HCC1171 人肺癌腺癌细胞系

"HCC1171 人肺癌腺癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
常见培养细胞预防污染的有效措施：体外培养的细胞受到严重污染时，有时即使想尽各种办法也难以挽回。因此，防止污染，预防是关键。只有将预防措施贯穿于整个细胞培养的始终，才能将发生污染的可能性降到最小程度。一般预防可从以下几方面着手：１)添加抗生素：各种抗生素性质不同，对各种微生物的作用也不同，联合应用比单用效果好，预防性应用比污染后使用好(但迄今尚无对抗支原体特效抗生素)。但反复使用抗生素会使微生物产生耐药性，且对细胞本身也有一定影响，因此为避免诱导抗药细菌，应定期更换培养系统中的抗生素，或尽可能不用抗生素处理；２)从物品、用品消毒灭菌着手：细胞培养所用物品清洗、消毒要彻底，各种溶液灭菌除菌要仔细，并在取样检菌一周后确认无菌才能使用。同时，在无菌过滤操作中，随着滤过体积的增大，滤膜破损的可能性增加，故应选择最后过滤的液体进行检测。定期对二氧化碳培养箱进行消毒。具体操作：７５%的酒精搽拭培养箱后，使用可移动的紫外灯至少消毒３０min，加入高压灭菌过的超纯水于培养箱水槽中保持湿度。也可配制３００ml的饱和酸铜加３L灭菌超纯水混合成酸铜溶液加入水槽中。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
HCC1171 人肺癌腺癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞建议只吹打，不消化）其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
HCC1171 人肺癌腺癌细胞系
细胞传代时消化的问题：可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。（以难消化细胞为例）；具体操作：１)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗１-２遍，（这是前奏，即为步，目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。２)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。）３)吸干净瓶内剩余液体，加入０.３ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用，加入新培养基开始吹打，吹打２-３遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用２ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。（你也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比。）这是第三步。４)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，呵呵。继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况你自己把握）。这是第四步。其实还可以有第五步，对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话，你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态，更漂亮的样子，没办法，你必须分多批多次消化，这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低，保证细胞的状态能够。当然了，如果细胞是属于那种很容易消化的细胞，像RAW２６４.７，仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较，去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步，除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外，还有一个更重要的作用就是，可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态，不成片不连体。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
SHSY5Y细胞系相关产品：H1666细胞、MEF细胞、FL-83B细胞 
GTL-16细胞系相关产品：H35 Reuber细胞、SNG-M细胞、Colo205细胞 
SKRC20细胞系相关产品：C32 mel细胞、SV40-HCEC细胞、CCD-112CoN细胞 
Capan 1细胞系相关产品：CAOV3细胞、BHP 10-3细胞、NCI-SNU-5细胞 
SUM 52细胞系相关产品：MDA415细胞、SU86-86细胞、SKRC-20细胞 
CCD-841CoN细胞系相关产品：HPF细胞、Tsup-1细胞、hTERT-RPE细胞 
SKRC-52细胞系相关产品：VA-ES-BJ细胞、Ly19细胞、Sci-1细胞 
SW 13细胞系相关产品：CCD18Co细胞、UMUC-14细胞、CAOV4细胞 
NCI-H520细胞系相关产品：Hs888T细胞、DC2.4细胞、HIEC-6细胞 
HT 144细胞系相关产品：CNE1-LUC细胞、UMC-11细胞、PC-9细胞 
SY5Y细胞系相关产品：DBTRG-05MG细胞、BHT-101细胞、TE11细胞 
HN6细胞系相关产品：HPB-ALL细胞、NOZ细胞、MOPC细胞 
Bovine ENDometrial cells细胞系相关产品：N9细胞、MDA-MB-134-VI细胞、CF Pac1细胞 
GP5d细胞系相关产品：SKES-1细胞、OCI-AML2细胞、Vero细胞 
HUC-1细胞系相关产品：NCI-H187细胞、Astrocyte type I clone细胞、TE-12细胞 
IEC-6细胞系相关产品：AdHek细胞、OCI-LY-7细胞、Hs 839.T细胞 
