VP303 人乳腺癌细胞系

"VP303 人乳腺癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞培养无菌操作的演示：凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精灯火焰操作。器皿使用前必须过火灭菌，继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在高处，使用时仍要过火。各种操作要靠近酒精灯，动作要轻、准确，不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自来水刷洗，除去灰尘。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小时以除去脏物、铅、等物。刷洗、烘干：１２小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲干净后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清洁液浸泡１２小时，然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗１５次，最后蒸馏水冲洗３-５次和用双蒸水过３次。烘干、包装：洗干净后先烘干，然后用牛皮纸(油光纸)包装。高压消毒：包装好的器皿装入高压锅内盖好盖子，打开开关和安全阀，当蒸气成直线上升时，关闭安全阀，当指针指向１５磅时，维持２０-３０分钟。高压消毒后烘干。二、旧的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中，泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清洁液(酸液)，１２小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗)，再用蒸馏水冲洗３次。烘干、包装：洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
VP303 人乳腺癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
VP303 人乳腺癌细胞系
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系，大部分的细胞都是要成片生长的，尤其是对于贴壁细胞，单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话，传代后细胞是不能贴壁的，这样抱团的细胞就会死亡。所以，消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态，这个啊是非常考究你的功夫的！细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个，因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开，受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊，这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来，又不能太过，一吹就整片脱落，要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-２细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到７０%左右的时候就要传代了，一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞，你在洗的时候如果是用无血清１６４０去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样，用１６４０培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话，可以用PBS来洗，洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的，对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清，防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先，是很关键的一点。先补充这么多，还会后续更新。再补充一点：传代时PBS洗是很重要的一步，最近发现，用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置１０-１５分钟，有些需要更长的时间，等到细胞一个个分离开来的时候，就可以直接吹打下来，但是和胰酶消化一样，要控制好时间，不能时间太过了，要不然损伤细胞，细胞不容易成活，状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候，或者临时没有胰酶了，可以选用此方法。不过一定要试试，看是否适合你的细胞。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
HEC1-B细胞系相关产品：HConEpic细胞、HT 1376.T细胞、GDM-1细胞 
KNS81细胞系相关产品：3T3-J2细胞、LS-513细胞、LUDLU 1细胞 
KCL-22细胞系相关产品：Central Adrenergic TH-expressing a细胞、MKN28细胞、SaOS细胞 
SK-N-BE(2)C细胞系相关产品：MDA-MB157细胞、NCI-H64细胞、J-111细胞 
CMT-64细胞系相关产品：GP2d细胞、tdott细胞、UMNSAH-DF1细胞 
Hs 766细胞系相关产品：SUM52PE细胞、A172细胞、HF-91细胞 
SKNAS细胞系相关产品：SNK-6细胞、Super Tube细胞、NIH:OVCAR4细胞 
639-V细胞系相关产品：PA-TU-8988S细胞、CAL27细胞、NCI-H1435细胞 
HEp-2细胞系相关产品：Jurkat-E6细胞、HCC38细胞、beta TC6细胞 
M-G63细胞系相关产品：SKMel-5细胞、SUIT-2细胞、HLE-B3细胞 
H4-IIE-C3细胞系相关产品：CAL 27细胞、Human Embryonic Kidney 293细胞、Walker-Ca.256细胞 
NHLF细胞系相关产品：149PT细胞、A-1847细胞、Anglne细胞 
BV173细胞系相关产品：RGC-5细胞、RBL.2H3细胞、HS-445细胞 
RAEC细胞系相关产品：HCC2279细胞、NCIH2122细胞、HM06.A1细胞 
RH30SJ细胞系相关产品：End1/E6E7细胞、TCC-SUP细胞、HT22细胞 
