KMH-2 人甲状腺癌细胞系

"KMH-2 人甲状腺癌细胞系
细胞背景资料：未分化甲状腺癌；男性 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞传代培养的胰酶消化法：传代培养：是指细胞从一个培养瓶以１：２或１：２以上的比例转移，接种到另一培养瓶的培养。传代细胞，可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代，部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代，或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤：①入无菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒双手；②倒置显微镜下观察细胞形态，确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液３７℃下预热；③超净台台面应整洁，用７５%酒精棉球擦拭清洁；④打开超净工作台的紫外灯照射台面２０min左右，关闭紫外灯，打开风机清洁空气除去臭氧；⑤点燃酒精灯;取出无菌试管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内；⑥将培养用液瓶口用７５%酒精消毒，过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上；⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去残留的就培养基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每个大培养瓶加入１ml胰酶，小培养瓶用量酌减，盖好瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶，使细胞脱离胰酶，然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鲜培养基，反复吹打消化好的细胞使其脱壁并分散，再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成细胞悬液，然后分装到新培养瓶中。盖好瓶盖，适度拧紧后稍回转，以利于CO２的进入，将培养瓶放回CO２培养箱；⑩对悬浮培养细胞，步骤７-９不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清，加入新鲜培养基，然后分装到各瓶中。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
KMH-2 人甲状腺癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可。吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足够消化细胞。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后37℃消化。比较难消化的细胞（润洗方法5min还不能消化），这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育。不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性。如果和标准形态不一致，那可能是自己没消化好导致的，但如果消化方法正确，仍然成片分布，甚至完全吹打成单细胞悬液，贴壁后仍然成片分布，这是细胞的特性，是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布，你的细胞之后会对你越来越不好。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁 
KMH-2 人甲状腺癌细胞系
细胞的冻存：目前，细胞冻存最常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。主要操作步骤为：(１)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(１０００r/min，１０分钟)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培养基，于４℃预冷１５分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为３×１０(６)～１×１０(７)/mL之间。(３)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装１～１.５mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(４)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入４℃冰箱中２～３小时，再移至冰箱冷冻室内３～４小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放２小时，最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
U-118-MG细胞系相关产品：KP4细胞、Hs611T细胞、NB-9细胞 
LED-WiDr细胞系相关产品：SVOG细胞、H1404细胞、ARO-81细胞 
TE-671细胞系相关产品：LM8细胞、P3/NS1/Ag4-1细胞、ROS 17/28细胞 
OCI-Ly 7细胞系相关产品：H220细胞、253J-BV细胞、Tsup-1细胞 
OS-732细胞系相关产品：6T-CEM细胞、H-EMC-SS细胞、M-1细胞 
3T3 Swiss Albino细胞系相关产品：OVTOKO细胞、BNL CL2细胞、CCK81细胞 
PFSK1细胞系相关产品：DC 2.4细胞、Hs-274-T细胞、TK 10细胞 
HT-22细胞系相关产品：HCC 70细胞、Lewis lung carcinoma line 1细胞、Walker 256细胞 
WiDrTC细胞系相关产品：SNU-251细胞、H-1954细胞、CHO-K1细胞 
J82COT细胞系相关产品：SK MES 1细胞、P3-X63-Ag 8.653细胞、SJCRH30细胞 
WTRL1细胞系相关产品：AAV-293细胞、H-920细胞、DanG细胞 
SW 837细胞系相关产品：NCIH2122细胞、NCM-460细胞、Kasumi-1细胞 
CCD-966SK细胞系相关产品：P3X63Ag8653细胞、H-1836细胞、PJ34细胞 
3T3-L1细胞系相关产品：NS1-Ag 4/1细胞、LTEP-a2细胞、CCD1112Sk细胞 
HEK293A细胞系相关产品：NK62a细胞、Panc 4.03细胞、L-540细胞 
SK-RC-20细胞系相关产品：CT 26细胞、L 1210细胞、TE 32.T细胞 
