CHO-S 中国仓鼠卵巢细胞系

"CHO-S 中国仓鼠卵巢细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞传代培养的胰酶消化法：传代培养：是指细胞从一个培养瓶以１：２或１：２以上的比例转移，接种到另一培养瓶的培养。传代细胞，可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代，部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代，或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤：①入无菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒双手；②倒置显微镜下观察细胞形态，确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液３７℃下预热；③超净台台面应整洁，用７５%酒精棉球擦拭清洁；④打开超净工作台的紫外灯照射台面２０min左右，关闭紫外灯，打开风机清洁空气除去臭氧；⑤点燃酒精灯;取出无菌试管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内；⑥将培养用液瓶口用７５%酒精消毒，过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上；⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去残留的就培养基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每个大培养瓶加入１ml胰酶，小培养瓶用量酌减，盖好瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶，使细胞脱离胰酶，然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鲜培养基，反复吹打消化好的细胞使其脱壁并分散，再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成细胞悬液，然后分装到新培养瓶中。盖好瓶盖，适度拧紧后稍回转，以利于CO２的进入，将培养瓶放回CO２培养箱；⑩对悬浮培养细胞，步骤７-９不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清，加入新鲜培养基，然后分装到各瓶中。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
CHO-S 中国仓鼠卵巢细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
CHO-S 中国仓鼠卵巢细胞系
细胞传代时消化的问题：可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。（以难消化细胞为例）；具体操作：１)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗１-２遍，（这是前奏，即为步，目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。２)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。）３)吸干净瓶内剩余液体，加入０.３ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用，加入新培养基开始吹打，吹打２-３遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用２ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。（你也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比。）这是第三步。４)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，呵呵。继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况你自己把握）。这是第四步。其实还可以有第五步，对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话，你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态，更漂亮的样子，没办法，你必须分多批多次消化，这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低，保证细胞的状态能够。当然了，如果细胞是属于那种很容易消化的细胞，像RAW２６４.７，仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较，去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步，除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外，还有一个更重要的作用就是，可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态，不成片不连体。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
CT 26细胞系相关产品：NCI/ADR-RES细胞、CMT 64细胞、GM-346细胞 
UK Pan-1细胞系相关产品：HPMEC细胞、DAN-G细胞、RBE4细胞 
PG-4 (S+L-)细胞系相关产品：SB细胞、MCF7细胞、COC1/CDDP细胞 
HEK293-A细胞系相关产品：UPCI:SCC154细胞、H-2170细胞、C-4-I细胞 
JROECL19细胞系相关产品：LC1/Sq细胞、U118细胞、BT483细胞 
hESC细胞系相关产品：BCAP37细胞、TE12细胞、174xCEM.T2细胞 
NCIH522细胞系相关产品：Pa16C细胞、CAL 120细胞、OVCAR433细胞 
CHO-K1细胞系相关产品：V 79细胞、MCF 7细胞、NCI-HUT-69细胞 
SLMT1细胞系相关产品：L 428细胞、SK-N-F1细胞、HEC-1-B细胞 
P388细胞系相关产品：KG1细胞、H-378细胞、NH-6细胞 
NCI-747细胞系相关产品：Ramos-2G6-4C10细胞、CHG5细胞、FRO81-2细胞 
JURKAT E-61细胞系相关产品：MT-4细胞、WM-2664细胞、HNEpC细胞 
PC-9S1细胞系相关产品：TK 10细胞、MDA-MB436细胞、RMG-I细胞 