A-172 MG细胞系相关产品：HCC-827细胞、COLO-824细胞、MEC1细胞 
8305-C细胞系相关产品：CDC/EU.HMEC-1细胞、TGHAVSMC细胞、MCF12F细胞 
NCI-SNU-407细胞系相关产品：CAMA1细胞、UC-3细胞、H-2009细胞 
CEM.C1细胞系相关产品：10RGB细胞、NCIH23细胞、MN-9D细胞 
PNEC30细胞系相关产品：Ly7细胞、FHC细胞、BCPAP细胞 
VP303 人乳腺癌细胞系
MPC 11细胞系相关产品：KLE细胞、H1105细胞、SEG-1细胞 
Chinese Hamster Ovary细胞系相关产品：Hs934T细胞、SKBR-3细胞、MGC-803细胞 
IMR 90细胞系相关产品：SNU-398细胞、SCLC-21H细胞、Sp2/mIL-6细胞 
MDAMB175VII细胞系相关产品：HCV-29细胞、CT-26细胞、WM451细胞 
OCILY-10细胞系相关产品：P3-X63-Ag8-653细胞、WM 239A细胞、Cor L51细胞 
HEB细胞系相关产品：KMS26细胞、H-847细胞、EB1细胞 
OVCAR.4细胞系相关产品：CCRF/CEM细胞、BeWo细胞、MDCC MSB1细胞 
P3X63 AG 8.653细胞系相关产品：C33细胞、P-2003细胞、PANC-10-05细胞 
TF1细胞系相关产品：NB1-RGB细胞、SHEP1细胞、BetaTC6细胞 
McArdle RH-7777细胞系相关产品：WB F344细胞、786.O细胞、OVCAR-420细胞 
Calu-3细胞系相关产品：H-378细胞、OP-9细胞、Hs 611.T细胞 
NCI-H820细胞系相关产品：P31/FUJ细胞、Caco 2细胞、HHUA细胞 
Mino细胞系相关产品：EoL-1-cell细胞、LM6细胞、RPMI.8226细胞 
3T3-442A细胞系相关产品：SK-MEL-MeWo细胞、PANC 327细胞、RKO-AS45-1细胞 
AR42J细胞系相关产品：COR-L88细胞、TI-73细胞、HeLa S 3细胞 
UMRC-2细胞系相关产品：RBL细胞、NCI-H740细胞、CMT-93细胞 
N87细胞系相关产品：HDSMC细胞、Th17细胞、L-M(TK-)细胞 
COR-L279细胞系相关产品：NS1细胞、Caov-4细胞、HCC0015细胞 
National Medical Center-Glioma 1细胞系相关产品：HBE 135-E6E7细胞、HSCT6细胞、KYSE 410细胞 
NCI-H2110细胞系相关产品：E6-1细胞、G-292 clone A141B1细胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1细胞 
NCI H548细胞系相关产品：HCC 38细胞、MDAMB175VII细胞、AQ-Mel细胞 
OVCAR 4细胞系相关产品：TSCC1细胞、HIEC细胞、NPA-87细胞 
MeSoTheliOma-211H细胞系相关产品：BIU-87细胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2细胞、SU-DHL-1细胞 
RPMI #8226细胞系相关产品：He La细胞、LICR-LON-HN6-R细胞、SKNBE-2细胞 
NCIH510细胞系相关产品：N-9细胞、HCT GEO细胞、SNU-886细胞 
FHC细胞系相关产品：HELA-GFP细胞、T-24细胞、S91细胞 
MonoMac6细胞系相关产品：DMS53细胞、SUM190细胞、NCI-H810细胞 
HuT 102细胞系相关产品：CAKI 1细胞、GM15452细胞、SW954细胞 
CHO K1细胞系相关产品：CAL 78细胞、NCIH1623细胞、NCI-H82细胞 
MC3T3-L1细胞系相关产品：C-Li-7细胞、BV2细胞、MES-SA-Dx5细胞 
HAC-84细胞系相关产品：Panc-3_27细胞、KNS62细胞、Hs-729-T细胞 
NT2/D1细胞系相关产品：H-2170细胞、KYSE0410细胞、Y79细胞 
ZR751细胞系相关产品：PK (15)细胞、DI TNC1细胞、CHP-212细胞 
SW1417细胞系相关产品：B-16细胞、Kuramochi细胞、L细胞 
HSAS3细胞系相关产品：PE/CA-PJ-34细胞、Buffalo Rat Liver-3A细胞、HUTU80细胞 
QSG-7701细胞系相关产品：SW 626细胞、Y3-Ag1.2.3细胞、RPTC细胞 
HPAF-II/CD18细胞系相关产品：MSC细胞、GM-346细胞、SUP-B15细胞 
HBL100细胞系相关产品：PLB985细胞、Mel RM细胞、SU-DHL-10细胞 
MD Anderson-Metastatic Breast-361细胞系相关产品：OCILY10细胞、RCC23细胞、CRFK细胞 
P-388细胞系相关产品：ACC-3细胞、SKNBE2细胞、HLF细胞 
EJ 138细胞系相关产品：IEC18细胞、MV(4;11)细胞、MSCs（mUCMSCs）细胞 
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RPMI 7666细胞系相关产品：DMS 53细胞、SR-786细胞、SN12C-PM6细胞 
NCI-H1930细胞系相关产品：TCC Sup细胞、Hs695细胞、NCI-H1793细胞 
U251n细胞系相关产品：IM-9细胞、NCIH748细胞、H-1672细胞 
HLE细胞系相关产品：PLC细胞、D10G41细胞、NB4细胞 
HCC-1806细胞系相关产品：D324 Med细胞、RBL 2H3细胞、HCS2/8细胞 
MSTO-211 H细胞系相关产品：H-1666细胞、L5178Y-R细胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2细胞 
ReNcell CX细胞系相关产品：HM06.A1细胞、U251MG细胞、P3-x63-Ag8 653细胞 
HDLM-2细胞系相关产品：MHCC-97细胞、D407细胞、H2106细胞 
NCI-H2073细胞系相关产品：Gerner 7666细胞、HS-68细胞、B35细胞 
KYSE0410细胞系相关产品：H929细胞、TSU-Pr1细胞、MDA-MB 231细胞 
NCI-H676B细胞系相关产品：J82细胞、Tu686细胞、LC-1 sq细胞 
KCL22S细胞系相关产品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞、UCLA SO M21细胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1细胞 
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