CFSC-8B 大鼠肝星形细胞系

"CFSC-8B 大鼠肝星形细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】１)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前１d换液；２)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达５×１０／ml左右密度，离心，去上清；３)加入配制好的冻存液(培养液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂１０％二甲基亚砜(DMSO)或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；４)分装于无菌冻存管中，每管加１.５m悬液；５)旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做好标记；６)冻存：在特殊的仪器或简易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min时间内，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞】１)从罐中取出冻存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不时摇动，使其急速融化，３０～６０s内完成；３)冻存管用７０％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加１０ml培养液；４)低速离心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培养液洗一次；５)用培养液适当稀释后，装入培养瓶３７℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到１０／ml，在融后稀释２０倍时，仍能保持５×１０／ml数量。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
CFSC-8B 大鼠肝星形细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
CFSC-8B 大鼠肝星形细胞系
如何把细胞养的形态更好更漂亮。１.不同的细胞，喜欢的环境是不一样的。这个不仅仅是说培养基的不同，还有就是细胞生长的空间密度问题。有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。２.对于有些人总是会遇到养的细胞形态怎么都不好的问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入３ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入３ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞我们只吹打，不消化的）；其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。１０分钟观察一次，２０分钟，３０分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入３ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。我称之为“二传”。呵呵。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞完美形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。３.关于培养瓶内加入培养基的量的问题。这个是要靠自己去摸索你所养的细胞的。并不是小的玻璃方瓶１２ml，大方瓶１４ml的。有些细胞反而是培养基少一点相反细胞形态会长得比较好。（可能也是竞争很大，有优胜劣汰吧。呵呵。）对于生长速度快的细胞，易生长的细胞加少一点培养基细胞形态会更好。但是要注意换液掌握。４.关于选择培养瓶的问题。个人发现生长速度快的细胞在玻璃瓶内生长的状态会比一次性相对好一些。而对于同一种细胞，在其生长旺盛快速的时期在玻璃瓶内的生长状态也比内好。这可能是因为比玻璃瓶更容易贴壁。生长速度快的细胞在这种相对“更安逸”的环境里反而长得状态不如玻璃瓶好。所以对于生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态，比玻璃瓶会好，对于生长速度慢的细胞，玻璃瓶则会更好。同样，对于同一种细胞，在其生长速度慢的时候，会好一点，比如刚刚复苏的时候，或者原代培养的时候。而在其生长旺盛的时候，玻璃瓶则相对会好一点。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
MN60细胞系相关产品：COLO-679细胞、VMRCRCZ细胞、WISH细胞 
NIE-115细胞系相关产品：MRASMC细胞、Hs852细胞、L5178Y细胞 
Panc203细胞系相关产品：SCH细胞、HCASMC细胞、Human podocyte细胞 
ST486细胞系相关产品：GalK1细胞、BNCL-2细胞、CHP100细胞 
MDAMB436细胞系相关产品：SW-1990细胞、UMR-106细胞、SJRH-30细胞 
SK.MEL.2细胞系相关产品：Strain KB细胞、NIH-3T3-L1细胞、95-D细胞 
PaTu 8988s细胞系相关产品：22Rv1细胞、HK2细胞、NCTC 929细胞 
Walker/LLC-WRC 256细胞系相关产品：GM05384细胞、Panc8.13细胞、HCT 8细胞 
NCI.H23细胞系相关产品：KYSE450细胞、751细胞、AG06814-J细胞 
MC-4细胞系相关产品：SUIT2细胞、PTK-2细胞、CAL-85-1细胞 
RCF细胞系相关产品：HA细胞、Malme-3 M细胞、MRASMC细胞 
UT-7细胞系相关产品：HCCC-9810细胞、Panc_04_03细胞、FL62891细胞 
KBM-5细胞系相关产品：BPH-1细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1细胞、Oregon J-111细胞 
HCC-94细胞系相关产品：RPE D407细胞、8226/S细胞、H2081细胞 
LLC1细胞系相关产品：JHH-7细胞、MDA-MB435细胞、JROECL33细胞 
SKRC20细胞系相关产品：C32 mel细胞、SV40-HCEC细胞、CCD-112CoN细胞 
MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞系相关产品：Ketr-3细胞、HAPI细胞、C-6细胞 
P388D1细胞系相关产品：MCF7ADR细胞、LTEP-sm细胞、HCC-70细胞 
MyLa 2059细胞系相关产品：B16 melanoma细胞、KYSE 520细胞、mRTEC细胞 
5-8F细胞系相关产品：Hs852细胞、TE1细胞、NCI-H1417细胞 
CFSC-8B 大鼠肝星形细胞系
CMT 64细胞系相关产品：TGBC11T细胞、M20 [Human melanoma]细胞、NEC8细胞 
Mv1Lu细胞系相关产品：P3X63-Ag8.653细胞、KU-812细胞、BIU-87细胞 
6T-CEM细胞系相关产品：SNU-449细胞、MALME 3M细胞、Cattle chondrocytes细胞 
hADSCs细胞系相关产品：CLONE M3细胞、MESSA Dx5细胞、J82COT细胞 
PLC8024细胞系相关产品：LS-174T细胞、KYSE30细胞、Panc3_27细胞 
RMC细胞系相关产品：NBL-2细胞、NCI-H1355细胞、Hs343T细胞 
CCD-112CoN细胞系相关产品：PC-3M 2B4细胞、EHEB细胞、RPMI 8402细胞 
KU 19-19细胞系相关产品：Bovine Turbinate细胞、NCIH2141细胞、Caco-2BBe细胞 
SK-NSH细胞系相关产品：COV-362细胞、HCC 38细胞、C4-1细胞 
HBdSMC细胞系相关产品：SUM 52细胞、IHH细胞、H526细胞 
Caco-2 BBe细胞系相关产品：RPMI 6666细胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a细胞、Colo-678细胞 
J-774A.1细胞系相关产品：CEM-CCRF细胞、OCI-Ly 19细胞、PC12(高分化)细胞 
SKBr3细胞系相关产品：Hs-281-T细胞、HFTF细胞、OAW 42细胞 
MDA MB 361细胞系相关产品：H3255_DA细胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1细胞、HFF-1细胞 
BEL 7405细胞系相关产品：NCI-H128细胞、D-341细胞、IOSE80UBC细胞 
S-16细胞系相关产品：Hs578Bst细胞、Vero 76 clone E-6细胞、QGY 7701细胞 
Oregon J-111细胞系相关产品：RGC6细胞、hTERT-HME1细胞、ARIP细胞 
MDA-MB-134VI细胞系相关产品：OCI-AML3细胞、LM-TK-细胞、NCI-H2087细胞 
CNE2Z细胞系相关产品：LOU-NH-91细胞、COS-1细胞、CNE细胞 
K562细胞系相关产品：SUM52细胞、LWnt-3A细胞、EO771细胞 
Hs 636 T细胞系相关产品：SNG-M细胞、Hs.27细胞、A-101D细胞 
SU-DHL-16细胞系相关产品：RH8994细胞、NPC-TW 01细胞、H184A1细胞 
Panc04.03细胞系相关产品：NK92细胞、NF639细胞、Rabbit Kidney 13细胞 
V79-1细胞系相关产品：MM96L细胞、Capan1细胞、HEY-A8细胞 
T-24细胞系相关产品：SK-ML2细胞、Walker 256细胞、BL-6细胞 
U138MG细胞系相关产品：HT3细胞、Y3.AG.1.2.3细胞、MSTO-211 H细胞 
HCa/16A3-F细胞系相关产品：SHEP1细胞、CCK-81细胞、RA.1细胞 
WISH细胞系相关产品：OLN 93细胞、OVCA433细胞、SW-1116细胞 
PK-136细胞系相关产品：NCI-H1876细胞、NCI-H295细胞、DHL-8细胞 
BNL-CL.2细胞系相关产品：NW-MEL-38细胞、HSF细胞、P31-FUJ细胞 
HEL 299细胞系相关产品：H2085细胞、MM.1S细胞、L-5178-Y细胞 
Hk-2细胞系相关产品：B5537SKIN细胞、BT20细胞、PC-10细胞 
HOPC细胞系相关产品：UACC-893细胞、Normal Rat Kidney细胞、H209细胞 
PLA 802细胞系相关产品：MCF-7ADR细胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1细胞、MGH-UI细胞 
E.G7-OVA细胞系相关产品：EOC20细胞、CAKI 1细胞、AD-293细胞 
MMAc.SF细胞系相关产品：PIEC细胞、NCIH2452细胞、CDC/EU.HMEC-1细胞 
MMAc.SF细胞系相关产品：PIEC细胞、NCIH2452细胞、CDC/EU.HMEC-1细胞 
C 6细胞系相关产品：3T3-L1细胞、NT2D1细胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1细胞 
HCC1359细胞系相关产品：SU-DHL2细胞、MC3T3-E1 Subclone 24细胞、LL/2 (LLC1)细胞 
NCI-SNU-119细胞系相关产品：NRK clone 49F细胞、MDAMB134细胞、H-2172细胞 
KRC-Y细胞系相关产品：Human Foreskin Fibroblast细胞、EAC细胞、Y3M细胞 
CFSC-8B 大鼠肝星形细胞系
MV4;11细胞系相关产品：Transformed Human Liver Epithelial-2细胞、LICR-HN6细胞、PA1细胞 
KLM-1细胞系相关产品：RPE1细胞、KALS1细胞、MEL细胞 
HTh-74细胞系相关产品：Mel-MeWo细胞、HSC-I细胞、YD-15细胞 
WTRL1细胞系相关产品：AAV-293细胞、H-920细胞、DanG细胞 
SW480E细胞系相关产品：MDA-361细胞、NCI-H650细胞、SU-DH-L5细胞 
KP-N-YN细胞系相关产品：SW-954细胞、Bovine ENDometrial cells细胞、COV504细胞 
Panc813细胞系相关产品：Vero-E6细胞、HPB-ALL细胞、SuDHL 2细胞 
TR146细胞系相关产品：NK-92 transfected with MFG-hIL2细胞、T98 G细胞、TF-1细胞 
OV 1063细胞系相关产品：Pt K2 (NBL-5)细胞、B6Tert-1细胞、RL细胞 
JTC-28细胞系相关产品：G 292 Clone A 141B1细胞、Human Embryonic Skin细胞、NB9细胞 
H-23细胞系相关产品：L 363细胞、CEM-C1细胞、THP-1细胞 
Panc203细胞系相关产品：SCH细胞、C4-2B细胞、Anip 973细胞 
"