CNE-2Z 人鼻咽癌细胞系

"CNE-2Z 人鼻咽癌细胞系
细胞背景资料：鼻咽癌 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞培养方面注意的几点：无菌意识要强：实验进行前，超净台以紫外灯照射３０分钟灭菌，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启超净工作台风扇运转数分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置，其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以７０%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域，一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约４５°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基：不同的细胞可能培养基不同，甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞，有文献就选用neurobase培养基，而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而这种培养基中含有抗氧化剂成分，此时，我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:４℃冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指５６℃，３０分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到５６℃后，将血清放入，待温度升高到５６℃后计时，一般５分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须，一般不要作此热处理，因为会造成沉淀物之显著增多，且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
CNE-2Z 人鼻咽癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞建议只吹打，不消化）其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁 
CNE-2Z 人鼻咽癌细胞系
细胞培养过程中相关问题总结：悬浮性细胞应如何继代处理？一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００xg(约１,０００rpm)，５-１０分钟，过高之转速，将造成细胞死亡；细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因；细胞冷冻培养基之成份为何？动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成；DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO等级，必须为Tissue culture grade之DMSO，其本身即为无菌状况，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于４°C，避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质，并可减少污染之机会。若要过滤DMSO，则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜；冷冻保存细胞之方法？冷冻保存方法一：冷冻管置于４°C ３０~６０分钟→ (-２０°C ３０分钟)→-８０°C １６~１８小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase长期储存。-２０°C不可超过１小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？冷冻管内细胞数目一般为１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤细胞则以５x１０(６)cells/ml vial为宜；应如何避免细胞污染？细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法；如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？直接灭菌后丢弃之。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
Earles's cells细胞系相关产品：BC3 H1细胞、OCI-LY-8细胞、NCI-SNU-C2B细胞 
SF-295细胞系相关产品：HSMC细胞、SUM-149PT细胞、Ly8细胞 
NRK49F细胞系相关产品：SN4741细胞、GM04678细胞、3T3-L1 ad细胞 
SCC-25细胞系相关产品：ZR75-1细胞、HUT 28细胞、RPMI #1846细胞 
COLO-320HSR细胞系相关产品：UACC-812细胞、G-401细胞、NIH3T3细胞 
SKRC20细胞系相关产品：C32 mel细胞、SV40-HCEC细胞、CCD-112CoN细胞 
CHO cell clone K1细胞系相关产品：HCC-95细胞、SKNSH细胞、HCC9724细胞 
H2444细胞系相关产品：H1437细胞、NCI-H1568细胞、SW 48细胞 
MT-2细胞系相关产品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16细胞、SKNO-1细胞、RPTEC TERT1细胞 
RPVSMC细胞系相关产品：SUM-149细胞、NCI-H1651细胞、NCIH1975细胞 
Medical University of Graz-Chordoma 1细胞系相关产品：HEH2细胞、CA46细胞、B95-8细胞 
P19细胞系相关产品：KYSE140细胞、LN-18细胞、L 363细胞 
MDCK细胞系相关产品：SK-BR-3细胞、PNEC30细胞、293/EBNA-1细胞 
mRMEC细胞系相关产品：A375mel细胞、SCL-II细胞、SK-GT-2细胞 
SNU-886细胞系相关产品：SuDHL 2细胞、RBL 1细胞、MIN-6细胞 
H1436细胞系相关产品：Hep 2细胞、NRK clone 49F细胞、D6P2T细胞 
