RC-4B/C 人垂体瘤细胞系

"RC-4B/C 人垂体瘤细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞培养方面注意的几点：无菌意识要强：实验进行前，超净台以紫外灯照射３０分钟灭菌，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启超净工作台风扇运转数分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置，其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以７０%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域，一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约４５°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基：不同的细胞可能培养基不同，甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞，有文献就选用neurobase培养基，而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而这种培养基中含有抗氧化剂成分，此时，我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:４℃冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指５６℃，３０分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到５６℃后，将血清放入，待温度升高到５６℃后计时，一般５分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须，一般不要作此热处理，因为会造成沉淀物之显著增多，且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
RC-4B/C 人垂体瘤细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可。吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足够消化细胞。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后37℃消化。比较难消化的细胞（润洗方法5min还不能消化），这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育。不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性。如果和标准形态不一致，那可能是自己没消化好导致的，但如果消化方法正确，仍然成片分布，甚至完全吹打成单细胞悬液，贴壁后仍然成片分布，这是细胞的特性，是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布，你的细胞之后会对你越来越不好。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
RC-4B/C 人垂体瘤细胞系
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞（绝大部分１min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-３细胞），吹打不超过２０次后（一般１０次即可），成小规模聚集（１０个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法５min还不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
B16F1细胞系相关产品：870细胞、IPLB-Sf21细胞、BALB/3T3 cl. A31细胞 
SN12-PM6细胞系相关产品：Panc08.13细胞、CNE-1细胞、108CC15细胞 
UMNSAH/DF-1细胞系相关产品：NCM-460细胞、NCIH1666细胞、H-1993细胞 
BL6细胞系相关产品：UO-31细胞、MC-38细胞、NIH:OVCAR-8细胞 
3T3-F442A细胞系相关产品：rRTEC细胞、SK-LU-1细胞、Panc 05.04细胞 
MDA-468细胞系相关产品：HOC-1细胞、SO-Rb 50细胞、TCCPAN2细胞 
SUM-159细胞系相关产品：NCI-H1341细胞、HS5细胞、JurkatE6-1细胞 
HuPT3细胞系相关产品：LU165细胞、624-mel细胞、COLO-738细胞 
Nthy-ori 3.1细胞系相关产品：CL 1-5细胞、LLC-PK(1)细胞、IPEC1细胞 
RT-BM细胞系相关产品：DHL6细胞、H-740细胞、OKAC1细胞 
HeLa/DDP细胞系相关产品：COLO 320细胞、KATO 3细胞、L-6 myoblast细胞 
MB231细胞系相关产品：MKN 45细胞、KNS-81细胞、NRK 49F细胞 
SHSY5Y细胞系相关产品：H1666细胞、MEF细胞、FL-83B细胞 
HCC-70细胞系相关产品：Swiss/3T3细胞、HBL100细胞、C8D1A细胞 
FRTL 5细胞系相关产品：RAW264细胞、OCI/AML-5细胞、NS1-Ag 4/1细胞 
NBL-12细胞系相关产品：PT-K75细胞、GM-637细胞、WI 38细胞 
NBL-12细胞系相关产品：PT-K75细胞、GM-637细胞、WI 38细胞 
NCIH661细胞系相关产品：YTMLC-90细胞、H1618细胞、HUVEC-C[HUVEC]细胞 
NCI-H1694细胞系相关产品：H1048细胞、OKAC1细胞、NCI-H441细胞 
Tu686细胞系相关产品：UCLA-RO 81细胞、SUM102细胞、RPMI8402细胞 
RC-4B/C 人垂体瘤细胞系
NCI-H2110细胞系相关产品：E6-1细胞、G-292 clone A141B1细胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1细胞 
