R2C 大鼠睾丸间质细胞系

"R2C 大鼠睾丸间质细胞系
细胞背景资料：睾丸间质瘤；雄性；Wistar Furth 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞培养方面注意的几点：无菌意识要强：实验进行前，超净台以紫外灯照射３０分钟灭菌，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启超净工作台风扇运转数分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置，其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以７０%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域，一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约４５°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基：不同的细胞可能培养基不同，甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞，有文献就选用neurobase培养基，而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而这种培养基中含有抗氧化剂成分，此时，我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:４℃冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指５６℃，３０分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到５６℃后，将血清放入，待温度升高到５６℃后计时，一般５分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须，一般不要作此热处理，因为会造成沉淀物之显著增多，且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
R2C 大鼠睾丸间质细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
公司细胞库冻存并保种有2300多种各类细胞系。针对每种不同的细胞系，公司摸索并积累了大量细胞培养条件和优化参数，为您的细胞实验保驾护航。细胞培养是生命科学研究中最基础、也是最常用的实验手段。从冻存→复苏→传代→实验，在每一次细胞培养的过程中我们都是精心呵护，小心培养，心里都是默默承诺：我要护你一世周全！可是可是……无数次细胞都因污染而离我而去，投入的不只是我们貌美如花的青春，还有那一去不复返的经费！在细胞生物学，生物化学，免疫学，神经生物学，病理学……只要涉及细胞的研究领域，都面临着支原体污染的威胁。在众多污染物中，也就属支原体最狡猾了，他最善于隐藏自己，因为被支原体污染的细胞不会马上死亡，但会改变细胞的新陈代谢，甚至会改变细胞的基因表达谱，我们就这样被欺骗了无数次，谁让我们就是个看“颜值”的花痴了。可是我们通过被虐了几百次的经验中总结出来，当你的细胞出现了这些症状时：生长速率改变；活性减弱；形态改变；染色体畸变；转染效率显著降低；细胞复苏后存活率降低……。那你就得千万小心了，也许你的细胞已经被支原体欺凌了！ 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁 
R2C 大鼠睾丸间质细胞系
细胞传代时消化的问题：可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好最至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。（以难消化细胞为例）；具体操作：１)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗１-２遍，（这是前奏，即为步，目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。２)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。）３)吸干净瓶内剩余液体，加入０.３ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净子弹头里备用，加入新培养基开始吹打，吹打２-３遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用２ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。（你也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比。）这是第三步。４)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，呵呵。继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况你自己把握）。这是第四步。其实还可以有第五步，对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话，你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态，更漂亮的样子，没办法，你必须分多批多次消化，这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到最低，保证细胞的状态能够。当然了，如果细胞是属于那种很容易消化的细胞，像RAW２６４.７，仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较，去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步，除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外，还有一个更重要的作用就是，可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态，不成片不连体。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
