L-02 人肝细胞系

"L-02 人肝细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞培养实验基本操作：①进无菌室前要彻底洗手，按规定穿隔离衣。开始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。②操作者动作要轻，安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意，金属器械不能在火焰中长时间烧灼，以防退火；烧过的器械要冷却后才能使用；已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼，因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质，吸管再用时会将其带到培养液中；胶塞、橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养细胞，同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用。③使用培养液前不宜过早开瓶，开瓶后的培养液应保持斜位，避免直立，以防止下落细菌的污染。不再使用的培养液应立即封闭瓶口，培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中。④操作时尽量不要谈话，咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染。⑤吸取培养液、细胞悬液时，应专管专用，一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去，以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染。⑥操作完毕后应整理好工作台面，用消毒水浸泡的纱布擦拭台面；防止细胞交叉污染：所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备，一旦怀疑发生交叉污染，可做细胞遗传学方面的鉴定，如发现原有的细胞遗传物发生改变，可以复苏早期冻存的细胞使用。重要细胞系的传代工作应由两人独立进行；无菌室的彻底消毒①新洁尔灭全面彻底擦洗无菌室。使用前应稀释即配即用。新洁尔灭和酒精相比，的优点是便宜，而且可以稀释５０倍用，而同样量的酒精价格可能是新洁尔灭的几十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一种广谱灭菌剂菌，其水溶液和气体对各种细菌、芽孢及真菌等微生物均有杀灭作用。甲醛价廉，熏蒸消毒时不损坏衣服、家具、皮革、橡胶等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
L-02 人肝细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
我们都知道世界宇宙浩瀚无极，除了我们知道的地球、太阳、月球、银河系以外还有好多其他宇宙行星，这样的世界对于很多人来说很陌生稀奇甚至无法想象，这样的世界同样也是我们无法触摸的，然而还有一个微观的世界也是我们无法接触的，这个就是——细胞里的微观世界。对于很多人来说，除了从书本上简单了解植物细胞的知识以外，在行业外人的意识里，细胞还是一个让人一头雾水的词语，甚至都是一个无形的存在，更别提描述和看见这个东西，但是对于行业内的生物科学研究者和医学研究者，这是个经常被运用到的必需之物，用宇宙世界的包含于被包含的关系把细胞的微观世界剖析开来，让我们了解到细胞是什么样的东西及应用和未来世界细胞在生命中的重要作用。细胞发炎——心脏疾病；DNA受损——癌症；细胞能量衰退——肾功能衰竭、关节炎、帕金森氏；老化蛋白堆积——糖尿病、痴呆症、心脑血管疾病；所有的衰老和疾病都是机体内细胞开的损伤、衰老和死亡造成的。所以细胞在科学研究和医学研究中有着重要的应用作用，尤其是原代细胞，它是从机体组织中分离提取培养，它可以作为一种科研材料帮助研究者进行项目研究和课题研究，也可以帮助医学者进行疾病研究和疾病试验，试想从人体组织中分离培养的细胞经过医学药物的试验再运用到人体身上，无论从功效还是结果上效果都是。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
L-02 人肝细胞系
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞（绝大部分１min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-３细胞），吹打不超过２０次后（一般１０次即可），成小规模聚集（１０个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法５min还不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
HS-68细胞系相关产品：HCC-1438细胞、CCD-112 CoN细胞、ChaGo-K-1细胞 
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6细胞系相关产品：Tsup-1细胞、P3X63Ag8细胞、HTori-3.1细胞 
HRIF细胞系相关产品：CV-1细胞、Madin-Darby Bovine Kidney细胞、MCF-10A细胞 
B16细胞系相关产品：Panc-08.13细胞、CCD33Co细胞、Panc-8_13细胞 
OE-33细胞系相关产品：MEC1细胞、Hs 934.T细胞、KM12 SM细胞 
NP69细胞系相关产品：H-2023细胞、LM(TK-)细胞、NCI-H1573细胞 
HRCEC细胞系相关产品：Calu3细胞、McArdle RH-7777细胞、OCI-Ly 10细胞 
DoTc2-4510细胞系相关产品：MS-751细胞、RPMI no. 8226细胞、SG231细胞 
33604细胞系相关产品：KMS-18细胞、H-711细胞、U118细胞 
NUGC2细胞系相关产品：SuDHL 1细胞、GM05887A细胞、P3/X63/Ag8.653细胞 
HCC78细胞系相关产品：SK-N-SH细胞、SK-MEL2细胞、SW-837细胞 
RL-952细胞系相关产品：B16细胞、BEND细胞、TE3A细胞 
EoL-1细胞系相关产品：MEG-01细胞、U-138-MG细胞、C-Li-7细胞 
GM04679细胞系相关产品：HEK-2细胞、CO115细胞、SK-RC-42细胞 
253JBV细胞系相关产品：BT549细胞、Hs 578.T细胞、BJ [Human fibroblast]细胞 
