MUVEC 小鼠脐静脉内皮细胞系

"MUVEC 小鼠脐静脉内皮细胞系
细胞背景资料：脐静脉；内皮细胞 
细胞形态：上皮细胞样 
培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】１)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前１d换液；２)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达５×１０／ml左右密度，离心，去上清；３)加入配制好的冻存液(培养液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂１０％二甲基亚砜(DMSO)或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；４)分装于无菌冻存管中，每管加１.５m悬液；５)旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做好标记；６)冻存：在特殊的仪器或简易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min时间内，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞】１)从罐中取出冻存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不时摇动，使其急速融化，３０～６０s内完成；３)冻存管用７０％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加１０ml培养液；４)低速离心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培养液洗一次；５)用培养液适当稀释后，装入培养瓶３７℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到１０／ml，在融后稀释２０倍时，仍能保持５×１０／ml数量。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
MUVEC 小鼠脐静脉内皮细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁 
MUVEC 小鼠脐静脉内皮细胞系
细胞培养过程中相关问题总结：悬浮性细胞应如何继代处理？一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００xg(约１,０００rpm)，５-１０分钟，过高之转速，将造成细胞死亡；细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因；细胞冷冻培养基之成份为何？动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成；DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO等级，必须为Tissue culture grade之DMSO，其本身即为无菌状况，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于４°C，避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质，并可减少污染之机会。若要过滤DMSO，则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜；冷冻保存细胞之方法？冷冻保存方法一：冷冻管置于４°C ３０~６０分钟→ (-２０°C ３０分钟)→-８０°C １６~１８小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase长期储存。-２０°C不可超过１小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？冷冻管内细胞数目一般为１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤细胞则以５x１０(６)cells/ml vial为宜；应如何避免细胞污染？细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法；如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？直接灭菌后丢弃之。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
H69/P细胞系相关产品：Mo 59J细胞、SNU-1040细胞、HFT-8810细胞 
OV-2008细胞系相关产品：IPAM-WT细胞、MHCCLM3细胞、R1610细胞 
PANC 1005细胞系相关产品：BEP2D细胞、Psi-2-DAP细胞、JVM-3细胞 
hEM15A细胞系相关产品：NCI-H2591细胞、U-251_MG细胞、M-14细胞 
SCC-25细胞系相关产品：ZR75-1细胞、HUT 28细胞、RPMI #1846细胞 
786O细胞系相关产品：OCI-Ly 1细胞、NCI/ADR-RES细胞、NCI-H441-4细胞 
RPMI no. 8226细胞系相关产品：BHT-101细胞、G292细胞、Rat Basophilic Leukemia-1细胞 
SKMEL-24细胞系相关产品：MDA-134细胞、AE 1201细胞、MV4II细胞 
Medical Research Council cell strain-5细胞系相关产品：SupT1细胞、G 292 Clone A 141B1细胞、IR983F细胞 
NIH-3T3细胞系相关产品：TM-4细胞、CAL-85-1细胞、HA1800细胞 
HRA-19细胞系相关产品：NCI-H441细胞、aTC1-6细胞、HL 60细胞 
U118-MG细胞系相关产品：SV-HUC细胞、brain-derived Endothelial cells.3细胞、GH 3细胞 
MD Anderson-Metastatic Breast-436细胞系相关产品：GLRK 13细胞、EJ1细胞、HTR-8/SVneo细胞 
NCI-HUT-292细胞系相关产品：NCIH2291细胞、H322T细胞、SUDHL4细胞 
HCC-78细胞系相关产品：H358细胞、RPMC细胞、L-Wnt-3A细胞 
Nthy ori 3.1细胞系相关产品：SKOV-3细胞、CAMA1细胞、RDES细胞 
Nthy ori 3.1细胞系相关产品：SKOV-3细胞、CAMA1细胞、RDES细胞 
