LA-N-6 人神经母细胞系

"LA-N-6 人神经母细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】１)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前１d换液；２)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达５×１０／ml左右密度，离心，去上清；３)加入配制好的冻存液(培养液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂１０％二甲基亚砜(DMSO)或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；４)分装于无菌冻存管中，每管加１.５m悬液；５)旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做好标记；６)冻存：在特殊的仪器或简易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min时间内，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞】１)从罐中取出冻存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不时摇动，使其急速融化，３０～６０s内完成；３)冻存管用７０％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加１０ml培养液；４)低速离心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培养液洗一次；５)用培养液适当稀释后，装入培养瓶３７℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到１０／ml，在融后稀释２０倍时，仍能保持５×１０／ml数量。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
LA-N-6 人神经母细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可。吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足够消化细胞。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后37℃消化。比较难消化的细胞（润洗方法5min还不能消化），这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育。不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性。如果和标准形态不一致，那可能是自己没消化好导致的，但如果消化方法正确，仍然成片分布，甚至完全吹打成单细胞悬液，贴壁后仍然成片分布，这是细胞的特性，是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布，你的细胞之后会对你越来越不好。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
LA-N-6 人神经母细胞系
细胞培养相关问题总结：冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后，须立即放入３７°C水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在１分钟内全部融化，并注意水面不可超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管之爆裂；细胞冷冻管解冻培养时，是否应马上去除DMSO？除少数特别注明对DMSO敏感之细胞外，绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞），在解冻之后，应直接放入含有１０-１５ml新鲜培养基之培养角瓶中，待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可，如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题；可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活；培养细胞时应使用５%或１０%CO２？或根本没有影响？一般培养基中大都使用HCO３-/CO３２-/H+作为pH的缓冲系统，而培养基中NaHCO３的含量将决定细胞培养时应使用的CO２浓度。当培养基中NaHCO３含量为每公升３.７g时，细胞培养时应使用１０%CO２；当培养基中NaHCO３为每公升１.５g时，则应使用５%CO２培养细胞。何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上之更换时间，按时更换培养基即可。培养基中是否须添加抗生素？除于特殊筛选系统中外，一般正常培养状态下，培养基中不应添加任何抗生素。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
SUM-149PT细胞系相关产品：AU 565细胞、LIM 1215细胞、HEYA8细胞 
OK-WT细胞系相关产品：BBE细胞、AML-193细胞、PLA-801C细胞 
OVCAR.3细胞系相关产品：Vero C1008细胞、SKNEP1细胞、Madin Darby Canine Kidney细胞 
HCC-1171细胞系相关产品：MCF-10A细胞、LNCaP.FGC细胞、FDC-P1细胞 
NCIH209细胞系相关产品：LA-N-5细胞、Capan 1细胞、VE细胞 
H69/P细胞系相关产品：Mo 59J细胞、SNU-1040细胞、HFT-8810细胞 
H378细胞系相关产品：McA-RH 8994细胞、H-929细胞、293H细胞 
A 253细胞系相关产品：P31 FUJ细胞、HFLS-RA细胞、FOXNY细胞 
G519细胞系相关产品：NCI H747细胞、OVCAR-432细胞、GTL 16细胞 
BMSC/hBMSCs细胞系相关产品：NCI-SNU-398细胞、H-820细胞、251MG细胞 
H-1155细胞系相关产品：143BTK-细胞、LN 229细胞、hADSCs细胞 
CWR22-R1细胞系相关产品：Bat lung细胞、MCF-7B细胞、LS-411细胞 
MHCC 97细胞系相关产品：LL2细胞、EL-4细胞、MDA-kb2细胞 
751-NA细胞系相关产品：EFO27细胞、HeLa.S3细胞、138MG细胞 
SU86.86细胞系相关产品：NT2D1细胞、BIC细胞、H-1435细胞 
Normal Rat Kidney-49F细胞系相关产品：A-172MG细胞、Tu177细胞、HCC-1419细胞 
