HCC94 人子宫鳞癌细胞系

"HCC94 人子宫鳞癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
购买细胞注意事项：１)收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系；２)仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等；３)用７５%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次；４)建议客户收到细胞后前３天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和公司技术部沟通交流。【细胞传代操作步骤】一、贴壁细胞传代：１)提前将培养基、PBS放入３７℃水浴锅内预热，用７５%酒精擦拭后再放入超净台内；２)吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞；３)加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，３７℃孵育，每隔２~３min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用；４)用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡；５)将细胞悬液分别接种到另外的２~３个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置３７℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。二、悬浮细胞传代：１)将细胞悬液转移到无菌离心管内，１０００rpm离心５min；２)弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液；３)将细胞悬液分别接种到另外的２~３个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置３７℃温箱培养。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
HCC94 人子宫鳞癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞建议只吹打，不消化）其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
HCC94 人子宫鳞癌细胞系
细胞传代时消化的问题：可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。（以难消化细胞为例）；具体操作：１)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗１-２遍，（这是前奏，即为步，目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。２)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。）３)吸干净瓶内剩余液体，加入０.３ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用，加入新培养基开始吹打，吹打２-３遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用２ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。（你也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比。）这是第三步。４)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，呵呵。继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况你自己把握）。这是第四步。其实还可以有第五步，对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话，你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态，更漂亮的样子，没办法，你必须分多批多次消化，这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低，保证细胞的状态能够。当然了，如果细胞是属于那种很容易消化的细胞，像RAW２６４.７，仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较，去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步，除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外，还有一个更重要的作用就是，可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态，不成片不连体。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
HCMEC(BL12-H)细胞系相关产品：OVCAR10细胞、NCI-H1404细胞、AMO-1细胞 
Tb 1 Lu (NBL-12)细胞系相关产品：VMM-5A细胞、SU-DHL-2细胞、RASMCs细胞 
D562细胞系相关产品：MIA-PaCa-2细胞、HFT8810细胞、SHSY5Y细胞 
PY8119细胞系相关产品：Lu-165细胞、LN382细胞、BC-022细胞 
UPCI:SCC090细胞系相关产品：alpha-TC1.6细胞、HP615细胞、EFM-19细胞 
NCIH446细胞系相关产品：Medical University of Graz-Chordoma 1细胞、Ketr3细胞、HRA 19细胞 
S3-HeLa细胞系相关产品：Hi-five细胞、RPTEC/TERT 1细胞、HNTEC细胞 
1E8-H细胞系相关产品：RPMI 7666细胞、RBSMC细胞、LNCaP细胞 
159 PT细胞系相关产品：T2细胞、H526细胞、HCC1937细胞 
H-1693细胞系相关产品：3 LL细胞、Hs 274细胞、IHH4细胞 
NT2细胞系相关产品：T1-73细胞、C 643细胞、NFHIOSE-80细胞 
T/GHA-VSMC细胞系相关产品：SGC-7901细胞、NCIH441细胞、KOSC2细胞 