IEC-6细胞系相关产品：AdHek细胞、OCI-LY-7细胞、Hs 839.T细胞 
Cates 1B细胞系相关产品：KP2细胞、67NR细胞、A549细胞 
MLM细胞系相关产品：NCI-H1581细胞、NPA-87细胞、GM03320D细胞 
Hs 739.T细胞系相关产品：U138-MG细胞、HUVSMC细胞、OVCA 432细胞 
HCC1171 人肺癌腺癌细胞系
293AD细胞系相关产品：AHH-1细胞、GC-1spg细胞、UCLA-SO-14细胞 
NCI-SNU-16细胞系相关产品：IHH细胞、NTERA-2细胞、T98细胞 
H1781细胞系相关产品：MAC1细胞、mREC细胞、HEC151细胞 
NCIH1693细胞系相关产品：C4-2 B细胞、Metastatic Variant-522细胞、COLO-320DM细胞 
OV1-P细胞系相关产品：H740细胞、SK-ChA-1细胞、UPCI:SCC154细胞 
UPCI:SCC154细胞系相关产品：PTK1细胞、Lu99A细胞、HSC3细胞 
Huh7.5细胞系相关产品：Hs819.T细胞、L-WRN细胞、Mono Mac6细胞 
CAL-62细胞系相关产品：mRMEC细胞、KYSE180细胞、HS766T细胞 
HFL-I细胞系相关产品：Tregs细胞、HT1376细胞、H-295细胞 
H735细胞系相关产品：Hs 934.T细胞、IPLB-Sf21AE细胞、CAL 12细胞 
A-204细胞系相关产品：COLO 205细胞、P31/FUJ细胞、NCI H345细胞 
KYSE270细胞系相关产品：2780CP细胞、P3JHR1细胞、BALB/3T3细胞 
UMUC14细胞系相关产品：Mono Mac 1细胞、CT26-clone 25细胞、MNNG-HOS细胞 
BNL.1ME A.7R.1细胞系相关产品：NCI-H740细胞、NCI-SNU-C1细胞、3T3-Swiss albino细胞 
WERI-Rb1细胞系相关产品：GCT细胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6细胞、CAOV3细胞 
H1703细胞系相关产品：DAKIKI Clone 1细胞、MDA1386细胞、CACO2细胞 
GM02219D细胞系相关产品：RMa-bm细胞、WSU-DLCL2细胞、HFT8810细胞 
GM03190细胞系相关产品：H-1092细胞、H69细胞、WiDr/S细胞 
Tu-177细胞系相关产品：MUG-Chor1细胞、NIH:OVCAR-10细胞、WM2664细胞 
C-4-I细胞系相关产品：Capan2细胞、beta-TC6细胞、Jijoye细胞 
PNT1/A细胞系相关产品：HCC-1599细胞、Hs729T细胞、NRK-49F细胞 
CAL51细胞系相关产品：MDA-MB231细胞、HEK/293细胞、HSC细胞 
Ramos细胞系相关产品：CAL51细胞、PC-9细胞、C32 mel细胞 
VAESBJ细胞系相关产品：ELD-1细胞、NCI-H322T细胞、MyLa2059细胞 
Hs281T细胞系相关产品：HBdSMC细胞、T9细胞、MC3T3-E1 Subclone 4细胞 
MESSA细胞系相关产品：M109细胞、KYSE-70细胞、L1210细胞 
NCI H747细胞系相关产品：NKL细胞、HeLa-S3细胞、Colon 26细胞 
COS7细胞系相关产品：BALB/3T3 cl. A31细胞、HR1K细胞、Vx2细胞 
NCI-H2085细胞系相关产品：L-6细胞、H-7721细胞、HT55细胞 
MA-104细胞系相关产品：Rin-M-5F细胞、RT4-D6P2T细胞、UMR106细胞 
MARC145细胞系相关产品：FRH-0201细胞、IPLB-SF-21-AE细胞、HCC2157细胞 
SK-N-DZ细胞系相关产品：A-1847细胞、EC109细胞、BEL 7405细胞 
MDAMB415细胞系相关产品：293F细胞、SCL-I细胞、MDA436细胞 
U373-MG细胞系相关产品：Human Melanoma Cell Bowes细胞、HCC1954细胞、Me-Wo细胞 
2E8细胞系相关产品：HCT 8细胞、U-87细胞、SKUT1细胞 
KYSE 520细胞系相关产品：H2122细胞、RC-4B/C细胞、NCIH889细胞 
KU812-F细胞系相关产品：639V细胞、B35细胞、Pro-5 Lec1.3c细胞 
CAL39细胞系相关产品：SK-UT-1细胞、RBE细胞、BT-20细胞 
H2106细胞系相关产品：RIMEC细胞、SW 403细胞、RCC-10RGB细胞 
KM12细胞系相关产品：Farage Original Line细胞、NCI-H165细胞、SW-839细胞 
HEI193细胞系相关产品：DLD1细胞、138MG细胞、UMNSAH/DF-1细胞 
HCC1171 人肺癌腺癌细胞系
THP1细胞系相关产品：HBVP细胞、WM115-mel细胞、MUTZ3细胞 
MEF (CF-1)细胞系相关产品：HPDE6c7细胞、RMG-I细胞、1301细胞 
A427细胞系相关产品：CCD 841 CoN细胞、SW 954细胞、RH-35细胞 
RC92A细胞系相关产品：NCIH1648细胞、CCC-HEH-2细胞、HUT 125细胞 
Evsa T细胞系相关产品：SF-539细胞、U138细胞、IOSE 80细胞 
PK15细胞系相关产品：WM 2664细胞、HEC151细胞、Mel RM细胞 
SCH细胞系相关产品：SUP T1细胞、Metastatic Variant 522细胞、DoHH-2细胞 
PC-3M-2B4细胞系相关产品：GBC-SD细胞、HUT125细胞、Jurkat77细胞 
He La细胞系相关产品：C81-61细胞、EST50细胞、M210B4细胞 
HEK-AD293细胞系相关产品：KASUMI1细胞、526细胞、624mel细胞 
JVM2细胞系相关产品：YES-2细胞、H2198细胞、SK-MES细胞 
SKRC20细胞系相关产品：C32 mel细胞、PC-9细胞、IM95细胞 
"