6-10B 人鼻咽癌细胞系

"6-10B 人鼻咽癌细胞系
细胞背景资料：鼻咽癌 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞培养无菌操作的演示：凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精灯火焰操作。器皿使用前必须过火灭菌，继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在高处，使用时仍要过火。各种操作要靠近酒精灯，动作要轻、准确，不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自来水刷洗，除去灰尘。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小时以除去脏物、铅、等物。刷洗、烘干：１２小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲干净后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清洁液浸泡１２小时，然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗１５次，最后蒸馏水冲洗３-５次和用双蒸水过３次。烘干、包装：洗干净后先烘干，然后用牛皮纸(油光纸)包装。高压消毒：包装好的器皿装入高压锅内盖好盖子，打开开关和安全阀，当蒸气成直线上升时，关闭安全阀，当指针指向１５磅时，维持２０-３０分钟。高压消毒后烘干。二、旧的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中，泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清洁液(酸液)，１２小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗)，再用蒸馏水冲洗３次。烘干、包装：洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
6-10B 人鼻咽癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
贴壁细胞冻存注意事项：细胞冻存液需提前配制，不可直接将DMSO加入细胞悬液中；不同细胞消化时间有差异，以实际镜检结果为准，大部分细胞回缩变圆并有少量细胞脱落即可中止消化，消化时间不宜过长；应选择汇合度80%-90%左右，细胞处于对数生长期时进行冻存操作，确保细胞冻存时状态，冻存密度可根据细胞特性进行调整；冻存细胞保存温度应低于-130℃，不可在-80℃长期保存。贴壁细胞冻存操作步骤：从培养箱中取出准备冻存的细胞；显微镜下观察细胞状态并拍照记录；酒精消毒培养瓶后放入安全柜中；吸去多余的培养基，加人2~3ml(PBS缓冲液)润洗一次；加入1ml胰酶，放入37℃消化；消化1min左右，在显微镜下观察细胞消化情况；消化完全后，加3ml完全培养基终止；将细胞悬液移入15ml离心管中离心，1000rpm/min（约200g）离心3-5min；吸去多余的液体，向细胞沉淀中加入适量的冻存液，轻轻吸打混匀；按比例分装至冻存管中；贴好标签后放入梯度冻存盒中；将冻存盒放入-80℃，降温过夜后，移入液氮中保存。贴壁细胞冻存实验准备事项：将15mL离心管、冻存管、PBS缓冲液、移液管、电动移液器等物品提前放入生物安全柜中，紫外照射30min消毒灭菌；细胞完全培养基、0.25%胰酶-0.02%EDTA、细胞冻存液等从4℃冰箱中取出后，复温至室温，备用；程序降温盒复温至室温备用。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁 
6-10B 人鼻咽癌细胞系
细胞培养实验相关问题总结：支原体(mycoplasma)污染的细胞，是否能以肉眼观察出异状？不能。除极有经验之专家外，大多数遭受支原体污染的细胞株，无法以其外观分辨之；支原体污染会对细胞培养有何影响？支原体污染几乎可影响所有细胞之生长参数，代谢及研究之任一数据。故进行实验前，必须确认细胞为mycoplasma-free，实验结果之数据方有意义；侦测出细胞株有支原体污染时，该如何处理？直接灭菌后丢弃，以避免污染其它细胞株；CO２培养箱之水盘如何保持清洁？定期(至少每两周一次) 以无菌蒸馏水或无菌去离子水更换之；为何培养基保存于４°C冰箱中，颜色会偏暗红色，且pH值会越来越偏碱性？培养基保存于４°C冰箱中，培养基内之CO２会逐渐溢出，造成培养基越来越偏碱性。