KLM-1 人胰腺癌细胞系

"KLM-1 人胰腺癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞传代注意事项：①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材；②每天观察细胞形态，掌握好细胞是否健康的标准：健康细胞的形态饱满，折光性好，生长致密时即可传代；③如发现细胞有污染迹象，应立即采取措施，一般应弃置污染的细胞，如果必须挽救，可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗，随后培养基中加入较大量的抗生素，并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持：细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的特点，要做好建系的维持必须记录好细胞档案,换液传代和做好细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
KLM-1 人胰腺癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞建议只吹打，不消化）其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
KLM-1 人胰腺癌细胞系
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞（绝大部分１min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-３细胞），吹打不超过２０次后（一般１０次即可），成小规模聚集（１０个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法５min还不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
LYR细胞系相关产品：SU-DHL6细胞、XuanWei Lung Cancer-05细胞、HSC6细胞 
EBC-1细胞系相关产品：HCMEC细胞、Institute for Medical Research-32细胞、NCI-H650细胞 
MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞系相关产品：RINm-5F细胞、3T3-Swiss albino细胞、EBC1细胞 
SNU-398细胞系相关产品：NOZ细胞、LICR-HN-6细胞、NF639细胞 
IB-RS-2细胞系相关产品：CNE细胞、RIMEC细胞、MDA-MB-435-S细胞 
NMCG-1细胞系相关产品：GM00215细胞、TE-32细胞、CAL 62细胞 
KASUMI1细胞系相关产品：9L细胞、Tca-8113细胞、NCI-H295R细胞 
MDCC MSB1细胞系相关产品：MLA-144细胞、DoTc2-4510细胞、Porcine Kidney-13细胞 
MM1.S细胞系相关产品：TKB1细胞、LM8细胞、V-79细胞 
RCC4细胞系相关产品：KM933细胞、NCI-SNU-423细胞、HEK 293-F细胞 
343MG细胞系相关产品：Fox/NY细胞、ECC-12细胞、BCP-1细胞 
U-343细胞系相关产品：P3HR1-BL细胞、HCCC9810细胞、786-0细胞 
Dysplastic Oral Keratinocyte细胞系相关产品：ACC2细胞、SK-RC-42细胞、SKMEL1细胞 
U87MG细胞系相关产品：OE-19细胞、EFM-192C细胞、BHK 21细胞 
MUTZ-3细胞系相关产品：H1915细胞、NCIH1734细胞、DV-90细胞 
Hs839T细胞系相关产品：U-87MG ATCC细胞、PANC0203细胞、SK-Hep1细胞 
Hs683细胞系相关产品：293-F细胞、LK 2细胞、Line 697细胞 
HR8348细胞系相关产品：DHL10细胞、LS174T细胞、DMS153细胞 
LLC PK1细胞系相关产品：U20S细胞、LTEP-s细胞、JTC-28细胞 
NCI-H2198细胞系相关产品：Ca761细胞、OVCAR5细胞、DSL6A/C1细胞 
KLM-1 人胰腺癌细胞系
H-2405细胞系相关产品：Lu-99A细胞、WiDr细胞、WM115F细胞 
DBTRG-05MG细胞系相关产品：EBTr细胞、HB611细胞、NCI-SNU-216细胞 
KU-812F细胞系相关产品：E304细胞、LAN-6细胞、BpRc1细胞 
MM.1S细胞系相关产品：HCC-1419细胞、C-4I细胞、F36P细胞 
GC-1spg细胞系相关产品：SK.MEL.2细胞、NCI-H1299细胞、YES 2细胞 
U-87MG细胞系相关产品：D341Med细胞、B16/BL6细胞、TT细胞 
Hs 746T细胞系相关产品：APRE-19细胞、KHYG1细胞、EnCa1细胞 
D283MED细胞系相关产品：Lu99A细胞、HEK293S细胞、DoTc2细胞 
Pro-Lec1.3C细胞系相关产品：3T3 clone A31细胞、UACC 812细胞、NCI-H1770细胞 
SK-N-DZ细胞系相关产品：A-1847细胞、EC109细胞、BEL 7405细胞 
