LC-2/ad 人肺癌腺癌细胞系

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细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞培养实验基本操作：①进无菌室前要彻底洗手，按规定穿隔离衣。开始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。②操作者动作要轻，安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意，金属器械不能在火焰中长时间烧灼，以防退火；烧过的器械要冷却后才能使用；已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼，因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质，吸管再用时会将其带到培养液中；胶塞、橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养细胞，同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用。③使用培养液前不宜过早开瓶，开瓶后的培养液应保持斜位，避免直立，以防止下落细菌的污染。不再使用的培养液应立即封闭瓶口，培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中。④操作时尽量不要谈话，咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染。⑤吸取培养液、细胞悬液时，应专管专用，一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去，以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染。⑥操作完毕后应整理好工作台面，用消毒水浸泡的纱布擦拭台面；防止细胞交叉污染：所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备，一旦怀疑发生交叉污染，可做细胞遗传学方面的鉴定，如发现原有的细胞遗传物发生改变，可以复苏早期冻存的细胞使用。重要细胞系的传代工作应由两人独立进行；无菌室的彻底消毒①新洁尔灭全面彻底擦洗无菌室。使用前应稀释即配即用。新洁尔灭和酒精相比，的优点是便宜，而且可以稀释５０倍用，而同样量的酒精价格可能是新洁尔灭的几十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一种广谱灭菌剂菌，其水溶液和气体对各种细菌、芽孢及真菌等微生物均有杀灭作用。甲醛价廉，熏蒸消毒时不损坏衣服、家具、皮革、橡胶等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
LC-2/ad 人肺癌腺癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
冻存和复苏的原则：慢冻快融》当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序：采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时，1~2℃/min；当温度达-25℃以下时，5~10℃/min；当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中。2.简易程序：将冷冻管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱布袋系以线绳，通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口，按每分钟温度下降1~2℃的速度，在40min内降至液氮表面过夜，次晨投人液氮中。3.传统程序：冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时（或隔夜）→液氮槽长期储存。细胞冻存方法：1.预先配制冻存液》（1）8%DMSO+细胞生长液（92%血清）2.取对数生长期细胞，经胰酶消化后，加入适量冻存液，用吸管吹打制成细胞悬液（1×10(6)~5×10(6)细胞/ml）。3.加入1ml细胞于冻存管中，密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法：1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，轻轻摇动冷冻管，使其在1分钟内全部融化（不要超过3分钟）。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养，24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液，以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂特别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂，然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