而培养基中之酸碱指示剂(通常为phenol red)的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱之结果，将造成细胞生长停滞或死亡。若培养基偏碱时，可以通入无菌过滤之CO２，以调整pH值；购买之细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；购买之细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–８０°C太久；收到之冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
HHFK细胞系相关产品：HEMCSS细胞、MDA-MB-134细胞、Michigan Cancer Foundation-10A细胞 
TGHAVSMC细胞系相关产品：HCC70细胞、Hs839.T细胞、Raji细胞 
HEK 293细胞系相关产品：WM266细胞、PaTu8988s细胞、LN382细胞 
HOP62细胞系相关产品：UM-RC-2细胞、SK-OV-3细胞、Ku812F细胞 
SUM-52细胞系相关产品：AG 9细胞、B16/F0细胞、HCC 2185细胞 
HCC1599细胞系相关产品：ARO 81-1细胞、ChaGo-K-1细胞、HCC95细胞 
Jurkat clone A3细胞系相关产品：LL/2 (LLC1)细胞、RTMC细胞、RIN m5F细胞 
SNU216细胞系相关产品：MyLa 2059细胞、DI-TNC1细胞、HeLa细胞 
H1436细胞系相关产品：Hep 2细胞、NRK clone 49F细胞、D6P2T细胞 
A72细胞系相关产品：JROECL19细胞、P3/NS1/1-Ag4.1细胞、PF382细胞 
PLC/PRF/5细胞系相关产品：Ramos.G6.C10细胞、HEY A8细胞、OS-RC-2细胞 
GM03320细胞系相关产品：SK.OV.3细胞、675T细胞、L-02细胞 
766T细胞系相关产品：EnCa1细胞、ABC-1细胞、RS4-11细胞 
hTERT-RPE细胞系相关产品：NPA'87细胞、MEG-01细胞、Adeno-293细胞 
M21细胞系相关产品：NCIH1385细胞、RKO细胞、SKCO 1细胞 
SCC-25细胞系相关产品：ZR75-1细胞、HUT 28细胞、RPMI #1846细胞 
OCI-LY-18细胞系相关产品：ROS17/2.8细胞、MCA38细胞、HCC-9724细胞 
HT clone H9细胞系相关产品：AsPC-1细胞、KU-19-19细胞、NCI-H2081细胞 
SW 1573细胞系相关产品：Sp 2817细胞、CBRH7919细胞、MDA231细胞 
L-Wnt-3A细胞系相关产品：MC3T3-E细胞、A-172细胞、RPMI-1788细胞 
6-10B 人鼻咽癌细胞系
Colo-678细胞系相关产品：SupB15WT细胞、Hela-mock细胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3细胞 
ECC-10细胞系相关产品：LICR-LON-HN6-R细胞、Z138细胞、MDA-MB436细胞 
293-F细胞系相关产品：PC3M-IE8细胞、JIII细胞、C8161细胞 
H1105细胞系相关产品：CHP 126细胞、SW579细胞、D-324MED细胞 
NCI H929细胞系相关产品：SUM 159细胞、J82COT细胞、CCRF-CEM细胞 
YTMLC-90细胞系相关产品：ONS76细胞、CEM.C1细胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1细胞 
A-253细胞系相关产品：RPMI2650细胞、GA-10-Clone-4细胞、SW756细胞 
GFP-Olig2细胞系相关产品：hTERT-RPE细胞、AML 12细胞、NCIH1618细胞 
8305-C细胞系相关产品：CDC/EU.HMEC-1细胞、TGHAVSMC细胞、MCF12F细胞 
HCC-1806细胞系相关产品：D324 Med细胞、RBL 2H3细胞、HCS2/8细胞 
NCIH1184细胞系相关产品：AU-565细胞、H498细胞、H-847细胞 
2780CP细胞系相关产品：KOPN8细胞、TFH细胞、CHP-100细胞 
Mo7e细胞系相关产品：H-2196细胞、CAKI 2细胞、NCI-H510细胞 
LLCMK2细胞系相关产品：L615细胞、Hs888Lu细胞、Hs_578t细胞 
