H4-II-E 大鼠肝细胞系

"H4-II-E 大鼠肝细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
常见培养细胞预防污染的有效措施：体外培养的细胞受到严重污染时，有时即使想尽各种办法也难以挽回。因此，防止污染，预防是关键。只有将预防措施贯穿于整个细胞培养的始终，才能将发生污染的可能性降到最小程度。一般预防可从以下几方面着手：１)添加抗生素：各种抗生素性质不同，对各种微生物的作用也不同，联合应用比单用效果好，预防性应用比污染后使用好(但迄今尚无对抗支原体特效抗生素)。但反复使用抗生素会使微生物产生耐药性，且对细胞本身也有一定影响，因此为避免诱导抗药细菌，应定期更换培养系统中的抗生素，或尽可能不用抗生素处理；２)从物品、用品消毒灭菌着手：细胞培养所用物品清洗、消毒要彻底，各种溶液灭菌除菌要仔细，并在取样检菌一周后确认无菌才能使用。同时，在无菌过滤操作中，随着滤过体积的增大，滤膜破损的可能性增加，故应选择最后过滤的液体进行检测。定期对二氧化碳培养箱进行消毒。具体操作：７５%的酒精搽拭培养箱后，使用可移动的紫外灯至少消毒３０min，加入高压灭菌过的超纯水于培养箱水槽中保持湿度。也可配制３００ml的饱和酸铜加３L灭菌超纯水混合成酸铜溶液加入水槽中。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
H4-II-E 大鼠肝细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
冻存和复苏的原则：慢冻快融》当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序：采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时，1~2℃/min；当温度达-25℃以下时，5~10℃/min；当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中。2.简易程序：将冷冻管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱布袋系以线绳，通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口，按每分钟温度下降1~2℃的速度，在40min内降至液氮表面过夜，次晨投人液氮中。3.传统程序：冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时（或隔夜）→液氮槽长期储存。细胞冻存方法：1.预先配制冻存液》（1）8%DMSO+细胞生长液（92%血清）2.取对数生长期细胞，经胰酶消化后，加入适量冻存液，用吸管吹打制成细胞悬液（1×10(6)~5×10(6)细胞/ml）。3.加入1ml细胞于冻存管中，密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法：1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，轻轻摇动冷冻管，使其在1分钟内全部融化（不要超过3分钟）。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养，24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液，以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂特别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂，然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
H4-II-E 大鼠肝细胞系
