CTLA4 Ig-24 中国仓鼠卵巢细胞系

"CTLA4 Ig-24 中国仓鼠卵巢细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞培养实验基本操作：①进无菌室前要彻底洗手，按规定穿隔离衣。开始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。②操作者动作要轻，安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意，金属器械不能在火焰中长时间烧灼，以防退火；烧过的器械要冷却后才能使用；已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼，因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质，吸管再用时会将其带到培养液中；胶塞、橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养细胞，同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用。③使用培养液前不宜过早开瓶，开瓶后的培养液应保持斜位，避免直立，以防止下落细菌的污染。不再使用的培养液应立即封闭瓶口，培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中。④操作时尽量不要谈话，咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染。⑤吸取培养液、细胞悬液时，应专管专用，一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去，以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染。⑥操作完毕后应整理好工作台面，用消毒水浸泡的纱布擦拭台面；防止细胞交叉污染：所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备，一旦怀疑发生交叉污染，可做细胞遗传学方面的鉴定，如发现原有的细胞遗传物发生改变，可以复苏早期冻存的细胞使用。重要细胞系的传代工作应由两人独立进行；无菌室的彻底消毒①新洁尔灭全面彻底擦洗无菌室。使用前应稀释即配即用。新洁尔灭和酒精相比，的优点是便宜，而且可以稀释５０倍用，而同样量的酒精价格可能是新洁尔灭的几十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一种广谱灭菌剂菌，其水溶液和气体对各种细菌、芽孢及真菌等微生物均有杀灭作用。甲醛价廉，熏蒸消毒时不损坏衣服、家具、皮革、橡胶等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
CTLA4 Ig-24 中国仓鼠卵巢细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
CTLA4 Ig-24 中国仓鼠卵巢细胞系
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞（绝大部分１min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-３细胞），吹打不超过２０次后（一般１０次即可），成小规模聚集（１０个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法５min还不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
SNU251细胞系相关产品：LS 513细胞、L-Wnt-3A细胞、AN3-CA细胞 
RIN m5F细胞系相关产品：H-2141细胞、ROS-17/2.8细胞、SF 295细胞 
UPCI-SCC090细胞系相关产品：L M (TK-)细胞、Panc 1细胞、NCI.H460细胞 
THLE-3细胞系相关产品：Human podocyte细胞、SKMES细胞、95D细胞 
MHHCALL2细胞系相关产品：SK-MEL-24细胞、Mouse Forestomach Carcinoma细胞、WM35细胞 
COLO-1细胞系相关产品：Hs 766T细胞、OACP4 C细胞、Hs-675-T细胞 
PLC细胞系相关产品：Hs739T细胞、RPMI-1788细胞、OVCA-432细胞 
T9细胞系相关产品：PLA801D细胞、CWR22-R1细胞、NCIH250细胞 
MDA415细胞系相关产品：H2135细胞、A 375细胞、HPDLF细胞 
MDAMB175细胞系相关产品：FCCH1018细胞、Reuber H-35细胞、H292细胞 
SK-ML2细胞系相关产品：COR L279细胞、Sp2/0-Ag14细胞、J 111细胞 
HONE1细胞系相关产品：T2 (174 x CEM.T2)细胞、TR-146细胞、Rin-M-5F细胞 
H-748细胞系相关产品：Mel624细胞、MARC 145细胞、SK-RC 39细胞 
CAL 12细胞系相关产品：PTK2细胞、HO8910/PM细胞、IPLB-SF 21细胞 
NCI-H1573细胞系相关产品：CCD19-Lu细胞、CNE1-LUC细胞、Scott细胞 
AHH1细胞系相关产品：GOTO细胞、DKMG细胞、NCI-HUT-596细胞 
AHH1细胞系相关产品：GOTO细胞、DKMG细胞、NCI-HUT-596细胞 
OVCAR-10细胞系相关产品：IAR20细胞、NK-92MI细胞、Hs 895.T细胞 
SVHUC细胞系相关产品：H-2052细胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞、NCI-H716细胞 
JEG-3细胞系相关产品：H-295R细胞、GM02131A细胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77细胞 
CTLA4 Ig-24 中国仓鼠卵巢细胞系