NCI-H1819细胞系相关产品：NCIH2110细胞、KYSE 510细胞、CNE1细胞 
Okayama University Medical School-23细胞系相关产品：OC-316细胞、H-2108细胞、ELD-1细胞 
ChaGo K-1细胞系相关产品：UCH1细胞、HIT clone T15细胞、KYSE 510细胞 
T2细胞系相关产品：HCC-38细胞、Mel-624细胞、Hs-695-T细胞 
CNE-2Z 人鼻咽癌细胞系
NCIH2081细胞系相关产品：74Int细胞、HPAFII细胞、Homo sapiens No. 578, breast cells细胞 
HLE B-3细胞系相关产品：M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b细胞、Ly1细胞、CZ-1细胞 
C-643细胞系相关产品：AD293细胞、RA.1细胞、Granta519细胞 
MHCC 97细胞系相关产品：LL2细胞、EL-4细胞、MDA-kb2细胞 
NCIH1793细胞系相关产品：D-324 Med细胞、GM04154B细胞、NCIH82细胞 
3AA细胞系相关产品：Centre Antoine Lacassagne-12T细胞、LN299细胞、F9细胞 
PaCa2细胞系相关产品：NTera-2D1细胞、118MG细胞、OCILY19细胞 
PSN-1细胞系相关产品：BJ1细胞、NB-19细胞、293E细胞 
HEK-293-H细胞系相关产品：LK-2细胞、Reh细胞、SHG 44细胞 
NCI-157细胞系相关产品：KP-N-RT细胞、NCIH378细胞、HCC0038细胞 
HPDEC细胞系相关产品：COLO_320DM细胞、Jurkat Clone E6-1细胞、HRGEC细胞 
HEK293EBNA细胞系相关产品：OACP4 C细胞、NCIH2110细胞、3AA细胞 
HT 144细胞系相关产品：CNE1-LUC细胞、UMC-11细胞、PC-9细胞 
SP-2/0-AG14细胞系相关产品：LAD2细胞、MN60细胞、KP-N-NS细胞 
TGBC11T细胞系相关产品：Co 205细胞、CLONE M3细胞、CMT167细胞 
CF Pac1细胞系相关产品：bEND.3细胞、32D-Cl3细胞、HCC-1588细胞 
N9细胞系相关产品：KB细胞、KU-812-F细胞、HT144mel细胞 
SNU601细胞系相关产品：KYSE0030细胞、WiDr-TC细胞、KPNRTBM1细胞 
SKNBE-1细胞系相关产品：SKOV-433细胞、BC3H-1细胞、JS1细胞 
Hep-G2细胞系相关产品：Emory University-2细胞、FK81细胞、CCC-HSF-1细胞 
KHYG1细胞系相关产品：no-11细胞、Michigan Cancer Foundation-12A细胞、P30OHK细胞 
CCC-HEH-2细胞系相关产品：SK-GT-4细胞、Tn5 B1-4细胞、MESSADX5细胞 
LMH细胞系相关产品：SAOS 2细胞、Madin-Darby Canine Kidney细胞、NCI-H920细胞 
PLA802细胞系相关产品：CaES-17细胞、HS-5细胞、CCD-19Lu细胞 
SH-SY5Y细胞系相关产品：HMEC1细胞、COR L279细胞、ES-2细胞 
Y3-Ag123细胞系相关产品：C4-1细胞、SK RC 20细胞、Hep-G2/C3A细胞 
Jurkat E6.1细胞系相关产品：H-1869细胞、H2291细胞、NCI522细胞 
AQ-Mel细胞系相关产品：SUM149PT细胞、NCI522细胞、Jurkat E6.1细胞 
LK2细胞系相关产品：H3396细胞、PaTu 8988 S细胞、PC-3M 2B4细胞 
CCK-81细胞系相关产品：H6c7细胞、MA-c细胞、Mouse Colon 38细胞 
SK-Mel 2细胞系相关产品：GMK,BSC-1细胞、YAC细胞、Tb 1 Lu细胞 
TC7细胞系相关产品：KMBC细胞、LC2/Ad细胞、A-72细胞 
PANC-1细胞系相关产品：HIEC-6细胞、HIT T15细胞、Leghorn Male Hepatoma cell line细胞 
CFPAC细胞系相关产品：NCIH524细胞、HEL9217细胞、DMS-153细胞 
UMR 106细胞系相关产品：SW 1990细胞、BSC1细胞、PC-3M-IE8细胞 
MES-SA/Dx-5细胞系相关产品：RS1细胞、HEK 293T/17细胞、HSCT6细胞 
B16F0细胞系相关产品：HEK-293-FT细胞、NCI H2106细胞、MLA144细胞 
SF-539 BT细胞系相关产品：SCL1细胞、Liver-02细胞、RMC细胞 
GP293细胞系相关产品：KU 812细胞、CL-11细胞、BMSC/hBMSCs细胞 
HPB/ALL细胞系相关产品：SP-2/0-AG14细胞、H-1299细胞、HGBEC细胞 
WPMY1细胞系相关产品：TJ905细胞、SNU-C1细胞、KYSE 140细胞 
CNE-2Z 人鼻咽癌细胞系
NCl-H157细胞系相关产品：BC-027细胞、HITT15细胞、MDA-134细胞 
Centre Antoine Lacassagne-51细胞系相关产品：LWnt-3A细胞、HT 1197.T细胞、SRA01/04细胞 
P19细胞系相关产品：KYSE140细胞、LN-18细胞、L 363细胞 
OCILY-3细胞系相关产品：Hs 888Lu细胞、Walker/LLC-WRC256细胞、P3X63 Ag8.653细胞 
KNS-42细胞系相关产品：P-388D1细胞、mRMEC细胞、T47-D细胞 
Caco-2/BBe 1细胞系相关产品：SW620细胞、RA-FLSs细胞、SK HEP-1细胞 
HCC1954 BL细胞系相关产品：Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50细胞、HPC-Y5细胞、SW 900细胞 
KMH2细胞系相关产品：SKNBE(2)细胞、ARIP细胞、PG-4 (S+L-)细胞 
TF-1a细胞系相关产品：Karpas299细胞、KYSE-140细胞、S37细胞 
TOV21G细胞系相关产品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞、NTHY-ORI3.1细胞、253J细胞 
UCLA-SO-M21细胞系相关产品：NK92MI细胞、DH-82细胞、Sarcoma OSteogenic-2细胞 
NRK49F细胞系相关产品：SN4741细胞、H23细胞、NF639细胞 
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