CNE-1 人鼻咽癌细胞系

"CNE-1 人鼻咽癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】１)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前１d换液；２)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达５×１０／ml左右密度，离心，去上清；３)加入配制好的冻存液(培养液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂１０％二甲基亚砜(DMSO)或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；４)分装于无菌冻存管中，每管加１.５m悬液；５)旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做好标记；６)冻存：在特殊的仪器或简易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min时间内，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞】１)从罐中取出冻存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不时摇动，使其急速融化，３０～６０s内完成；３)冻存管用７０％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加１０ml培养液；４)低速离心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培养液洗一次；５)用培养液适当稀释后，装入培养瓶３７℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到１０／ml，在融后稀释２０倍时，仍能保持５×１０／ml数量。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
CNE-1 人鼻咽癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
CNE-1 人鼻咽癌细胞系
细胞传代时消化的问题：可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。（以难消化细胞为例）；具体操作：１)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗１-２遍，（这是前奏，即为步，目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。２)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。）３)吸干净瓶内剩余液体，加入０.３ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用，加入新培养基开始吹打，吹打２-３遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用２ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。（你也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比。）这是第三步。４)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，呵呵。继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况你自己把握）。这是第四步。其实还可以有第五步，对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话，你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态，更漂亮的样子，没办法，你必须分多批多次消化，这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低，保证细胞的状态能够。当然了，如果细胞是属于那种很容易消化的细胞，像RAW２６４.７，仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较，去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步，除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外，还有一个更重要的作用就是，可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态，不成片不连体。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
A3细胞系相关产品：SF-763细胞、X63-Ag8-653细胞、NPA87细胞 
GM05887A细胞系相关产品：MDCK Type II细胞、H2196细胞、CORL51细胞 
Farage Original Line细胞系相关产品：IOSE-Van细胞、HO1N1细胞、HEL 299细胞 
MZ-CRC-1细胞系相关产品：H2030细胞、KM933细胞、SUM 102细胞 
GM02219D细胞系相关产品：RMa-bm细胞、WSU-DLCL2细胞、HFT8810细胞 
CCD 841 CoTr细胞系相关产品：COLO-320HSR细胞、CHP212细胞、C3H-10T1/2细胞 
U251细胞系相关产品：Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a细胞、H-2444细胞、B16-F10-BL6细胞 
HCT 116细胞系相关产品：H1694细胞、MOLT-16细胞、Metastatic Variant-522细胞 
Biologics Standards-Cercopithecus-1细胞系相关产品：H-810细胞、KAT-5细胞、MB39细胞 
SUM-149PT细胞系相关产品：AU 565细胞、LIM 1215细胞、HEYA8细胞 
FCCH1018细胞系相关产品：VP 229细胞、210RCY3-Ag1.2.3细胞、EFM-192C细胞 
H-II-E-C3细胞系相关产品：beta-TC6细胞、MDCK-2细胞、NE1细胞 
Hs-940细胞系相关产品：UCLA RO-81-A-1细胞、SK-Hep1细胞、751-NA-15细胞 