LC-2/ad 人肺癌腺癌细胞系
细胞培养实验相关问题总结：支原体(mycoplasma)污染的细胞，是否能以肉眼观察出异状？不能。除极有经验之专家外，大多数遭受支原体污染的细胞株，无法以其外观分辨之；支原体污染会对细胞培养有何影响？支原体污染几乎可影响所有细胞之生长参数，代谢及研究之任一数据。故进行实验前，必须确认细胞为mycoplasma-free，实验结果之数据方有意义；侦测出细胞株有支原体污染时，该如何处理？直接灭菌后丢弃，以避免污染其它细胞株；CO２培养箱之水盘如何保持清洁？定期(至少每两周一次) 以无菌蒸馏水或无菌去离子水更换之；为何培养基保存于４°C冰箱中，颜色会偏暗红色，且pH值会越来越偏碱性？培养基保存于４°C冰箱中，培养基内之CO２会逐渐溢出，造成培养基越来越偏碱性。而培养基中之酸碱指示剂(通常为phenol red)的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱之结果，将造成细胞生长停滞或死亡。若培养基偏碱时，可以通入无菌过滤之CO２，以调整pH值；购买之细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；购买之细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；收到之冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
Calf Pulmonary Artery 47细胞系相关产品：SKRC-20细胞、MKN-74细胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z细胞 
TE 85.T细胞系相关产品：BE(2)M17细胞、RPTEC/TERT1细胞、GA-10 (Clone 4)细胞 
NCI-H1838细胞系相关产品：A3细胞、Strain V细胞、B16细胞 
HT29细胞系相关产品：SW 962细胞、OVCA-432细胞、HCT_116细胞 
TEV-1细胞系相关产品：4175细胞、Pan02细胞、Normal fibroblast-10细胞 
CHL-IU细胞系相关产品：KU-812-F细胞、SK-BR3细胞、QGY-7703细胞 
H226细胞系相关产品：H-1882细胞、SK N SH细胞、CEM.C1细胞 
EJ 138细胞系相关产品：IEC18细胞、MV(4;11)细胞、MSCs（mUCMSCs）细胞 
MN60细胞系相关产品：COLO-679细胞、VMRCRCZ细胞、WISH细胞 
UPCISCC090细胞系相关产品：LA-4 [Mouse lung adenoma]细胞、2PK-3细胞、3T3F442A细胞 
SU8686细胞系相关产品：BRL3A细胞、PANC-28细胞、LuCL4细胞 
KPL4细胞系相关产品：GT1-1细胞、WML2细胞、ABC1细胞 
LU-65M细胞系相关产品：OE19细胞、LL/2细胞、NCIH1436细胞 
MDAMB134细胞系相关产品：HIT.T15细胞、Panc-10.05细胞、Nittby-Salford 1细胞 
KTCTL140细胞系相关产品：H-2009细胞、Evsa-T细胞、COLO 678细胞 
PK13细胞系相关产品：MIA PaCa-2细胞、MM1S细胞、BEAS-2B细胞 
PK13细胞系相关产品：MIA PaCa-2细胞、MM1S细胞、BEAS-2B细胞 
BSC1细胞系相关产品：Granta-519细胞、SNU-119细胞、H69/P细胞 
MOVAS-1细胞系相关产品：Human Liver-7702细胞、NCI-H460细胞、WM266细胞 
Eca-109细胞系相关产品：SKMEL1细胞、F-36P细胞、HCMEC(BL12-H)细胞 
LC-2/ad 人肺癌腺癌细胞系
MV4-11细胞系相关产品：EBTr (NBL-4)细胞、AC16 [Human hybrid]细胞、SKLU01细胞 
AML 12细胞系相关产品：Kit225 K6细胞、NCI-H1882细胞、NCIN87细胞 
TE-85 clone 5细胞系相关产品：TE6细胞、MRC-5细胞、FT-293细胞 
RAOEC细胞系相关产品：KNS62细胞、WSU-HN13细胞、H-1355细胞 
H-548细胞系相关产品：HHL-5细胞、BMSC/hBMSCs细胞、HR8348细胞 
TFK1细胞系相关产品：ID8细胞、H520细胞、HCC1143细胞 
H-292细胞系相关产品：WEHI164细胞、PC3M细胞、NCI-H-128细胞 
Transformed Human Liver Epithelial-2细胞系相关产品：OKT3细胞、MOLM-13细胞、RAW264细胞 
NTERA2细胞系相关产品：NBL-4细胞、NK-92 MI细胞、SW 1353细胞 
