相关产品：OV2008细胞、HSC-6细胞、NCI-HUT-520细胞 
GBCSD细胞系相关产品：Vx2细胞、IGROV细胞、Hs 274.T细胞 
NCI-H64细胞系相关产品：HepaRG细胞、D-324 Med细胞、McA-RH7777细胞 
AAV293细胞系相关产品：COS1细胞、MLE12细胞、NCIH2171细胞 
NHRF细胞系相关产品：D-341 Med细胞、MB 157细胞、IOSE 29细胞 
MCA205细胞系相关产品：JB-6细胞、COLO 320DM细胞、293c18细胞 
Hs870T细胞系相关产品：JG细胞、NCI-H748细胞、SK-MEL-1细胞 
Hs870T细胞系相关产品：JG细胞、NCI-H748细胞、SK-MEL-1细胞 
PANC1005细胞系相关产品：H-2198细胞、N-87细胞、MOLM-16细胞 
TE5细胞系相关产品：MN-9D细胞、NCI-H2066细胞、TE-5细胞 
Sp2/O细胞系相关产品：X63-AG 8.653细胞、OUMS-23细胞、SCC4细胞 
SW527 人乳腺癌细胞系
NL20细胞系相关产品：RIN m5F细胞、MLFC细胞、LTEP-sm 1细胞 
MNNG/HOS Clone F-5细胞系相关产品：SJSA1细胞、DHL-16细胞、GM02131A细胞 
ARO细胞系相关产品：2PK3细胞、MOLM-14细胞、A375.S2细胞 
NOR-10细胞系相关产品：ROS-17/2.8细胞、H146细胞、SKNFI细胞 
He-La细胞系相关产品：NCI-H1703细胞、J 82细胞、THP1细胞 
BTI-Tn-5B1-4细胞系相关产品：RMC细胞、H1581细胞、OKT 3细胞 
Fetal Human Lens-124细胞系相关产品：bEnd.3[BEND3]细胞、A375-S2细胞、A-431细胞 
LM-TK-细胞系相关产品：RPTC细胞、ID8细胞、GC-2spd(ts)细胞 
SW 1573细胞系相关产品：Sp 2817细胞、CBRH7919细胞、MDA231细胞 
WB-F344细胞系相关产品：NCI-H211细胞、Kit225/K6细胞、WM239A细胞 
UMR-106细胞系相关产品：NK 10a细胞、T8细胞、HOS-TE85细胞 
HCC78细胞系相关产品：SK-N-SH细胞、SK-MEL2细胞、SW-837细胞 
H1650细胞系相关产品：H2171细胞、PLB-985细胞、HCCLM6细胞 
RPMC细胞系相关产品：RA-FLSs细胞、NeHepLxHT细胞、H2286细胞 
WM451Lu细胞系相关产品：HS 1.Tes细胞、U-138 MG细胞、NK10a细胞 
Hs739T细胞系相关产品：OCI-Ly 7细胞、B-cell with DC Morphology细胞、H-2171细胞 
NCI-H748细胞系相关产品：ARH 77细胞、Embryonic Bovine Tracheal cells细胞、COR-L26细胞 
IOSE-29细胞系相关产品：LTEP-a-2细胞、SNU-C2B细胞、MAntle cell VERona-1细胞 
MKN45细胞系相关产品：TE-671细胞、MCMEC细胞、SVG(P12)细胞 
CAL-120细胞系相关产品：Ishikawa细胞、RAT2细胞、MBT-2细胞 
Chang liver细胞系相关产品：COS-7细胞、IB-RS2细胞、L-6TG细胞 
MGH-UI细胞系相关产品：ASH3细胞、Bovine Turbinate细胞、SK-MEL3细胞 
CAKI1细胞系相关产品：Anip 973细胞、159 PT细胞、HTR8svn细胞 
Hs 840.T细胞系相关产品：SUIT-2细胞、HCC-2279细胞、Human Liver-7702细胞 
NCIH244细胞系相关产品：LIPF155C细胞、MF2059细胞、EJ细胞 
Hela-mock细胞系相关产品：LS-123细胞、HCV 29细胞、Hs 578.Bst细胞 
MFE 296细胞系相关产品：SK UT 1细胞、RPMI-7666细胞、NCI-SNU-1040细胞 
HEK/EBNA细胞系相关产品：K 562细胞、HT3细胞、NCI-H1693细胞 
Adeno-293细胞系相关产品：VMRC-LCD细胞、TSCC1细胞、8402细胞 
YT细胞系相关产品：LLC细胞、HCEpiC细胞、SKNMC细胞 
1E8-H细胞系相关产品：RPMI 7666细胞、RBSMC细胞、LNCaP细胞 
BHK细胞系相关产品：TEC细胞、I90细胞、H2085细胞 
H-2227细胞系相关产品：HT1197细胞、HUT 125细胞、J.E6-1细胞 
H-650细胞系相关产品：LCLC103H细胞、ARO 81-1细胞、AtT 20细胞 
Vero E6细胞系相关产品：HL-60细胞、OCIAML3细胞、HOS TE 85细胞 
RAOEC细胞系相关产品：KNS62细胞、WSU-HN13细胞、H-1355细胞 
JeKo-1细胞系相关产品：UM2细胞、BCP-1细胞、H1734细胞 
Psi-2 DAP细胞系相关产品：HFT 8810细胞、SJRH 30细胞、HCC1954 BL细胞 
CNLMG-B5537SKIN细胞系相关产品：UPCI:SCC90细胞、L 540细胞、SK-N-BE2细胞 
NCI-HUT-125细胞系相关产品：Ramos.2G6.4C10细胞、Jurkat E6细胞、C33细胞 
H-1581细胞系相关产品：NCI-H841细胞、HLE细胞、YH细胞 
SW527 人乳腺癌细胞系
TPC1细胞系相关产品：TE-4细胞、Mono Mac 1细胞、U-373MG细胞 
ONS76细胞系相关产品：TCam 2细胞、He-La细胞、MG63细胞 
He La细胞系相关产品：C81-61细胞、EST50细胞、M210B4细胞 
WM239细胞系相关产品：GM03320D细胞、SNU-423细胞、TU 686细胞 
Rat 1细胞系相关产品：HMrSV5细胞、NCI-H1792细胞、ACT-1细胞 
Hs606T细胞系相关产品：FL-83B细胞、H322细胞、HCC2935细胞 
HT144mel细胞系相关产品：MDAMB435细胞、HPAF细胞、CHL1细胞 
LIM 1215细胞系相关产品：U-87细胞、DF1细胞、H1573细胞 
Line 522细胞系相关产品：H4IIEC3细胞、F442-A细胞、hMSC-BM细胞 
HTR8/SVneo细胞系相关产品：COS7细胞、PANC0327细胞、OVCAR-5细胞 
Granta519细胞系相关产品：TE15细胞、Hs870T细胞、NCIH211细胞 
Walker-256细胞系相关产品：AR4-IP细胞、GC1-SPG细胞、Y-79细胞 
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