COR-L51 人肺癌细胞系

"COR-L51 人肺癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞培养方面注意的几点：无菌意识要强：实验进行前，超净台以紫外灯照射３０分钟灭菌，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启超净工作台风扇运转数分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置，其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以７０%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域，一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约４５°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基：不同的细胞可能培养基不同，甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞，有文献就选用neurobase培养基，而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而这种培养基中含有抗氧化剂成分，此时，我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:４℃冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指５６℃，３０分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到５６℃后，将血清放入，待温度升高到５６℃后计时，一般５分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须，一般不要作此热处理，因为会造成沉淀物之显著增多，且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
COR-L51 人肺癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可。吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足够消化细胞。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后37℃消化。比较难消化的细胞（润洗方法5min还不能消化），这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育。不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性。如果和标准形态不一致，那可能是自己没消化好导致的，但如果消化方法正确，仍然成片分布，甚至完全吹打成单细胞悬液，贴壁后仍然成片分布，这是细胞的特性，是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布，你的细胞之后会对你越来越不好。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
COR-L51 人肺癌细胞系
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系，大部分的细胞都是要成片生长的，尤其是对于贴壁细胞，单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话，传代后细胞是不能贴壁的，这样抱团的细胞就会死亡。所以，消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态，这个啊是非常考究你的功夫的！细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个，因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开，受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊，这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来，又不能太过，一吹就整片脱落，要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-２细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到７０%左右的时候就要传代了，一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞，你在洗的时候如果是用无血清１６４０去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样，用１６４０培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话，可以用PBS来洗，洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的，对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清，防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先，是很关键的一点。先补充这么多，还会后续更新。再补充一点：传代时PBS洗是很重要的一步，最近发现，用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置１０-１５分钟，有些需要更长的时间，等到细胞一个个分离开来的时候，就可以直接吹打下来，但是和胰酶消化一样，要控制好时间，不能时间太过了，要不然损伤细胞，细胞不容易成活，状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候，或者临时没有胰酶了，可以选用此方法。不过一定要试试，看是否适合你的细胞。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
NCI-ADR-RES细胞系相关产品：Wayne State University-Head and Neck 13细胞、RPMI1846细胞、WEHI164细胞 
BRL3A细胞系相关产品：WEHI-164细胞、NTera-2D1细胞、COLO-205细胞 
SKO3细胞系相关产品：143 B细胞、NCIH460细胞、CV-1 in Origin Simian-7细胞 
D-341 Med细胞系相关产品：OVCAR8/ADR细胞、EOC-20细胞、HuCC-T1细胞 
LAD2细胞系相关产品：IPEC-1细胞、RGB细胞、WERIRb1细胞 
H-526细胞系相关产品：HMEC-1细胞、GM05384细胞、Mono-Mac-1细胞 
NCI-H1781细胞系相关产品：253JBV细胞、NHEK细胞、ESC-410细胞 
IOSE 80细胞系相关产品：H2330细胞、NALM-6细胞、FHC细胞 
M-O7e细胞系相关产品：HCE-T细胞、EFO27细胞、NCIH548细胞 
CAL 78细胞系相关产品：SNU-387细胞、U138-MG细胞、MB49细胞 