NIH:OVCAR3细胞系相关产品：NRK 52E细胞、Epstein-Barr-2细胞、SR细胞 
WSUDLCL2细胞系相关产品：CCC-HPF-1细胞、TE 32细胞、LAN5细胞 
KP-N-RT细胞系相关产品：NCIH1563细胞、Ca-Ski细胞、HG2855细胞 
H-1568细胞系相关产品：HKC细胞、Me Wo细胞、NP69SV40T细胞 
SK-MEL-31细胞系相关产品：CHO cell clone K1细胞、Centre Antoine Lacassagne-39细胞、PC 61.5.3细胞 
MHCC 97-L细胞系相关产品：CT-26 WT细胞、U-2OS细胞、Colon38细胞 
231-luc细胞系相关产品：BTT739细胞、HCC-2185细胞、RPE1-hTERT细胞 
293 F细胞系相关产品：Huh-7.5.1细胞、RS4-11细胞、U87细胞 
HuH28细胞系相关产品：IHH4细胞、LS 513细胞、PTK-2细胞 
RPMI 8402细胞系相关产品：Hs-611-T细胞、AML-2细胞、HT-1197细胞 
MFD-1细胞系相关产品：LAPC-4细胞、JHH-7细胞、MC3T3-E1 Subclone 24细胞 
NCI-H1666细胞系相关产品：Mouse Bladder Tumor line-2细胞、MDA-MB-435 S细胞、GM02131细胞 
Human Corneal Epithelial cells-Transformed细胞系相关产品：NCIH1755细胞、NCI H69细胞、WEHI-3B细胞 
M-07e细胞系相关产品：KP-2细胞、TGW-nu-1细胞、NCI-H2108细胞 
RGC6细胞系相关产品：SF-295细胞、MFE 296细胞、KYSE 180细胞 
P36细胞系相关产品：MGSMC细胞、NCIH2227细胞、NHDF细胞 
H-146细胞系相关产品：HCC-1359细胞、H64细胞、KALS1细胞 
SJSA-1细胞系相关产品：PECAPJ34细胞、HAC-84细胞、MDA.MB.435细胞 
CAMA1细胞系相关产品：HL-7702细胞、MX-1细胞、2V6.11细胞 
COLO 320F细胞系相关产品：G-402细胞、IAR-20细胞、Immortalized Human Hepatocytes细胞 
CCC-HHM-2细胞系相关产品：CL40细胞、NCIH2171细胞、CCD19-Lu细胞 
MES-SA细胞系相关产品：MCF-12A细胞、SUNE 1细胞、6-10B细胞 
Kato-III细胞系相关产品：Ramos 1细胞、Mel-RM细胞、ME180细胞 
RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]细胞系相关产品：HPDE细胞、TOV-21G细胞、H-2107细胞 
H1184细胞系相关产品：OV-CA 432细胞、KCL22S细胞、YAC细胞 
NCI.H460细胞系相关产品：THP-1(ATCC)细胞、P3J HR-1细胞、NS-I/1细胞 
HGE细胞系相关产品：Hs343T细胞、ECGI10细胞、A-2058细胞 
H1650_CO细胞系相关产品：SNGM细胞、SW948细胞、H295R细胞 
SKMEL24细胞系相关产品：32D clone 3细胞、UMNSAH/DF-1细胞、RGC6细胞 
BIC1细胞系相关产品：NCI-H1048细胞、TR 146细胞、AHH-1细胞 
Malme-3 M细胞系相关产品：KNS-62细胞、NS1-Ag 4/1细胞、SRS-82细胞 
HCT116/L细胞系相关产品：PANC 1005细胞、LAC细胞、U-2-OS细胞 
CHP126细胞系相关产品：HC-11细胞、HCC2935细胞、LS174细胞 
Kasumi-1细胞系相关产品：NCIH1623细胞、HL-60 Clone 15细胞、NCI-H1155细胞 
LuCL4细胞系相关产品：CD 18细胞、BC-025细胞、Baby Hamster Kidney 21细胞 
CTLA4 Ig-24细胞系相关产品：LC-1-sq细胞、LC-2/ad细胞、253JB-V细胞 
MDA-415细胞系相关产品：HUVEC细胞、Mouse INsulinoma 6细胞、C22 (Clara)细胞 
HCEC-12细胞系相关产品：GM-637细胞、HSF2细胞、Normal Rat Kidney-49F细胞 
U266细胞系相关产品：MV-4-11细胞、H1993细胞、AZ-521细胞 
IGROV细胞系相关产品：HCT8细胞、NFHIOSE-80细胞、PA-1细胞 
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MHCC 97-L细胞系相关产品：CT-26 WT细胞、U-2OS细胞、Colon38细胞 
NS20-Y细胞系相关产品：F442-A细胞、HeLa229细胞、FM-88细胞 
CD18/HPAF细胞系相关产品：NB-9细胞、RL95-2细胞、Chinese Hamster Lung细胞 
C3H10T1-2细胞系相关产品：V79-1细胞、BT 325细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5细胞 
OCLY8细胞系相关产品：PF-382细胞、Hs940T细胞、U251MG细胞 
MES-13细胞系相关产品：OSK-1细胞、CTLL(2)细胞、Calu3细胞 
HOS TE 85细胞系相关产品：293AD细胞、LI7细胞、MOVAS-1细胞 
High5细胞系相关产品：C2BBe 1细胞、Kit225 K6细胞、BrCL15细胞 
SW480细胞系相关产品：HPAEpiC细胞、SK-LMS-1细胞、TK-1细胞 
Lu-65细胞系相关产品：LO2细胞、OCI-Ly 7细胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞 
Calf Pulmonary Artery 47细胞系相关产品：SKRC-20细胞、LNCaP-Clone-FGC细胞、Karpas 422细胞 
UMNSAH/DF-1细胞系相关产品：NCM-460细胞、rUCMSCs细胞、GM346细胞 
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