Hep-G2 人肝癌细胞系

"Hep-G2 人肝癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】１)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前１d换液；２)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达５×１０／ml左右密度，离心，去上清；３)加入配制好的冻存液(培养液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂１０％二甲基亚砜(DMSO)或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；４)分装于无菌冻存管中，每管加１.５m悬液；５)旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做好标记；６)冻存：在特殊的仪器或简易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min时间内，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞】１)从罐中取出冻存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不时摇动，使其急速融化，３０～６０s内完成；３)冻存管用７０％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加１０ml培养液；４)低速离心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培养液洗一次；５)用培养液适当稀释后，装入培养瓶３７℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到１０／ml，在融后稀释２０倍时，仍能保持５×１０／ml数量。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
Hep-G2 人肝癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可。吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足够消化细胞。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后37℃消化。比较难消化的细胞（润洗方法5min还不能消化），这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育。不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性。如果和标准形态不一致，那可能是自己没消化好导致的，但如果消化方法正确，仍然成片分布，甚至完全吹打成单细胞悬液，贴壁后仍然成片分布，这是细胞的特性，是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布，你的细胞之后会对你越来越不好。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分 
Hep-G2 人肝癌细胞系
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞（绝大部分１min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-３细胞），吹打不超过２０次后（一般１０次即可），成小规模聚集（１０个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法５min还不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
H1385细胞系相关产品：MM.1S细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞、HeLa229细胞 
AML-12细胞系相关产品：HEL 299细胞、H1672细胞、CEF细胞 
MeT 5A细胞系相关产品：SW1783细胞、IPI-2I细胞、Panc 02.03细胞 
UPCISCC090细胞系相关产品：LA-4 [Mouse lung adenoma]细胞、2PK-3细胞、3T3F442A细胞 
H548细胞系相关产品：Jurkat, Clone E6-1细胞、CCD18Co细胞、TSCCa细胞 
SW-480细胞系相关产品：NCI-H78细胞、MSB-1细胞、BALL-1细胞 
A375mel细胞系相关产品：SKLMS-1细胞、SGC-7901细胞、JHH2细胞 
Tsup-1细胞系相关产品：CCFSTTG1细胞、58F细胞、HCC-1954BL细胞 
4T1-A细胞系相关产品：KU-812细胞、IMR 90细胞、OVCA5细胞 
OP-9细胞系相关产品：MADB-106细胞、RERF-LCMS细胞、Y3-Ag1.2.3细胞 
T84细胞系相关产品：A-2780细胞、KU 812细胞、GTL16细胞 
HBVP细胞系相关产品：NCIH1793细胞、Panc-8_13细胞、Reuber H35细胞 
NCIH1581细胞系相关产品：H-125细胞、EB-2细胞、Soleus clone 8细胞 
NCI-H292细胞系相关产品：FC33细胞、GM04671细胞、Eca-109细胞 
95D细胞系相关产品：OCUM-1细胞、C4-2细胞、NTHY-ORI3.1细胞 
TCam 2细胞系相关产品：COLO-320-HSR细胞、OCI-Ly 7细胞、LNT-229细胞 
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KPNRTBM1细胞系相关产品：32D clone3细胞、H 9细胞、CP-70细胞 