T. T细胞系相关产品：Experimental Mammary Tumour-6细胞、FDC-P1细胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]细胞 
C1R细胞系相关产品：HEK-293细胞、UMNSAH-DF1细胞、NOR 10细胞 
Eca109细胞系相关产品：H283细胞、B104 [Rat neuroblastoma]细胞、H1341细胞 
HCC1569细胞系相关产品：MC57细胞、UPCI-SCC-154细胞、SU86-86细胞 
Lewis Lung细胞系相关产品：WEHI231细胞、UMNSAH/DF#1细胞、LIXC-002细胞 
NIH/3T3细胞系相关产品：MDAPC2B细胞、MDA-MB 468细胞、MX-1细胞 
SW 948细胞系相关产品：MGc80-3细胞、U-87-MG细胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1细胞 
NOR10细胞系相关产品：NCI-SNU-387细胞、SL-29细胞、UM-UC14细胞 
1.1B4细胞系相关产品：LN-18细胞、GM637A细胞、Human Kidney-2细胞 
JEG-3细胞系相关产品：H-295R细胞、GM02131A细胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77细胞 
TK10细胞系相关产品：KY70细胞、SK HEP-1细胞、NCI-H1651细胞 
KRC Y细胞系相关产品：L540细胞、B-95-8细胞、McG-1细胞 
HFT-8810细胞系相关产品：NCI-H1155细胞、TJ905细胞、Capan2细胞 
MRC 5细胞系相关产品：BE2-C细胞、PE CA PJ34细胞、RC-4B细胞 
Hs 839.T细胞系相关产品：NCI-H661细胞、HEK 293细胞、HEK293-A细胞 
EOC-20细胞系相关产品：SU-DHL-10细胞、KYSE-30细胞、MTC-TT细胞 
HIEC6细胞系相关产品：JeKo-1细胞、Ramos-RA1细胞、LNCaP FGC细胞 
Soleus clone 8细胞系相关产品：Rat Glomerular Endothelial细胞、HT 1080细胞、OCI-LY-10细胞 
BALB/3T3 cl. A31细胞系相关产品：RCK-8细胞、HEK 293-F细胞、CTV-1细胞 
38C-13细胞系相关产品：MAVER细胞、HT-3细胞、U343细胞 
231-luc细胞系相关产品：BTT739细胞、HCC-2185细胞、RPE1-hTERT细胞 
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IM-9细胞系相关产品：SW948细胞、CPA47细胞、NCL-H548细胞 
Nakata-1细胞系相关产品：H2172细胞、JVM-2细胞、NCIADRRES细胞 
Jurkat E6-1细胞系相关产品：CLL-CII细胞、Colon-26细胞、HB 611细胞 
MDAMB134VI细胞系相关产品：R2C细胞、HCC0015细胞、RPMI 1846细胞 
SK-N-BE(1)细胞系相关产品：AZ-521细胞、NOR-10细胞、RAMOS2G64C10细胞 
Pro-Lec1.3C细胞系相关产品：3T3 clone A31细胞、UACC 812细胞、NCI-H1770细胞 
R 1610细胞系相关产品：E0771细胞、PA1细胞、MLE12细胞 
NCI-H1651细胞系相关产品：Caco-2/ATCC细胞、NCI/ADRRES细胞、ARO 81-1细胞 
Hs 766.T细胞系相关产品：NCIH838细胞、HPMC细胞、HT 1376.T细胞 
KLM-1 人胰腺癌细胞系
RTMC细胞系相关产品：PL 45细胞、J-111细胞、KMH-2细胞 
OCI-AML-4细胞系相关产品：SK-N-DZ细胞、MC9细胞、SW 837细胞 
MDA-330细胞系相关产品：SPC-A-1细胞、H87细胞、10RGB细胞 
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VMRCLCD细胞系相关产品：L-5178-Y-R细胞、PaTu-8988s细胞、Astrocyte type I clone细胞 
HEK/EBNA细胞系相关产品：K 562细胞、HT3细胞、NCI-H1693细胞 
SK-Mel 2细胞系相关产品：GMK,BSC-1细胞、YAC细胞、Tb 1 Lu细胞 
TALL 1细胞系相关产品：Michigan Cancer Foundation-12F细胞、SW837细胞、MPC-5细胞 
IGROV 1细胞系相关产品：HDF-a细胞、NCI-Hut 125细胞、OLN-93细胞 
LX-2细胞系相关产品：MDA-MB-435S细胞、EAhy926细胞、Ramos.G6.C10细胞 
HRA19细胞系相关产品：UMNSAH-DF1细胞、293 Ad5细胞、OCILY-19细胞 
MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞系相关产品：RINm-5F细胞、AML-12细胞、SK.OV.3细胞 
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