CCD19-Lu细胞系相关产品：UCD-MLA-144细胞、NG 108-15细胞、AAV-293细胞 
BIC1细胞系相关产品：NCI-H1048细胞、TR 146细胞、AHH-1细胞 
NCI-H820细胞系相关产品：P31/FUJ细胞、Caco 2细胞、HHUA细胞 
MUVEC 小鼠脐静脉内皮细胞系
HCC 94细胞系相关产品：624mel细胞、SK-MEL 28细胞、hTERT RPE-1细胞 
SNU-C1细胞系相关产品：NGP细胞、GLAG-66细胞、Ly7细胞 
MOLT16细胞系相关产品：J774A1细胞、NCIH292细胞、NeHepLxHT细胞 
NCIH510细胞系相关产品：N-9细胞、HCT GEO细胞、SNU-886细胞 
BXPC3细胞系相关产品：ARPE-19细胞、Roswell Park Memorial Institute 6666细胞、H-7721细胞 
LICR-HN6细胞系相关产品：NK10a细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468细胞、T-ALL 1细胞 
Tohoku Hospital Pediatrics-1细胞系相关产品：NCIH2107细胞、NCI-H1581细胞、NFS-60细胞 
JHH2细胞系相关产品：DMS 153细胞、KCL22细胞、675T细胞 
NCI-SNU-5细胞系相关产品：HRMC细胞、RIN-14B细胞、THC-8307细胞 
MA-104细胞系相关产品：Rin-M-5F细胞、RT4-D6P2T细胞、UMR106细胞 
UPCI:SCC90细胞系相关产品：Jurkat (clone E6-1)细胞、NCIH1155细胞、GM00637B细胞 
HuT-78细胞系相关产品：LLC-PK1细胞、University of Arizona Cell Culture-812细胞、LS-513细胞 
OVCAR 433细胞系相关产品：COLO394细胞、SMMC7721细胞、RPMI 8226细胞 
Co-115细胞系相关产品：RIN Cl-5F细胞、HCT-FET细胞、MDAMB415细胞 
COLO-684细胞系相关产品：DMS 273细胞、NCI-SNU-668细胞、Hs852细胞 
UPCI-SCC090细胞系相关产品：L M (TK-)细胞、Panc 1细胞、NCI.H460细胞 
LS 174 T细胞系相关产品：WILL2细胞、HepG2-luc细胞、MPP89细胞 
MDA-MB-157细胞系相关产品：A 172细胞、KGN细胞、LOUNH91细胞 
TW-039细胞系相关产品：RT-4细胞、102PT细胞、GalK 1细胞 
Centre Antoine Lacassagne-78细胞系相关产品：H-548细胞、LNT-229细胞、NTERA2-cloneD1细胞 
Medical University of Graz-Chordoma 1细胞系相关产品：HEH2细胞、CA46细胞、B95-8细胞 
A-204细胞系相关产品：COLO 205细胞、P31/FUJ细胞、NCI H345细胞 
OVCAR-8/ADR细胞系相关产品：Psi2 DAP细胞、MDAMB134VI细胞、X63-Ag8-653细胞 
P3HRI细胞系相关产品：SCL I细胞、CCF-STTG1细胞、MDST8细胞 
PK (15)细胞系相关产品：GM07404D细胞、Hs-578T细胞、NCIH2286细胞 
HEL-92_1_7细胞系相关产品：SKG-IIIa细胞、H4-IIE-C3细胞、NCI H226细胞 
QG-56细胞系相关产品：SY5Y细胞、Tu-686细胞、SB细胞 
BEL 7404细胞系相关产品：Colo205细胞、JiyoyeP-2003细胞、HIMEC细胞 
H2591细胞系相关产品：Hep G2-Luc细胞、SKOV-3细胞、CEMC7细胞 
NMCG-1细胞系相关产品：GM00215细胞、TE-32细胞、CAL 62细胞 
CHO细胞系相关产品：MT-2细胞、EVSAT细胞、HECCL-1细胞 
INS1细胞系相关产品：OVCAR-8细胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)细胞、MRCV细胞 
MDA-MB415细胞系相关产品：VMCUB-1细胞、CAL 85-1细胞、Y-1细胞 
LICCF细胞系相关产品：Emory University-3细胞、DB细胞、EJ1细胞 
WEHI3B细胞系相关产品：OS-732细胞、HepG2/C3A细胞、Madison细胞 
TE-85 clone 5细胞系相关产品：TE6细胞、MRC-5细胞、FT-293细胞 
CV 1细胞系相关产品：hADSCs细胞、BALL-1细胞、Z310细胞 
Ku812F细胞系相关产品：159PT细胞、GC-2细胞、CD-18细胞 
EB-1细胞系相关产品：SUP-M2细胞、CTLA4 Ig-24细胞、SUD6细胞 
P3-NS1/1-Ag4-1细胞系相关产品：NHLF细胞、NCI-H524细胞、Caco 2细胞 
NCI-H2347细胞系相关产品：KATO III细胞、32D/cl3细胞、KAT-5细胞 
MUVEC 小鼠脐静脉内皮细胞系
SNU423细胞系相关产品：OCILY-10细胞、GOTO细胞、EFM192A细胞 
HConEpic细胞系相关产品：Vero 76 clone E-6细胞、KP-N-RT细胞、NCIH929细胞 
Panc-813细胞系相关产品：IA-LM细胞、PCI:SG-231细胞、OE-19细胞 
OUMS-27细胞系相关产品：KYSE270细胞、H774细胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞 
HuT78细胞系相关产品：P3J HR1-K细胞、MHCC 97细胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]细胞 
MGH-U3 (RN)细胞系相关产品：P3X63Ag8细胞、MCF-10 Attached细胞、BV-173细胞 
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞系相关产品：H211细胞、CLL-CII细胞、bEnd.3[BEND3]细胞 
OSRC2细胞系相关产品：GL261细胞、Hep 3B2.1-7细胞、CA-OV-3细胞 
H-727细胞系相关产品：293A细胞、U251细胞、PK-13细胞 
KCL22细胞系相关产品：GC9811-P细胞、Mo7e细胞、NCI-H1105细胞 
HPB/ALL细胞系相关产品：SP-2/0-AG14细胞、95D细胞、MDA-MB468细胞 
PANC 1005细胞系相关产品：BEP2D细胞、TCCPAN2细胞、CCC-HEL-1细胞 
"