SGC-7901细胞系相关产品：NCIH596细胞、NK-92细胞、V-79-4细胞 
751-NA-15细胞系相关产品：SMA-560细胞、SW 480细胞、KYSE 70细胞 
BHK细胞系相关产品：TEC细胞、I90细胞、H2085细胞 
Anip-973细胞系相关产品：D 407细胞、HR-8348细胞、RKOE6细胞 
CCK81细胞系相关产品：HLE-B3细胞、IOSE29细胞、NCI H23细胞 
B104 [Rat neuroblastoma]细胞系相关产品：C57/B6-L细胞、HHL5细胞、C166细胞 
DoTc2细胞系相关产品：Hs 688(A).T细胞、FU-OV-1细胞、MV4:11细胞 
NCIADRRES细胞系相关产品：RWPE-1细胞、CEL细胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞 
NK-92MI细胞系相关产品：SLMT1细胞、SUPB-15细胞、NCI-SNU-407细胞 
Be-Wo细胞系相关产品：BC-022细胞、SIRC细胞、3T3(A31)细胞 
NCIH2009细胞系相关产品：FD-LSC-1细胞、CCD1095Sk细胞、CT26.WT细胞 
MPASMC细胞系相关产品：Panc_03_27细胞、H-1672细胞、T-HSC细胞 
SKES1细胞系相关产品：Madison 109细胞、Hs819.T细胞、HONE1细胞 
U-118-MG细胞系相关产品：KP4细胞、Hs611T细胞、NB-9细胞 
KGN细胞系相关产品：SO-RB50细胞、HS688AT细胞、SKCO1细胞 
PL 5细胞系相关产品：U 266细胞、HT144-mel细胞、D10.G4.1细胞 
Jeko1细胞系相关产品：Mel-RM细胞、MMVECs细胞、ChaGo-K1细胞 
HOSEpiC细胞系相关产品：Toledo细胞、Hs-27细胞、P-36细胞 
H-498细胞系相关产品：NHRF细胞、SNU368细胞、COLO 320 DM细胞 
RL-952细胞系相关产品：B16细胞、BEND细胞、TE3A细胞 
HS-766T细胞系相关产品：SW-1353细胞、NCI-H2085细胞、C32r细胞 
Hepa1-6细胞系相关产品：Dx5细胞、CATH-a细胞、SAS细胞 
RS(4;11)细胞系相关产品：Stanford University Pediatric T-cell line 1细胞、MUTZ1细胞、THLE2细胞 
CTLL(2)细胞系相关产品：KU-19-19细胞、SLMT-1细胞、MC9细胞 
NCIH716细胞系相关产品：GM03573A细胞、3D4/21细胞、AMJ2C8细胞 
A20细胞系相关产品：HNE2细胞、HME1细胞、95C细胞 
HeLaS3细胞系相关产品：KP-N-RT-BM细胞、HCC0202细胞、AC29细胞 
SKLU01细胞系相关产品：WM 239细胞、MM-1S细胞、ATDC-5细胞 
2BS细胞系相关产品：alphaTC1 Clone 6细胞、NCI-H2030细胞、H69细胞 
CHOK1细胞系相关产品：SKRC20细胞、R 1610细胞、KHYG-1细胞 
P3/NS1/1-Ag4.1细胞系相关产品：H2444细胞、IR 983F细胞、LC1细胞 
Jurkat (clone E6-1)细胞系相关产品：SW756细胞、CEM-CCRF (CAMR)细胞、MOLT-16细胞 
IM-95细胞系相关产品：A-204细胞、AMJ2-C8细胞、JB6 Cl 30-7b细胞 
NCIH82细胞系相关产品：HT55细胞、NTera 2细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1细胞 
NCI-H1355细胞系相关产品：NCI-H1618细胞、COLO-1细胞、T 24细胞 
OVCAR-433细胞系相关产品：MDA-MB-435 S细胞、BC3H1细胞、Hs578Bst细胞 
OVCAR-433细胞系相关产品：MDA-MB-435 S细胞、BC3H1细胞、Hs578Bst细胞 
IBMF-7细胞系相关产品：HSC/mHSC细胞、SW954细胞、L5178-R细胞 
RPMI 8226细胞系相关产品：LLC1细胞、A204细胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18细胞 
6-T CEM细胞系相关产品：1.1B4细胞、TR146细胞、Walker256细胞 
DHL8细胞系相关产品：Rat Chondrosarcoma Swarm细胞、Hu-P-T4细胞、SBC5细胞 
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CAL 39细胞系相关产品：MM1S细胞、NCI-H1522细胞、MMAc.SF细胞 
JJN3细胞系相关产品：DrG细胞、SK-RC 39细胞、MiaPaca.2细胞 
TK.10细胞系相关产品：HeLa/DDP细胞、ECV-304细胞、TOV112细胞 
CPAE细胞系相关产品：OSRC2细胞、LS411细胞、SW48细胞 
KLM-1细胞系相关产品：RPE1细胞、KALS1细胞、MEL细胞 
NCI-H2023细胞系相关产品：G-292细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5细胞、HOS (TE85)细胞 
KU-812F细胞系相关产品：E304细胞、LAN-6细胞、BpRc1细胞 
Tu-212细胞系相关产品：SNU-475细胞、NCI-H526细胞、V79-4细胞 
NCI747细胞系相关产品：N87细胞、KYSE0520细胞、NCI-H735细胞 
NCI-H1385细胞系相关产品：TCCSUP细胞、LC-MS细胞、SKUT-1细胞 
NCI H157细胞系相关产品：Hs-606-T细胞、H128细胞、NCIH295R细胞 
UPCI:SCC90细胞系相关产品：Jurkat (clone E6-1)细胞、SBC5细胞、HET-1A细胞 
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