HBZY-1细胞系相关产品：OCI-AML-3细胞、HSC1细胞、P-388细胞 
MFD-1细胞系相关产品：LAPC-4细胞、JHH-7细胞、MC3T3-E1 Subclone 24细胞 
OCM1细胞系相关产品：CTV-1细胞、hTERTHME1细胞、CL-11细胞 
MCF/Adr细胞系相关产品：BE(2)M-17细胞、BEL-7404细胞、CCC-ESF-1细胞 
LA795细胞系相关产品：Vero from pool #76细胞、HLF-a细胞、OVCAR-5细胞 
HCC-1954细胞系相关产品：CMECs细胞、P3-X63Ag8细胞、EST50细胞 
CL1-5细胞系相关产品：HuH-1细胞、HEp-2细胞、SW 626细胞 
NFS60细胞系相关产品：HUT-125细胞、PLC PRF 5细胞、P1-Raji细胞 
NPA细胞系相关产品：Rabbit Kidney 13细胞、JB-6细胞、GM16136细胞 
MV-3细胞系相关产品：H1672细胞、Caco-2/BBe细胞、TGBC-11-TKB细胞 
Beta-TC-6细胞系相关产品：HEK 293-F细胞、2T细胞、OCI-Ly10细胞 
SUDHL-1细胞系相关产品：NCI-SNU-119细胞、JIMT-1细胞、COS1细胞 
AgC11x3A细胞系相关产品：Cloudman M3细胞、SUM 102细胞、NTera 2/cl.D1细胞 
Tb1Lu细胞系相关产品：J-774细胞、SUM-52细胞、BE(2)C细胞 
LIM-1215细胞系相关产品：PANC0327细胞、CEMx721.174.T2细胞、GM00637F细胞 
OVCAR10细胞系相关产品：U 937细胞、LS-180细胞、SAOS 2细胞 
NCI-H2029细胞系相关产品：Ku812细胞、P30 OHK细胞、SK-NEP-1细胞 
Baby Hamster Kidney from litter No. 21细胞系相关产品：PCI-4B细胞、KATO III细胞、GFP-Olig2细胞 
MyLa 2059细胞系相关产品：B16 melanoma细胞、KYSE 520细胞、mRTEC细胞 
SNU5细胞系相关产品：NCI-SNU-C2B细胞、Hela-Ap-1细胞、HEK 293-EBNA细胞 
Huh7.5细胞系相关产品：Hs819.T细胞、L-WRN细胞、Mono Mac6细胞 
LN 382细胞系相关产品：SK-N-FI细胞、T98G细胞、HuNS1细胞 
COLO 680N细胞系相关产品：SVG(P12)细胞、J45.01细胞、5637细胞 
UMUC1细胞系相关产品：HLE细胞、HFL-1细胞、H-2029细胞 
HSCT6细胞系相关产品：LSECs细胞、BI-Mel细胞、SVGp12细胞 
HSC4细胞系相关产品：H1105细胞、mIMCD-3细胞、NSH细胞 
GM03570E细胞系相关产品：SU-DHL-2细胞、WM-239A细胞、Lu-165细胞 
UWB1-289细胞系相关产品：A2780/CP细胞、HHFK细胞、DBTRG-05MG细胞 
293 EBNA细胞系相关产品：Calu 3细胞、SUM159细胞、B 95-8细胞 
RAW 264.7细胞系相关产品：NCI-H2172细胞、MFM-223细胞、SK-GT-4细胞 
L5178-R细胞系相关产品：Karpas-299细胞、GM3190细胞、P3X63-Ag8.653细胞 
CTLA4Ig-24细胞系相关产品：HEK293-H细胞、NCTC-929细胞、A2008细胞 
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Hs706T细胞系相关产品：SR786细胞、JC细胞、Panc02细胞 
SUP-B1细胞系相关产品：RPMI 7951细胞、Hep-G2细胞、SKLMS1细胞 
WILL-2细胞系相关产品：Baby Hamster Kidney from litter No. 21细胞、BMF细胞、NCIH2172细胞 
Ca761细胞系相关产品：NCIH2170细胞、ST细胞、PTK 1细胞 
HCT-116细胞系相关产品：TGW-I-nu细胞、HS 1.Tes细胞、HCET细胞 
DHL6细胞系相关产品：KASUMI6细胞、C22细胞、LM(TK-)细胞 
Biologics Standards-Cercopithecus-1细胞系相关产品：H-810细胞、KAT-5细胞、MB39细胞 
786-O细胞系相关产品：P-19细胞、Y3M细胞、KU812-F细胞 
B 95.8细胞系相关产品：NS20Y细胞、KBM5细胞、HFE-145细胞 
MDA-435细胞系相关产品：GA-10 (Clone 4)细胞、RPTEC/TERT1细胞、HUVSMC细胞 
B-cell with DC Morphology细胞系相关产品：SCL2细胞、NS-I/1细胞、H-2286细胞 
NCI-H1838细胞系相关产品：A3细胞、DHL-6细胞、LLC PK1细胞 
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