SK-LU-1细胞系相关产品：OCI-Ly 3细胞、LN 382细胞、211H细胞 
KYSE410细胞系相关产品：PTK-1细胞、HOS (TE85, Clone F5)细胞、WPE-int细胞 
MRC-V细胞系相关产品：Human Pancreatic Duct Epithelial细胞、HSC 3细胞、HO8910细胞 
NCI-SNU-5细胞系相关产品：HRMC细胞、RIN-14B细胞、THC-8307细胞 
HASMC细胞系相关产品：HOS TE 85细胞、LIPF178C细胞、OCI Ly1细胞 
HBL100细胞系相关产品：PLB985细胞、Mel RM细胞、SU-DHL-10细胞 
HBL100细胞系相关产品：PLB985细胞、Mel RM细胞、SU-DHL-10细胞 
JKT1细胞系相关产品：Hi-5细胞、PC3M-1E8细胞、CAL 120细胞 
GM00637I细胞系相关产品：NCIH292细胞、Medical University of Graz-Chordoma 1细胞、HS-940-T细胞 
VMRCRCZ细胞系相关产品：BE(2)-C细胞、SL1细胞、NU-GC-3细胞 
COR-L51 人肺癌细胞系
Hx-147细胞系相关产品：PLB 985细胞、MES-23.5细胞、PG-4细胞 
GC-1细胞系相关产品：Normal Rat Kidney-52E细胞、Hs 695T细胞、GM05372E细胞 
L-WRN细胞系相关产品：LC-1细胞、NCIH1836细胞、CW-2细胞 
University of Arizona Cell Culture-812细胞系相关产品：WEHI 231细胞、HCC-1143细胞、NCIH460细胞 
L cells细胞系相关产品：HMC3细胞、M619细胞、MKN 28细胞 
CMT-167细胞系相关产品：SCLC21H细胞、Hs-578-T细胞、SU8686细胞 
PL9细胞系相关产品：Centre Antoine Lacassagne-78细胞、CAKI1细胞、MDA-MB-231-GFP细胞 
C32r细胞系相关产品：NB19细胞、HEI193细胞、SF763细胞 
TGW细胞系相关产品：Clone Y-1细胞、ARO细胞、RCC-JF细胞 
M-07e细胞系相关产品：KP-2细胞、TGW-nu-1细胞、NCI-H2108细胞 
MOLT.4细胞系相关产品：H295细胞、A2780S细胞、DCS细胞 
COLO206细胞系相关产品：NALM-6-M1细胞、H-II-E-C3细胞、SU-DHL-16细胞 
AK细胞系相关产品：Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z细胞、HGMC细胞、TE-13细胞 
NCIH358细胞系相关产品：NOMO-1细胞、Giant Cell Tumor细胞、COS-1细胞 
HUSMC细胞系相关产品：H-847细胞、Hep G2细胞、COLO 320F细胞 
SF-539 BT细胞系相关产品：SCL1细胞、Liver-02细胞、RMC细胞 
3T3-442A细胞系相关产品：SK-MEL-MeWo细胞、PANC 327细胞、RKO-AS45-1细胞 
SK.OV.3细胞系相关产品：HME1细胞、NUGC2细胞、Emory University-2细胞 
HDQ-P1细胞系相关产品：HCT.116细胞、A-673细胞、HIEC细胞 
FHC细胞系相关产品：HELA-GFP细胞、T-24细胞、S91细胞 
Colon-26细胞系相关产品：LN 382细胞、PM6细胞、COLO 357细胞 
McA-RH8994细胞系相关产品：LAN1细胞、PL-45细胞、Mel624细胞 
NCI-H1693细胞系相关产品：MARC 145细胞、RCK8细胞、Hs888Lu细胞 
KE-39细胞系相关产品：Hs706T细胞、SUP-B1细胞、T47D:A细胞 
T/G HA-VSMC细胞系相关产品：OVCAR-433细胞、PLC/PRF5细胞、NCI-H1563细胞 
AG06814-J细胞系相关产品：BAC1.2F5细胞、Pt K2细胞、LWnt-3A细胞 
SNU-398细胞系相关产品：NOZ细胞、LICR-HN-6细胞、NF639细胞 
AA-Mel细胞系相关产品：SW1463细胞、L 929细胞、HT-1080细胞 
SK-RC 39细胞系相关产品：TE-15细胞、HT1080细胞、NCI.H23细胞 
RPMI-8226细胞系相关产品：Human Epithelioma-2细胞、CCRF-CEM细胞、Turbot Embryonic Cell line细胞 
BC-PAP细胞系相关产品：NMCG-1细胞、QG56细胞、WM 239A细胞 
DH 82细胞系相关产品：A549/DDP细胞、MEG01细胞、IMR 32细胞 
OCIAML4细胞系相关产品：NG10815细胞、A2780/Taxol细胞、3T3 clone A31细胞 
LA795细胞系相关产品：Vero from pool #76细胞、HLF-a细胞、OVCAR-5细胞 
Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞系相关产品：U-87 MG细胞、LAN-1细胞、MeT 5A细胞 
AML-193细胞系相关产品：SNU878细胞、KYSE 30细胞、Kelly细胞 
TOG细胞系相关产品：Human Epidermoid carcinoma #2细胞、H441细胞、CCRF-SB细胞 
MM1-S细胞系相关产品：NR8383细胞、L-M (TK-)细胞、UMRC2细胞 
BCAP37细胞系相关产品：HSCT6细胞、HSC-3细胞、GM00637细胞 
X63Ag8-653细胞系相关产品：HCMEC(BL12-H)细胞、HCCLM3细胞、GNM细胞 
ZR75-30细胞系相关产品：NCI-H1522细胞、SCC VII细胞、HEC1-B细胞 
COR-L51 人肺癌细胞系
LLC-MK2细胞系相关产品：Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5细胞、PC3细胞、L-M (TK-)细胞 
IGROV细胞系相关产品：HCT8细胞、NFHIOSE-80细胞、PA-1细胞 
Calf Pulmonary Artery 47细胞系相关产品：SKRC-20细胞、MKN-74细胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z细胞 
Michigan Cancer Foundation-12F细胞系相关产品：HBL 100细胞、HRCEC细胞、WM-2664细胞 
PNT-1A细胞系相关产品：SV40 MES 13细胞、A9 (Hamprecht)细胞、GMK,BSC-1细胞 
CT26细胞系相关产品：H-EMC-SS细胞、GM03569B细胞、H-526细胞 
H-2023细胞系相关产品：Kelly细胞、NCI-H102细胞、Reh细胞 
PC 61细胞系相关产品：CCF-STTG1细胞、Huh-7细胞、H-524细胞 
QGY-7703细胞系相关产品：FLC7细胞、PFSK1细胞、MDCK2细胞 
BNL CL.2细胞系相关产品：TF1细胞、PG-4 (S+L-)细胞、NCI-H647细胞 
MCF-10 Attached细胞系相关产品：NCIH929细胞、Madin-Darby Canine Kidney细胞、CAMA-1细胞 
SKO3细胞系相关产品：143 B细胞、293 c18细胞、ZR75-30细胞 
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