OE33细胞系相关产品：HPMC细胞、Ramos 2G6 4C10细胞、SK Hep1细胞 
NCIH520细胞系相关产品：SUDHL-16细胞、A 172细胞、DC2.4细胞 
Hs821T细胞系相关产品：ATC241细胞、HCC2279细胞、MZ-CRC-1细胞 
Hs821T细胞系相关产品：ATC241细胞、HCC2279细胞、MZ-CRC-1细胞 
EB3 [Human Burkitt lymphoma]细胞系相关产品：Okayama University Medical School-27细胞、H929细胞、SW480E细胞 
SUM 52细胞系相关产品：MDA415细胞、SU86-86细胞、SKRC-20细胞 
D-283细胞系相关产品：NP69细胞、NCIH2023细胞、Vero-E6细胞 
CNE-1 人鼻咽癌细胞系
TM-4细胞系相关产品：OAC-P4C细胞、HEC-1-B细胞、CCD966SK细胞 
HCC-95细胞系相关产品：Kit-225细胞、HDQ-P1细胞、DMS-273细胞 
WPMY1细胞系相关产品：TJ905细胞、SNU-C1细胞、KYSE 140细胞 
Jurkat (clone E6-1)细胞系相关产品：SW756细胞、CEM-CCRF (CAMR)细胞、MOLT-16细胞 
SW-954细胞系相关产品：HB 611细胞、KG1细胞、PC 12细胞 
N-9细胞系相关产品：PK15细胞、MSF细胞、CG4细胞 
OE33细胞系相关产品：HPMC细胞、Ramos 2G6 4C10细胞、SK Hep1细胞 
BIC1细胞系相关产品：NCI-H1048细胞、TR 146细胞、AHH-1细胞 
MHCC 97-H细胞系相关产品：NIT-1细胞、SW-626细胞、16HBEo-细胞 
AG06814-M细胞系相关产品：J774 A.1细胞、SNU-761细胞、Walker/LLC-WRC256细胞 
OCILY7细胞系相关产品：SNU-520细胞、PT-67细胞、Hs839T细胞 
MKN74细胞系相关产品：AtT20细胞、NCI-H838细胞、VeroC1008细胞 
Sp2/0-Ag-14细胞系相关产品：H1404细胞、SW 1463细胞、MCAEC细胞 
CATHa细胞系相关产品：KMB17细胞、GM 637细胞、GM 637细胞 
SW-756细胞系相关产品：CD-18细胞、H250细胞、PTK2细胞 
NuTu-19细胞系相关产品：SUP-B15细胞、WI 38细胞、Tb 1-Lu细胞 
CEM-CCRF细胞系相关产品：PLC-8024细胞、A7r5细胞、COLO 320HSR细胞 
SB细胞系相关产品：SU8686细胞、KG-1细胞、Tu 177细胞 
INS-1细胞系相关产品：BALL1细胞、22Rv1细胞、COLO 206细胞 
RPMI8226/S细胞系相关产品：HFL-1细胞、SMA-560细胞、BEL7404细胞 
HFL1细胞系相关产品：MC3T3细胞、COLO-684细胞、SKO-007细胞 
SK-GT-2细胞系相关产品：D-407细胞、KP-N-RT-BM-1细胞、H-774细胞 
AMJ2-C8细胞系相关产品：ANA1细胞、CHO K1细胞、SGC 7901细胞 
HRCEC细胞系相关产品：Calu3细胞、McArdle RH-7777细胞、OCI-Ly 10细胞 
National Medical Center-Glioma 1细胞系相关产品：HBE 135-E6E7细胞、HSCT6细胞、KYSE 410细胞 
HepG2细胞系相关产品：Centre Antoine Lacassagne-148细胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5细胞、JKT1细胞 
LWnt3A细胞系相关产品：NCI-H2195细胞、NCI-H2330细胞、SGC-7901细胞 
NCIH2009细胞系相关产品：FD-LSC-1细胞、CCD1095Sk细胞、CT26.WT细胞 
MDA-MB415细胞系相关产品：VMCUB-1细胞、CAL 85-1细胞、Y-1细胞 
CCD1095Sk细胞系相关产品：NCI-H711细胞、ETCC-007细胞、MM134细胞 
DCS细胞系相关产品：GM16136细胞、KMS-26细胞、DU_145细胞 
BHP-10细胞系相关产品：SK-Mel 2细胞、FCCH1018细胞、OE33细胞 
Ramos 1细胞系相关产品：HBE 135-E6/E7细胞、SK-N-BE-2c细胞、Sc-1细胞 
RCC10细胞系相关产品：LAPC4细胞、H2108细胞、P116细胞 
HCC2935细胞系相关产品：GLC82细胞、L5178Y TK+/-3.7.2c细胞、OC-3-VGH细胞 
OCI-LY-10细胞系相关产品：Tb1Lu细胞、OAW 42细胞、Tn-5细胞 
CATH.a细胞系相关产品：ECC 12细胞、NCIADRRES细胞、SUP-M2细胞 
HDQ-P1细胞系相关产品：HCT.116细胞、A-673细胞、HIEC细胞 
HEL 299细胞系相关产品：H2085细胞、MM.1S细胞、L-5178-Y细胞 
HDQP1细胞系相关产品：Tissue Culture-1细胞、HuP-T4细胞、Ect1/E6E7细胞 
ZR7530细胞系相关产品：Caco2-BBE细胞、293-F细胞、H-1092细胞 
CNE-1 人鼻咽癌细胞系
CCRFCEM细胞系相关产品：MM-1S细胞、SR786细胞、HTori:3细胞 
OSRC2细胞系相关产品：GL261细胞、Hep 3B2.1-7细胞、CA-OV-3细胞 
CAL-62细胞系相关产品：mRMEC细胞、KYSE180细胞、HS766T细胞 
TALL1细胞系相关产品：VERO76细胞、293-H细胞、SHZ-88细胞 
OVCAR4细胞系相关产品：PL45细胞、Duke University 145细胞、H-2195细胞 
MKN74细胞系相关产品：AtT20细胞、NCI-H838细胞、VeroC1008细胞 
BALB/3T3 clone A31细胞系相关产品：CHO-ori细胞、RC-2细胞、LS-174细胞 
Jurkat clone A3细胞系相关产品：LL/2 (LLC1)细胞、RTMC细胞、RIN m5F细胞 
MEF细胞系相关产品：OKAC1细胞、SNT-8细胞、C8-D1A细胞 
Lewis lung carcinoma细胞系相关产品：Duck embryo细胞、Wayne State University-Head and Neck 13细胞、Hs840_T细胞 
HEK293T/17细胞系相关产品：SKNSH细胞、Emory University-2细胞、SK-MEL2细胞 
Farage Original Line细胞系相关产品：IOSE-Van细胞、LMH细胞、Hs606T细胞 
"