MGc80-3细胞系相关产品：Hep 3B细胞、T98-G细胞、OVCAR432细胞 
MV522细胞系相关产品：PANC-28细胞、MCF-10A细胞、JROECL 33细胞 
Hep-G2 人肝癌细胞系
Uhth-74细胞系相关产品：HOS (TE85, Clone F5)细胞、P30-OHK细胞、OSKM-1细胞 
MKN 45细胞系相关产品：hRPTC细胞、SK-MEL-2-LUC细胞、T2细胞 
Caco-2/BBe细胞系相关产品：TB-1 Lu细胞、NB4细胞、TE 671细胞 
QGY 7701细胞系相关产品：NCI H23细胞、HOPC细胞、MS1细胞 
COLO679细胞系相关产品：EPC细胞、Hs-940细胞、SCH细胞 
BT20细胞系相关产品：OV-90细胞、MDAMB361细胞、PANC-04-03细胞 
PFSK1细胞系相关产品：DC 2.4细胞、Hs-274-T细胞、TK 10细胞 
Karpas 299细胞系相关产品：HNE-1细胞、AML-12细胞、RINm5F细胞 
WRL-68细胞系相关产品：LS411细胞、MeT-5A细胞、SUDHL-5细胞 
LAN5细胞系相关产品：SW 1463细胞、293GP细胞、H295细胞 
NHLF细胞系相关产品：149PT细胞、A-1847细胞、Anglne细胞 
HD11细胞系相关产品：GM05887细胞、RPMI-6666细胞、SKNDZ细胞 
Madison细胞系相关产品：RF/6A细胞、SF 126细胞、CBRH7919细胞 
MHCCLM3细胞系相关产品：HCC0095细胞、H2110细胞、SNU-719细胞 
LAPC4细胞系相关产品：EVSAT细胞、SNU886细胞、Bovine ENDometrial cells细胞 
KYSE 30细胞系相关产品：P3HR1细胞、EA.Hy926细胞、PCI-04B细胞 
OVCA8细胞系相关产品：GM03320细胞、RCC-10细胞、hA549细胞 
GC-2细胞系相关产品：OVCAR 4细胞、C57/B6-L细胞、TSCC1细胞 
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Tu-177细胞系相关产品：MUG-Chor1细胞、NIH:OVCAR-10细胞、WM2664细胞 
SC1细胞系相关产品：H-1105细胞、3AO细胞、RH30SJ细胞 
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NCI-H345细胞系相关产品：MOVAS-1细胞、MAC1细胞、K-1735细胞 
H-2342细胞系相关产品：HCT116/L细胞、LoVo细胞、H1563细胞 
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526mel细胞系相关产品：MC3T3-E1(C4)细胞、RPMI7951细胞、HD11细胞 
J.E6-1细胞系相关产品：JROECL 33细胞、SU86_86细胞、18G3.cl 1细胞 
Human fetal lung fibroblast 1细胞系相关产品：OCI AML3细胞、LC-1 sq细胞、WM239细胞 
SMC-1细胞系相关产品：GM07404A细胞、FRTL5细胞、Caki-2细胞 
OUMS27细胞系相关产品：Tu-177细胞、SK-GT-2细胞、Panc_02_03细胞 
Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞系相关产品：UACC 893细胞、JVM2细胞、LS-411N细胞 
JB6 Cl 30细胞系相关产品：MD Anderson-Metastatic Breast-435细胞、HEY-A8细胞、NCIH1184细胞 
HSAS1细胞系相关产品：hEM15A细胞、NSH细胞、rHSC-99细胞 
HCV-29细胞系相关产品：E.L.4细胞、NCI-H-295细胞、Hmy.2 CIR细胞 
Hs 766.T细胞系相关产品：NCIH838细胞、HPMC细胞、HT 1376.T细胞 
R 1610细胞系相关产品：E0771细胞、PA1细胞、MLE12细胞 
Shadyside Hospital Pittsburgh-77细胞系相关产品：H9c2 (2-1)细胞、R1800[RA]细胞、M059K细胞 
Hep-G2 人肝癌细胞系
LM1细胞系相关产品：MDA231-LM2-4175细胞、TCC Sup细胞、149PT细胞 
OVSAHO细胞系相关产品：WM-266-mel细胞、Hs683T细胞、UWB1.289+BRCA1细胞 
Fetal Human Lens-124细胞系相关产品：bEnd.3[BEND3]细胞、A375-S2细胞、A-431细胞 
HCC-366细胞系相关产品：NCIH2591细胞、A 549细胞、LC-1细胞 
PG [Human lung carcinoma]细胞系相关产品：NCIH2009细胞、LWnt3A细胞、CL11细胞 
CA-46细胞系相关产品：B-95-8细胞、Daoy细胞、9L细胞 
AMJ2-C8细胞系相关产品：ANA1细胞、CHO K1细胞、SGC 7901细胞 
RC-K8细胞系相关产品：HEK293-FT细胞、Molm 14细胞、KLN205细胞 
MLE12细胞系相关产品：KATO 3细胞、Hs 606.T细胞、SK-ES1细胞 
SW 13细胞系相关产品：CCD18Co细胞、HEK-AD 293细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞 
HT 1197.T细胞系相关产品：RBSMC细胞、Tn5B1-4细胞、RAW264.7细胞 
MeT 5A细胞系相关产品：SW1783细胞、SUDHL-2细胞、P3-X63-Ag8-653细胞 
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