Normal Rat Kidney-49F细胞系相关产品：A-172MG细胞、Tu177细胞、HCC-1419细胞 
EBTr细胞系相关产品：RWPE2细胞、SNU869细胞、TSU-Pr1细胞 
H69细胞系相关产品：KYSE-50细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞、PG [Human lung carcinoma]细胞 
NCIH1623细胞系相关产品：MRC5细胞、PLA801-95D细胞、HRA19细胞 
LA-N-6 人神经母细胞系
Mono Mac 6细胞系相关产品：CCD-841CoN细胞、Walker-Ca.256细胞、Hs 578Bst细胞 
Tj-905细胞系相关产品：GH 3细胞、COLO678细胞、mousepodocyte细胞 
LOU-NH-91细胞系相关产品：MCF-7/AdrR细胞、SUP-M2细胞、C-33-A细胞 
SCLC21H细胞系相关产品：OCM-1A细胞、Balb/c3T3细胞、MDA-MB-231 #4175细胞 
H4-II-EC3细胞系相关产品：SUM-190细胞、SKRC-20细胞、T241细胞 
MDA-MB453细胞系相关产品：CCD966SK细胞、NCI-H1734细胞、NCIH2135细胞 
Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞系相关产品：U-87 MG细胞、LAN-1细胞、MeT 5A细胞 
NCI-H2286细胞系相关产品：SBC-5细胞、OVCAR.4细胞、NTera2/D1细胞 
SKGT2细胞系相关产品：Hs 895 T细胞、SK LU 1细胞、TE 32细胞 
SaOS细胞系相关产品：EA.Hy926细胞、RPMI #8226细胞、CWR22R-V1细胞 
H-1623细胞系相关产品：HOP-92细胞、Caki-2细胞、MFM-223细胞 
IPEC-1细胞系相关产品：P3 (Jiyoye)细胞、CCRF/CEM/0细胞、SKNO1细胞 
MuM-2C细胞系相关产品：Hs688(A)T细胞、Calu6细胞、OV2008细胞 
NCIH1781细胞系相关产品：Jijoye细胞、NRK52E细胞、Sarcoma OSteogenic-2细胞 
343 MG细胞系相关产品：SUD6细胞、alpha-TC1.6细胞、H-747细胞 
SU-DHL-4细胞系相关产品：NCI-522细胞、SW 579细胞、NIHOVCAR3细胞 
Co 115细胞系相关产品：COLO829细胞、JHH7细胞、NCIH1688细胞 
COLO-684细胞系相关产品：DMS 273细胞、NCI-SNU-668细胞、Hs852细胞 
HPMEC细胞系相关产品：Hela-mock细胞、GEO细胞、FAK+/+细胞 
HT 29细胞系相关产品：TM4细胞、G361-mel细胞、SRA01/04 (HLE)细胞 
ATN1细胞系相关产品：NOR 10细胞、GM-215细胞、H-727细胞 
BT 549细胞系相关产品：DU4475细胞、HS-729细胞、Mouse podocyte细胞 
H157细胞系相关产品：CCRF-CEM C1细胞、NCIH1048细胞、NCIH841细胞 
NCI-H1404细胞系相关产品：THP-1细胞、159PT细胞、XWLC-05细胞 
RPMI7666细胞系相关产品：MFD-1细胞、EFM192C细胞、Panc_05_04细胞 
CCD 19Lu细胞系相关产品：TE 671细胞、HCC1569细胞、H2198细胞 
G292细胞系相关产品：Nb 2细胞、HS940细胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate细胞 
DCS细胞系相关产品：GM16136细胞、KMS-26细胞、DU_145细胞 
BBE细胞系相关产品：Kupffer细胞、Y1细胞、HuCCT-1细胞 
LPC-H12细胞系相关产品：SK-RC 42细胞、MCF7/WT细胞、Kuramochi细胞 
hTERTHME1细胞系相关产品：SK-MEL-3细胞、PaCa2细胞、LY-R细胞 
SKO-007细胞系相关产品：HCC1833细胞、NBL-5细胞、HKBML细胞 
SK HEP-1细胞系相关产品：HEK-293-H细胞、HTR8细胞、HTori 3细胞 
OSC-19细胞系相关产品：BE2_C细胞、MDA 1386细胞、CL 1-0细胞 
N1E-115细胞系相关产品：87MG细胞、MDA-MB-175-VII细胞、AML193细胞 
CCC-HPF-1细胞系相关产品：rHSC-99细胞、COLO-205细胞、U138-MG细胞 
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MC-3T3-E1细胞系相关产品：NUGC-4细胞、Mo 59J细胞、NCI-SNU-182细胞 
SO-Rb 50细胞系相关产品：293/EBNA细胞、H-1385细胞、RASMC细胞 
HCV-29细胞系相关产品：E.L.4细胞、NCI-H-295细胞、Hmy.2 CIR细胞 
NCIH1623细胞系相关产品：MRC5细胞、PLA801-95D细胞、HRA19细胞 
LA-N-6 人神经母细胞系
SUDHL-16细胞系相关产品：F-81细胞、Porcine Kidney-13细胞、NCIH1781细胞 
NCI-H2228细胞系相关产品：HEM细胞、CaES-17细胞、Jiyoye(P-2003)细胞 
GM16136细胞系相关产品：RGM1细胞、MUS-M1细胞、C3H10T1-2细胞 
IEC6细胞系相关产品：HEK 293-EBNA细胞、COR-L23细胞、ME-180细胞 
ME-1 [Human leukemia]细胞系相关产品：Murine Thymic Epithelial Cell line 1细胞、U373MG细胞、NCIH2591细胞 
Hs888Lu细胞系相关产品：COLO 829细胞、Y79细胞、SUM52PE细胞 
HO-1-N-1细胞系相关产品：PGLH7细胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2细胞、HUSMC细胞 
NCI-SNU-1040细胞系相关产品：DHL-2细胞、NIE 115细胞、H-1417细胞 
HSF2细胞系相关产品：ssMCF-7细胞、Homo sapiens No. 578, breast cells细胞、NCI-H2196细胞 
Pt-K1细胞系相关产品：HCC0070细胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1细胞、LA795细胞 
MDCC-MSB1细胞系相关产品：GA10细胞、SK-RC 42细胞、Sup T-1细胞 
OVCAR.3细胞系相关产品：Vero C1008细胞、190PT细胞、MCF/Adr细胞 
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