SW480细胞系相关产品：HPAEpiC细胞、SK-LMS-1细胞、TK-1细胞 
EAhy926细胞系相关产品：Hs.27细胞、C-33 A细胞、NCI-322细胞 
RT112细胞系相关产品：RS4;11细胞、P 815细胞、HaCaT细胞 
PG [Human lung carcinoma]细胞系相关产品：NCIH2009细胞、LWnt3A细胞、CL11细胞 
HCC94细胞系相关产品：HCC-2218细胞、AN-3细胞、H2227细胞 
MDA-MB-435 S细胞系相关产品：MDA231-LM2细胞、DHL6细胞、INS1E细胞 
LIPF155C细胞系相关产品：DMS-114细胞、MonoMac6细胞、Mv 1 Lu (NBL-7)细胞 
MAVER-1细胞系相关产品：AML-193细胞、NCI-H2170细胞、SNU-520细胞 
COLO 320DM细胞系相关产品：4T1.2细胞、R2C细胞、C3H/10T1/2 CL8细胞 
NCI-H508细胞系相关产品：293-H细胞、NCI660细胞、JVM3细胞 
HPAF-I细胞系相关产品：KM.12细胞、HC11 Mammary Epithelium细胞、Hs 832(C).T细胞 
4T1-A细胞系相关产品：KU-812细胞、IMR 90细胞、OVCA5细胞 
FHC细胞系相关产品：HELA-GFP细胞、T-24细胞、S91细胞 
HuP-T3细胞系相关产品：SK-CO-1细胞、SMMC-7721细胞、HCT-116细胞 
Kasumi-6细胞系相关产品：WEHI-3B细胞、HS578细胞、OVCA 420细胞 
MPP89细胞系相关产品：HNEpC细胞、MBdSMC细胞、KS-SLK细胞 
A375mel细胞系相关产品：SKLMS-1细胞、SGC-7901细胞、JHH2细胞 
PC 61-5-3细胞系相关产品：GM637细胞、NIH-3T3细胞、BNL.CL2细胞 
SLK细胞系相关产品：SUM-52-PE细胞、SK_N_BE2C细胞、CAMA细胞 
KCL22S细胞系相关产品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞、SHG-44细胞、SK UT 1细胞 
HCT-GEO细胞系相关产品：SF 126细胞、H460细胞、NALM6细胞 
SV40-MES13细胞系相关产品：KRC Y细胞、G519细胞、149 PT细胞 
PC-3M细胞系相关产品：Murine Lung Epithelial-12细胞、NCIH128细胞、8226/S细胞 
COLO.205细胞系相关产品：PC3细胞、RCM1细胞、NCI-1155细胞 
KYSE-180细胞系相关产品：SUM190细胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞、SKNBE(1)细胞 
IPEC-J2细胞系相关产品：NT2细胞、Det. 562细胞、ACC-M细胞 
BIC1细胞系相关产品：NCI-H1048细胞、TR 146细胞、AHH-1细胞 
6-10B 人鼻咽癌细胞系
GDM1细胞系相关产品：Jurkat-FHCRC细胞、WPMY-1细胞、MKN-1细胞 
ASH3细胞系相关产品：University of Michigan-Renal Carcinoma-2细胞、MM1细胞、NCTC-929细胞 
SF295细胞系相关产品：H-2081细胞、Lu-165细胞、PK136细胞 
VP303细胞系相关产品：Huh-7细胞、COLO 205细胞、MOLP-8细胞 
NCI.H460细胞系相关产品：THP-1(ATCC)细胞、P3J HR-1细胞、NS-I/1细胞 
OVCAR-420细胞系相关产品：LICR-HN-6细胞、MDA435细胞、SNU-216细胞 
Hs294T细胞系相关产品：MDAPCa-2b细胞、DanG细胞、J-82细胞 
HeLa S 3细胞系相关产品：YD-38细胞、C2BBe 1细胞、L-363细胞 
NCI-H2172细胞系相关产品：Pt K1细胞、NPC-TW 039细胞、Detroit 562细胞 
Roswell Park Memorial Institute 8226细胞系相关产品：Clone Y1细胞、RPMI1788细胞、QGP1细胞 
H292细胞系相关产品：SNU620细胞、Hs-746T细胞、MCF-7/ADR-RES细胞 
HEK 293T/17细胞系相关产品：SKML-28细胞、LTEP a2细胞、SY5Y细胞 
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