ACC-2细胞系相关产品：NCIH226细胞、U373 MG细胞、Pt K1 (NBL-3)细胞 
MDA415细胞系相关产品：H2135细胞、A 375细胞、HPDLF细胞 
Line 207细胞系相关产品：HCC1806细胞、BC-022细胞、U251-MG细胞 
LTEPa2细胞系相关产品：SNU-484细胞、PTK-1细胞、MADB106细胞 
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NCIH2030细胞系相关产品：DoHH-2细胞、RH-30细胞、GP2-293细胞 
MD Anderson-Metastatic Breast-435细胞系相关产品：LNCaP-FGC细胞、HOC-1细胞、CMT-64细胞 
MT-4细胞系相关产品：HPAC细胞、PANC0813细胞、BBE细胞 
HCC94 人子宫鳞癌细胞系
SW-780细胞系相关产品：U-251 MG细胞、Kasumi 1细胞、ID8细胞 
293T细胞系相关产品：CMT-64细胞、HL-60 clone15细胞、SMA560细胞 
NCI-H2122细胞系相关产品：R1610细胞、U-CH1细胞、HFL1细胞 
NCI-HUT-460细胞系相关产品：TR-146细胞、ECV 304细胞、H-1869细胞 
GM17219细胞系相关产品：SUM159细胞、BT483细胞、Hs-852-T细胞 
HFL1细胞系相关产品：MC3T3细胞、COLO-684细胞、SKO-007细胞 
108CC15细胞系相关产品：OAW 42细胞、BHP10-3细胞、RT 112细胞 
IA-LM细胞系相关产品：CCD-19Lu细胞、H2009细胞、H-220细胞 
CT-26细胞系相关产品：Immortal Pig Intestinal-2I细胞、Hs-606-T细胞、A2780/Taxol细胞 
NCI-H125细胞系相关产品：J82COT细胞、SKMEL28细胞、HT144-mel细胞 
MN 60细胞系相关产品：NCI-H719细胞、639-V细胞、MZCRC1细胞 
P388.D1细胞系相关产品：SKHEP1细胞、BT 549细胞、U-87MG ATCC细胞 
MDCK-II细胞系相关产品：C-Lu-65细胞、MN-60细胞、HCC94细胞 
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H-676细胞系相关产品：X63-Ag 8.6.5.3细胞、Hs742T细胞、H1238细胞 
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U118MG细胞系相关产品：NCI-H2141细胞、TCCSUP细胞、SNU-878细胞 
OCUM-1细胞系相关产品：MDA-MB-157细胞、NCI-H1666细胞、HEK (AD293)细胞 
McG-1细胞系相关产品：Y3.AG.1.2.3细胞、HPDEC细胞、ECV-304细胞 
LCLC103H细胞系相关产品：CHO-S细胞、OAC-P4C细胞、MDA-MB-134细胞 
NFHIOSE-80细胞系相关产品：Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1细胞、RBL2H3细胞、COLO394细胞 
SCC-25细胞系相关产品：ZR75-1细胞、HUT 28细胞、RPMI #1846细胞 
HGC-27细胞系相关产品：FLS细胞、H510细胞、Roswell Park Memorial Institute 7951细胞 
OCILY-3细胞系相关产品：Hs 888Lu细胞、Walker/LLC-WRC256细胞、P3X63 Ag8.653细胞 
CHO-Lec1细胞系相关产品：H1963细胞、H4-II-EC3细胞、A2780CP细胞 
JB6 [Mouse]细胞系相关产品：NRK49F细胞、CL1-5细胞、ST-2细胞 
4175细胞系相关产品：OVCAR433细胞、MDCK II细胞、Human Melanoma Cell Bowes细胞 
SUM-52细胞系相关产品：AG 9细胞、B16/F0细胞、HCC 2185细胞 
COLO 206F细胞系相关产品：PLA 802细胞、CCD 966 SK细胞、Hi-five细胞 
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SK-Hep1细胞系相关产品：Hepatoma 22细胞、YH细胞、Mink Lung细胞 
GM15452细胞系相关产品：Hs 343.T细胞、Human Hepatocyte Line 5细胞、COLO 320细胞 
FRTL 5细胞系相关产品：RAW264细胞、OCI/AML-5细胞、NS1-Ag 4/1细胞 
T9细胞系相关产品：PLA801D细胞、CWR22-R1细胞、NCIH250细胞 
HOS细胞系相关产品：S16细胞、COLO680N细胞、MIA-PaCa-2细胞 
SKGT4细胞系相关产品：BEND细胞、HCC15细胞、CCRF SB细胞 
GBCSD细胞系相关产品：Vx2细胞、IGROV细胞、Hs 274.T细胞 
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NBL-12细胞系相关产品：PT-K75细胞、GM-637细胞、WI 38细胞 
SUP-B15细胞系相关产品：NK-92.05细胞、PC-3M 2B4细胞、Hs 742.T细胞 
PANC 1005细胞系相关产品：BEP2D细胞、Psi-2-DAP细胞、JVM-3细胞 
Colon 38细胞系相关产品：SKMEL-31细胞、Ls-174-T细胞、SkMel31细胞 
MXI细胞系相关产品：Earles's cells细胞、HET-1A细胞、HepG2-luc细胞 
JEG3细胞系相关产品：L428细胞、CCRF-CEM C1细胞、HuO9细胞 
NCIH2023细胞系相关产品：CHP 100细胞、COLO 206细胞、Glioma-261细胞 
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SEM细胞系相关产品：LTEP-a2细胞、OC-3-VGH细胞、WM115细胞 
TR146细胞系相关产品：NK-92 transfected with MFG-hIL2细胞、H1623细胞、Kasumi-1细胞 
TE85细胞系相关产品：tdott细胞、DH82细胞、TMK-1细胞 
D562细胞系相关产品：MIA-PaCa-2细胞、HEL-92细胞、hA549细胞 
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