TGBC11T细胞系相关产品：Co 205细胞、CLONE M3细胞、CMT167细胞 
HME-1细胞系相关产品：ACT-1细胞、GM02219C细胞、MIHA细胞 
SU-DHL-8细胞系相关产品：CII细胞、HMrSV5细胞、MCA38细胞 
NCIH1155细胞系相关产品：LS 1034细胞、IEC18细胞、Opossum Kidney细胞 
H2122细胞系相关产品：HTR-8/SV-neo细胞、H2023细胞、RMa-bm细胞 
L-02 人肝细胞系
MDA436细胞系相关产品：UMR106细胞、HCE-T细胞、Anip 973细胞 
NIE 115细胞系相关产品：B16-F10-BL6细胞、Bac1 2F5细胞、NCIH1395细胞 
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1细胞系相关产品：A 375细胞、RLE-6TN细胞、NCM-460细胞 
OV-90细胞系相关产品：P3JHR-1细胞、RK-13细胞、OK-WT细胞 
U-343MG细胞系相关产品：NCI-SNU-601细胞、SW480E细胞、DB细胞 
UMR 106细胞系相关产品：SW 1990细胞、BSC1细胞、PC-3M-IE8细胞 
MOLT-3细胞系相关产品：HKBML细胞、NE1-E6E7细胞、BEL-7402细胞 
PL-11细胞系相关产品：PA1细胞、RINm-5F细胞、B 95.8细胞 
Hs 578T细胞系相关产品：SK-N-AS细胞、F98细胞、WM 239-A细胞 
P3/ag细胞系相关产品：HECCL-1细胞、NCI-HUT-292细胞、B-cell with DC Morphology细胞 
P-19细胞系相关产品：HPAF/CD18细胞、184A1细胞、Spodoptera frugiperda clone 9细胞 
H-1975细胞系相关产品：SK-MEL-28细胞、U-343-MG细胞、PT67细胞 
HT-144细胞系相关产品：RMC-1细胞、SU-DH-L5细胞、Line 522细胞 
TYK-nu细胞系相关产品：SEG-1细胞、Mv 1 Lu (NBL-7)细胞、HTSMC细胞 
T-ALL 1细胞系相关产品：ZR75-30细胞、NUGC-3细胞、OCI-Ly 19细胞 
D-341细胞系相关产品：NHA细胞、COLO684细胞、BE2-M17细胞 
SW480E细胞系相关产品：MDA-361细胞、NCI-H650细胞、SU-DH-L5细胞 
NB.4细胞系相关产品：FHL 124细胞、OV-90细胞、FDCP1细胞 
H647ell细胞系相关产品：SMMC-7721细胞、C3H10T1/2细胞、OCIAML4细胞 
NTC200细胞系相关产品：SUPB15细胞、SK-ES细胞、P815细胞 
SV-HUC-1细胞系相关产品：Neuro 2a细胞、NCI-UMC-11细胞、NCI-SNU-475细胞 
SK-MES细胞系相关产品：624-mel细胞、BBE细胞、MPP 89细胞 
Hs 729.T细胞系相关产品：H-820细胞、KYSE-50细胞、WM115mel细胞 
NCI-H1417细胞系相关产品：KTCTL-140细胞、SNU-620细胞、HuT78细胞 
NCIH1623细胞系相关产品：MRC5细胞、PLA801-95D细胞、HRA19细胞 
Hs821T细胞系相关产品：ATC241细胞、HCC2279细胞、MZ-CRC-1细胞 
NCI-H520细胞系相关产品：Hs888T细胞、DC2.4细胞、HIEC-6细胞 
JURKAT E-61细胞系相关产品：MT-4细胞、WM-2664细胞、HNEpC细胞 
Hs-675-T细胞系相关产品：HO8910细胞、C4 I细胞、RPMI-8226S细胞 
TE-6细胞系相关产品：SK MEL 28细胞、MFC细胞、REC-1细胞 
KNS-62细胞系相关产品：UMNSAH-DF-1细胞、SK-N-BE(2)细胞、MNNG/HOS细胞 
HCC-15细胞系相关产品：MRMT-1细胞、Swiss 3T3细胞、OCI-Ly1细胞 
OKAC1细胞系相关产品：P3JHR1细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞、MC57细胞 
M-14细胞系相关产品：SW626细胞、NIH 3T6细胞、BNL-CL.2细胞 
NCI-H2135细胞系相关产品：DV90细胞、TGBC11T细胞、ISHI细胞 
KOPN8细胞系相关产品：HCC 94细胞、OE-19细胞、BS-C-1细胞 
Lu-99A细胞系相关产品：P3X63 Ag8细胞、HPAF II细胞、CHO K1细胞 
OVHM细胞系相关产品：MV-522细胞、NCIH1963细胞、H9c2(2-1)细胞 
Y3-Ag1.2.3细胞系相关产品：HuH1细胞、NBL-1细胞、ETCC007细胞 
OV-2008细胞系相关产品：IPAM-WT细胞、MHCCLM3细胞、R1610细胞 
SK-N-BE细胞系相关产品：ROS 17/2.8细胞、CCD841CoN细胞、KYSE-410细胞 
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D341 Med细胞系相关产品：A172细胞、ZR-75-30细胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).细胞 
HEK AD293细胞系相关产品：P3-X63.Ag8.653细胞、C918细胞、SF-767细胞 
PLB985细胞系相关产品：Pro-5WgaRI3C细胞、P30-OHKUBO细胞、Panc-05.04细胞 
INS1细胞系相关产品：OVCAR-8细胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)细胞、MRCV细胞 
H2108细胞系相关产品：MES-13细胞、H-2405细胞、NCIH69细胞 
PANC.1细胞系相关产品：HEK293T/17细胞、Kupffer细胞、SCC 9细胞 
NCI-H82细胞系相关产品：VSC4.1细胞、PT67细胞、H2108细胞 
Rat1细胞系相关产品：INS-1细胞、HPaSteC(HPSC)细胞、SW 780细胞 
MDA330细胞系相关产品：Pt K2细胞、PG [Human lung carcinoma]细胞、ROS-17/2.8细胞 
J-774细胞系相关产品：IMR 90细胞、ACC3细胞、SUIT-2细胞 
P3 NS1 Ag4/1细胞系相关产品：OLN93细胞、HCC-95细胞、MES13细胞 
HRGEC细胞系相关产品：OCI-LY-18细胞、MDA-231细胞、TCam-2细胞 
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