细胞培养实验相关问题总结：支原体(mycoplasma)污染的细胞，是否能以肉眼观察出异状？不能。除极有经验之专家外，大多数遭受支原体污染的细胞株，无法以其外观分辨之；支原体污染会对细胞培养有何影响？支原体污染几乎可影响所有细胞之生长参数，代谢及研究之任一数据。故进行实验前，必须确认细胞为mycoplasma-free，实验结果之数据方有意义；侦测出细胞株有支原体污染时，该如何处理？直接灭菌后丢弃，以避免污染其它细胞株；CO２培养箱之水盘如何保持清洁？定期(至少每两周一次) 以无菌蒸馏水或无菌去离子水更换之；为何培养基保存于４°C冰箱中，颜色会偏暗红色，且pH值会越来越偏碱性？培养基保存于４°C冰箱中，培养基内之CO２会逐渐溢出，造成培养基越来越偏碱性。而培养基中之酸碱指示剂(通常为phenol red)的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱之结果，将造成细胞生长停滞或死亡。若培养基偏碱时，可以通入无菌过滤之CO２，以调整pH值；购买之细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；购买之细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；收到之冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
Hs 604.T细胞系相关产品：H2073细胞、L(TK-)细胞、U266-B1细胞 
CL1细胞系相关产品：BEL 7404细胞、HEL-92细胞、MiaPaCa-2细胞 
A 72细胞系相关产品：AC29细胞、SW-579细胞、UPCISCC154细胞 
SHG44细胞系相关产品：HEK293S细胞、SGC-7901/DDP细胞、T24(ECV304)细胞 
Anip973细胞系相关产品：WI-38细胞、COLO-320-DM细胞、MDCKII细胞 
Mouse Bladder Tumor line-2细胞系相关产品：NPA87-1细胞、Porcine Kidney-15细胞、IPLB-SF-21细胞 
KMST6细胞系相关产品：MH7A细胞、SUM102PT细胞、NB19-RIKEN细胞 
C57 Mouse Tumor 93细胞系相关产品：Ramos(RA1)细胞、HeLa-229细胞、Sf21细胞 
BT 549细胞系相关产品：DU4475细胞、HS-729细胞、Mouse podocyte细胞 
NT2-D1细胞系相关产品：Lewis Lung细胞、SK-MES细胞、A253细胞 
L-M[TK-]细胞系相关产品：FRTL 5细胞、H2286细胞、C57 Mouse Tumor 93细胞 
WML2细胞系相关产品：UMR-106细胞、BCP1细胞、K7M2细胞 
BRL 3A细胞系相关产品：PFSK细胞、UO.31细胞、HCC1954BL细胞 
MDA-MB-175细胞系相关产品：293T/17细胞、MDA-MB-453细胞、UCH-1细胞 
MC26细胞系相关产品：Hs-274-T细胞、TW 01细胞、HC-11细胞 
624 MEL细胞系相关产品：SNUC1细胞、CCD-841CoN细胞、COLO-684细胞 
624 MEL细胞系相关产品：SNUC1细胞、CCD-841CoN细胞、COLO-684细胞 
D341Med细胞系相关产品：NCI-H2405细胞、U20S细胞、MDA-MB-157细胞 
H-1581细胞系相关产品：NCI-H841细胞、HLE细胞、YH细胞 
Microbiological Associates-104细胞系相关产品：HR1K细胞、KG-1a细胞、LN 382细胞 
H4-II-E 大鼠肝细胞系
SW-837细胞系相关产品：P3HR-1细胞、WM451Lu细胞、TCam-2细胞 
RH30SJ细胞系相关产品：End1/E6E7细胞、TCC-SUP细胞、HT22细胞 
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞系相关产品：H211细胞、CLL-CII细胞、bEnd.3[BEND3]细胞 
C-26细胞系相关产品：NCI-SNU-878细胞、NS-1-Ag4-1细胞、J-774A.1细胞 
HLEC细胞系相关产品：50.B1细胞、HEK293A细胞、KE-39细胞 
NEC8细胞系相关产品：EB3 [Human Burkitt lymphoma]细胞、Rca-B细胞、KYSE410细胞 
U20S细胞系相关产品：GP-293细胞、HNE-1细胞、GA-10(Clone 4)细胞 
COR-L279细胞系相关产品：NS1细胞、Caov-4细胞、HCC0015细胞 
CCC-HHM-2细胞系相关产品：CL40细胞、NCIH2171细胞、CCD19-Lu细胞 
P30 OHK细胞系相关产品：Ly1细胞、M-1细胞、SK-MEL-31细胞 
KYSE 70细胞系相关产品：REC细胞、Pt-K1细胞、Kit225-K6细胞 
RAW2647细胞系相关产品：P30/OHK细胞、0V-1063细胞、SNU520细胞 