U-118 MG细胞系相关产品：DH82细胞、NTHY-ORI3.1细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3细胞 
T-ALL-1细胞系相关产品：NCI-H716细胞、NCIH2342细胞、ReNcell CX细胞 
MC57细胞系相关产品：NB19-RIKEN细胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1细胞、NPA细胞 
MC57细胞系相关产品：NB19-RIKEN细胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1细胞、NPA细胞 
Det. 562细胞系相关产品：H19-7细胞、SNU620细胞、MES 13细胞 
P3/X63/Ag8.653细胞系相关产品：TE-5细胞、CTLL2细胞、CD18/HPAF细胞 
PE/CA-PJ34 (clone C12)细胞系相关产品：MOLT 4细胞、Swiss-3T3细胞、H-2087细胞 
CHO-S 中国仓鼠卵巢细胞系
WM266mel细胞系相关产品：Hepatoma-22细胞、HEK-293细胞、CEMC1细胞 
P388.D1细胞系相关产品：SKHEP1细胞、BT 549细胞、U-87MG ATCC细胞 
Ly19细胞系相关产品：CRFK细胞、SuperTube细胞、NB9细胞 
H735细胞系相关产品：Hs 934.T细胞、IPLB-Sf21AE细胞、CAL 12细胞 
ZYM-DIEC02细胞系相关产品：HPaSteC(HPSC)细胞、RPPVEC细胞、NL20SV细胞 
LSECs细胞系相关产品：NCI-H295细胞、QGY7701细胞、DHL10细胞 
hESC细胞系相关产品：BCAP37细胞、TE12细胞、174xCEM.T2细胞 
HEI193细胞系相关产品：DLD1细胞、138MG细胞、UMNSAH/DF-1细胞 
149PT细胞系相关产品：MOLT-4细胞、NCIH2405细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435细胞 
B6Tert-1细胞系相关产品：CEM-0细胞、EL4细胞、SNT8细胞 
H-1435细胞系相关产品：YD15细胞、H-2135细胞、OCI/AML2细胞 
NMC-G1细胞系相关产品：MB157细胞、HLCL9B10细胞、PanC1细胞 
H-187细胞系相关产品：Hs27F细胞、MDA-MB468细胞、JTC-39细胞 
A101D细胞系相关产品：SNU-C2B细胞、NCI-A549细胞、B6Tert-1细胞 
H 9细胞系相关产品：Tadarida brasiliensis 1 lung细胞、BE(2)C细胞、P3/NS1/1-Ag4.1细胞 
RCC23细胞系相关产品：L 929细胞、BHK-21细胞、HCC-1438细胞 
SNU-423细胞系相关产品：CNE-2细胞、SRA01/04 (HLE)细胞、CTLA4 Ig-24细胞 
Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞系相关产品：HeLa S-3细胞、RPMI-8402细胞、G-Olig2细胞 
SK-ChA-1细胞系相关产品：CHL细胞、PC-3细胞、TOV-112D细胞 
L-02细胞系相关产品：H4IIE细胞、H-2330细胞、ECC 12细胞 
OCM1细胞系相关产品：CTV-1细胞、hTERTHME1细胞、CL-11细胞 
TE-3A细胞系相关产品：COLO 741细胞、GM06141B细胞、SuperTube细胞 
HEK-293-F细胞系相关产品：201T细胞、NCI-H1048细胞、STO细胞 
SK N SH细胞系相关产品：MDCC MSB1细胞、Hopkins-92细胞、H-1341细胞 
High Five细胞系相关产品：KLN-205细胞、SW-48细胞、D-341细胞 
KMB 17细胞系相关产品：MCF10A细胞、COV362细胞、SNU216细胞 
OCI AML5细胞系相关产品：H-1693细胞、Hs-688A-T细胞、X63Ag8.653细胞 
SH-SY5Y细胞系相关产品：HMEC1细胞、COR L279细胞、ES-2细胞 
NCIH2227细胞系相关产品：OK细胞、RCC-JF细胞、HMrSV5细胞 
CCRF/CEM/0细胞系相关产品：H9c2(2-1)细胞、HCC-1419细胞、H661细胞 
QBI-293A细胞系相关产品：G401细胞、C33-A细胞、Hs729细胞 
RC-2细胞系相关产品：HR-1细胞、HPDE细胞、OKT3细胞 
UACC-893细胞系相关产品：HGC27细胞、NCIH810细胞、NB19细胞 
HUT-28细胞系相关产品：P-815细胞、Hut292细胞、NMCG1细胞 
SK-Mel 2细胞系相关产品：GMK,BSC-1细胞、YAC细胞、Tb 1 Lu细胞 
C8166细胞系相关产品：T 84细胞、Pa17C细胞、L-929细胞 
HuT102细胞系相关产品：PLA-801D细胞、RPMI-8226细胞、NCl-H157细胞 
H-1184细胞系相关产品：MES23.5细胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15细胞、MH-22a细胞 
Huh-7.5.1细胞系相关产品：L-cells细胞、NPA87细胞、SMA-560细胞 
SCL1细胞系相关产品：NCTC clone 1469细胞、HTR-8细胞、RWPE1细胞 
U-373-MG细胞系相关产品：MC 3T3-E1细胞、WSU-DLCL-2细胞、PANC0327细胞 
CHO-S 中国仓鼠卵巢细胞系
IHH4细胞系相关产品：NCTC929细胞、NCI-H1836细胞、VP267细胞 
RAT2细胞系相关产品：Rat 2细胞、Walker256细胞、P31 FUJ细胞 
LMTK-细胞系相关产品：ECV细胞、MUM2B细胞、MOLM-13细胞 
A673细胞系相关产品：MKN1细胞、SHI-1细胞、UCW 100细胞 
T1-73细胞系相关产品：PM6细胞、C12细胞、CL MC/9细胞 
NCIH1568细胞系相关产品：THEECs细胞、118 MG细胞、RPMC细胞 
CaEs17细胞系相关产品：X63Ag8-653细胞、SU-DHL-4细胞、B16/BL6细胞 
H1770细胞系相关产品：H-209细胞、HuH1细胞、Ku812细胞 
KASUMI6细胞系相关产品：NCIH1435细胞、OCI/AML-3细胞、RMG1细胞 
GM00215A细胞系相关产品：HOSEpiC细胞、HEK 293FT细胞、4T1细胞 
NCIH1993细胞系相关产品：3AA细胞、NCIH2110细胞、NG-108-15细胞 
PG-4 (S+L-)细胞系相关产品：SB细胞、32D clone3细胞、PANC403细胞 
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