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SKO-007细胞系相关产品：HCC1833细胞、NBL-5细胞、HKBML细胞 
SK-RC 52细胞系相关产品：BLO11细胞、McCoy细胞、Vertebral Cancer of the Prostate细胞 
NKM1细胞系相关产品：ECC 10细胞、RD-2细胞、766T细胞 
KMH-2 人甲状腺癌细胞系
Eca109细胞系相关产品：H283细胞、B104 [Rat neuroblastoma]细胞、H1341细胞 
Highly Aggressively Proliferating Immortalized细胞系相关产品：THP 1细胞、IGR-OV1细胞、BHK-21细胞 
HHL-5细胞系相关产品：PL 5细胞、NCI-H1963细胞、LAD2细胞 
COLO394细胞系相关产品：373 MG细胞、BE2-M17细胞、RGM1细胞 
MAVER-1细胞系相关产品：AML-193细胞、NCI-H2170细胞、SNU-520细胞 
TE3A细胞系相关产品：U266B1细胞、HOSEpiC细胞、A172细胞 
CCD33Co细胞系相关产品：T-47D细胞、U118-MG细胞、Leukemia L1210细胞 
SNU-869细胞系相关产品：P 3 HR 1细胞、Uhth-74细胞、T-98细胞 
A549细胞系相关产品：D-341Med细胞、38C13细胞、CATHa细胞 
Toledo细胞系相关产品：G-361细胞、H-295细胞、KP4细胞 
COLO 201细胞系相关产品：Madin Darby Canine Kidney细胞、HuP-T3细胞、Bovine Turbinate细胞 
H596细胞系相关产品：GA-10(Clone 4)细胞、CCD 19Lu细胞、Dakiki细胞 
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Roswell Park Memorial Institute 1846细胞系相关产品：PLC PRF 5细胞、HuT-102细胞、GM02219细胞 
T/G HA-VSMC细胞系相关产品：OVCAR-433细胞、PLC/PRF5细胞、NCI-H1563细胞 
NCIH128细胞系相关产品：MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞、EBTr (NBL-4)细胞、G361mel细胞 
QGP1细胞系相关产品：NCI-H220细胞、MT-2J细胞、LS-180细胞 
OVCAR5细胞系相关产品：SK-NSH细胞、C3H10T1/2 clone8细胞、H524细胞 
Hs600T细胞系相关产品：SNK1细胞、Hs832T细胞、U20-S细胞 
Centre Antoine Lacassagne-39细胞系相关产品：Mv 1 Lu (NBL-7)细胞、High 5细胞、CD 18细胞 
Merwin Plasma Cell tumor-11细胞系相关产品：PAI细胞、SUM 190细胞、MCF12A细胞 
EB3 [Human Burkitt lymphoma]细胞系相关产品：Okayama University Medical School-27细胞、H929细胞、SW480E细胞 
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BERH-2细胞系相关产品：MM1-S细胞、HL-7702细胞、Roswell Park Memorial Institute 2650细胞 
NCIH1770细胞系相关产品：J45.01细胞、293 F细胞、Kasumi 1细胞 
PC-3M IE8细胞系相关产品：Vertebral Cancer of the Prostate细胞、MRC-V细胞、AML-12细胞 
MODE-K细胞系相关产品：RC-4B细胞、GM03190A细胞、H-69细胞 
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HCC-15细胞系相关产品：MRMT-1细胞、Swiss 3T3细胞、OCI-Ly1细胞 
TOV21G细胞系相关产品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞、PANC-1细胞、SNU398细胞 
MHCC97细胞系相关产品：SK N SH细胞、BPH1细胞、LN299细胞 
GM346细胞系相关产品：LN 229细胞、HS-766-T细胞、NCI-H2286细胞 
FRO81-2细胞系相关产品：RIN-m细胞、SW1088细胞、NCI-H196细胞 
MGc80-3细胞系相关产品：Hep 3B细胞、T98-G细胞、OVCAR432细胞 
J 774A.1细胞系相关产品：Panc4.03细胞、SKCol1细胞、KBM-5细胞 
LPC-H12细胞系相关产品：SK-RC 42细胞、MCF7/WT细胞、Kuramochi细胞 
BV-2细胞系相关产品：SKG IIIa细胞、INS1-E细胞、Mo7e细胞 
TFK1细胞系相关产品：ID8细胞、H520细胞、HCC1143细胞 
GC-1spg细胞系相关产品：SK.MEL.2细胞、NCI-H1299细胞、YES 2细胞 
H-676细胞系相关产品：X63-Ag 8.6.5.3细胞、Hs742T细胞、H1238细胞 
SEG1细胞系相关产品：NCI H929细胞、MDA-435细胞、Jurkat E6细胞 
KMH-2 人甲状腺癌细胞系
H69/P细胞系相关产品：Mo 59J细胞、SNU-1040细胞、HFT-8810细胞 
Turbot Embryonic Cell line细胞系相关产品：RAOEC细胞、SKNEP细胞、Caco-2/BBe细胞 
Panc-03.27细胞系相关产品：COLO 320F细胞、NKT细胞、B16-BL6细胞 
UPCI:SCC090细胞系相关产品：alpha-TC1.6细胞、HP615细胞、EFM-19细胞 
H1694细胞系相关产品：beta TC6细胞、TE671细胞、CCRF/CEM/0细胞 
Sc-1细胞系相关产品：RS 4;11细胞、SCI1细胞、D283MED细胞 
NCI-H1734细胞系相关产品：IEC-6细胞、SKO-007细胞、RPE1细胞 
PL-9细胞系相关产品：IOSE-29细胞、NCIH508细胞、NPC-039细胞 
HuTu-80细胞系相关产品：Alpha Mouse Liver 12细胞、3T3-L1 ad细胞、Vero from pool #76细胞 
Hs68细胞系相关产品：DMS 114细胞、Epstein-Barr-3细胞、QGY-7701细胞 
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TE-671细胞系相关产品：LM8细胞、TGW-I-nu细胞、BC-025细胞 
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