OCI AML5细胞系相关产品：H-1693细胞、Hs-688A-T细胞、X63Ag8.653细胞 
NCI-H1944细胞系相关产品：RBL2H3细胞、RA细胞、NCI-H596细胞 
MDAMB134细胞系相关产品：HIT.T15细胞、Panc-10.05细胞、Nittby-Salford 1细胞 
HLEpiC细胞系相关产品：Tca8113细胞、AAV293细胞、DHL5细胞 
MDA436细胞系相关产品：UMR106细胞、HCE-T细胞、Anip 973细胞 
VMCUB1细胞系相关产品：H-508细胞、CEMC1细胞、PANC0403细胞 
PJ34细胞系相关产品：P3HRI细胞、SNU-878细胞、HOP 62细胞 
686LN-M4e细胞系相关产品：HSC-2细胞、Dx5细胞、786-O RCC细胞 
NCI-322细胞系相关产品：H-2171细胞、H226细胞、NCI-H460细胞 
F-36P细胞系相关产品：Hepa 1-6细胞、NB9细胞、PLMVEC细胞 
OUMS-23细胞系相关产品：210RCY3-Ag1.2.3细胞、SF 763细胞、COLO206F细胞 
H1882细胞系相关产品：HONE1细胞、L cell细胞、LY细胞 
SR-786细胞系相关产品：OCI/AML-4细胞、EFM-192B细胞、SK-RC-52细胞 
Suzhou Human Glioma-44细胞系相关产品：52PE细胞、H-157细胞、B16 melanoma F10细胞 
MGC803细胞系相关产品：A2780-CP细胞、SK-GT-4细胞、CEM细胞 
HCC 94细胞系相关产品：624mel细胞、SK-MEL 28细胞、hTERT RPE-1细胞 
HEL-92_1_7细胞系相关产品：SKG-IIIa细胞、H4-IIE-C3细胞、NCI H226细胞 
NCI-H508细胞系相关产品：293-H细胞、NCI660细胞、JVM3细胞 
HT(H9)细胞系相关产品：Jurkat E6-1细胞、PLA-801C细胞、CG-4细胞 
ME1细胞系相关产品：TE9细胞、Tb 1 Lu (NBL-12)细胞、NCI-H2228细胞 
A673细胞系相关产品：MKN1细胞、SHI-1细胞、UCW 100细胞 
MDA435细胞系相关产品：NUGC-3细胞、MFE280细胞、JEG3细胞 
H184A1细胞系相关产品：28SC细胞、Baby Hamster Kidney 21细胞、Hs888 Lu细胞 
Pfeiffer细胞系相关产品：L-Wnt-3A细胞、OCILY7细胞、MFHL-2细胞 
H-1944细胞系相关产品：SNB.19细胞、H-35细胞、Rat 2细胞 
HCAEC细胞系相关产品：NCIH522细胞、H.Ep.-2细胞、PLC细胞 
FRO细胞系相关产品：NCI-H441-4细胞、hUC-MSC细胞、H716细胞 
NCI-H1693细胞系相关产品：MARC 145细胞、RCK8细胞、Hs888Lu细胞 
H-838细胞系相关产品：CCLP-1细胞、ACC3细胞、IMR 90细胞 
H4-II-E 大鼠肝细胞系
MDA-MB-175VII细胞系相关产品：H-2108细胞、SF767细胞、BNL-HCC细胞 
MOLT.4细胞系相关产品：H295细胞、A2780S细胞、DCS细胞 
Tu 177细胞系相关产品：KP-4细胞、NCI-SNU-1细胞、H-82细胞 
KMB-17细胞系相关产品：TE354T细胞、IOSE-80细胞、Med 283细胞 
NALM-6细胞系相关产品：RCCJF细胞、NIH:OVCAR3细胞、MCF.7细胞 
CPA 47细胞系相关产品：HCC1954-BL细胞、CEM T4细胞、FHL-124细胞 
3T3-L1 ad细胞系相关产品：D-283 Med细胞、Hs 819.T细胞、H2009细胞 
Michigan Cancer Foundation-7细胞系相关产品：WM-239细胞、Hs 888Lu细胞、SW-13细胞 
EBC-1/original细胞系相关产品：Caki-2细胞、ACC-3细胞、AN-3细胞 
SW-982细胞系相关产品：LADMAC细胞、NIH:OVCAR-8细胞、CNE1-LUC细胞 
NP69SV40T细胞系相关产品：MC3T3E1细胞、RIN m5F细胞、MXI细胞 
A 72细胞系相关产品：AC29细胞、HCC0202细胞、Hs343T细胞 
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