C57 Mouse Tumor 64细胞系相关产品：BALB/3T3细胞、MDAPCa2b细胞、RT-4细胞 
MX-1细胞系相关产品：HFE-145细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8细胞、N-2a细胞 
MASMC细胞系相关产品：MDA-MB-468-RED细胞、K562/ADR细胞、RPMI8226细胞 
HEC-251细胞系相关产品：GM17346细胞、SV40-MES13细胞、MDA-MB361细胞 
PIG1细胞系相关产品：L78细胞、FTC133细胞、SKMEL24细胞 
C8D1A细胞系相关产品：NCIH1930细胞、HELA-GFP细胞、Dunn LM8细胞 
HPDE6c7细胞系相关产品：B16F1细胞、BCPAP细胞、RCC 786-O细胞 
MGH-U1细胞系相关产品：OCI-AML2细胞、IM-9细胞、GM02219C细胞 
SKCO 1细胞系相关产品：TE32细胞、JJN3细胞、MDA-MB 231细胞 
TE353.SK细胞系相关产品：Calu-3细胞、P3/NSI/1-AG4-1细胞、BC-021细胞 
CL-34细胞系相关产品：MDA134细胞、IOSE-29细胞、Hep 3B细胞 
NCIH1435细胞系相关产品：CHG-5细胞、293-GP细胞、JIII细胞 
SAS细胞系相关产品：GA-10-Clone-4细胞、NPA细胞、H-650细胞 
NCIH2291细胞系相关产品：Mouse Colon 38细胞、WB F344细胞、KE37细胞 
PaCa2细胞系相关产品：NTera-2D1细胞、118MG细胞、OCILY19细胞 
Plaepi 34细胞系相关产品：MDA PCa 2b细胞、NBL_S细胞、CA922细胞 
Plaepi 34细胞系相关产品：MDA PCa 2b细胞、NBL_S细胞、CA922细胞 
RGCs细胞系相关产品：SK-MES-1细胞、C81-61细胞、3T6 Swiss Albino细胞 
Ramos 2G6 4C10细胞系相关产品：PANC-04-03细胞、TE-85细胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea细胞 
PTK2细胞系相关产品：JIII细胞、OVCAR3细胞、MDA-MB-435 S细胞 
R2C 大鼠睾丸间质细胞系
RF/6A细胞系相关产品：HT-29/CX-1细胞、RGM1细胞、LU65细胞 
MHCC-LM3细胞系相关产品：C-28I2细胞、JROECL19细胞、Hs934T细胞 
RT-BM 1细胞系相关产品：B95.8细胞、SK MEL-28细胞、CemT4细胞 
HCO细胞系相关产品：SNU368细胞、Wien 133细胞、SJSA-1细胞 
JURKAT E-6.1细胞系相关产品：MEL细胞、NCIH647细胞、Balb/c3T3细胞 
RPMI-7951细胞系相关产品：HDQP1细胞、SBC-3细胞、TC-1 [Mouse lung]细胞 
J774细胞系相关产品：LuCL4细胞、SKM1细胞、H-2066细胞 
Mv.1.Lu细胞系相关产品：YAC细胞、BC-027细胞、LICCF细胞 
RPVSMC细胞系相关产品：SUM-149细胞、NCI-H1651细胞、NCIH1975细胞 
HTh 74细胞系相关产品：MDA-MB-415细胞、GM00637细胞、IOSE-Mar细胞 
NCI-H2171细胞系相关产品：AN3细胞、Walker/LLC-WRC 256细胞、RCK8细胞 
HEK293T/17细胞系相关产品：SKNSH细胞、University of Arizona Cell Culture-893细胞、SUM149PT细胞 
FDCP-1细胞系相关产品：M21细胞、HCC1599细胞、GT1-1细胞 
INS-1细胞系相关产品：BALL1细胞、22Rv1细胞、COLO 206细胞 
Hs 729细胞系相关产品：SK Hep1细胞、YES-2细胞、JB-6 Cl 30细胞 
HCC1937细胞系相关产品：JROECL 21细胞、SHSY-5Y细胞、DMS53细胞 
BIU87细胞系相关产品：H2591细胞、NCI-H358细胞、HSAEC1-KT细胞 
huH 1细胞系相关产品：Lewis lung carcinoma细胞、D283 Med细胞、343MG细胞 
MV-522细胞系相关产品：SUM 102细胞、451-LU细胞、Caki2细胞 
J-82细胞系相关产品：293EBNA细胞、MDA-175细胞、NCI-H2172细胞 
SUM149细胞系相关产品：KBM7细胞、PA317细胞、SP-2/0-AG14细胞 
MV4-11细胞系相关产品：EBTr (NBL-4)细胞、AC16 [Human hybrid]细胞、SKLU01细胞 
MDA157细胞系相关产品：Mink Lung细胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞、UCLA NPA-87-1细胞 
Panc203细胞系相关产品：SCH细胞、HCASMC细胞、Human podocyte细胞 
BIU87细胞系相关产品：H2591细胞、NCI-H358细胞、HSAEC1-KT细胞 
A498细胞系相关产品：H-196细胞、C2-C12细胞、OSC19细胞 
LoVo细胞系相关产品：KYSE 270细胞、SNU878细胞、NCI-H1105细胞 
Wistar Institute-38细胞系相关产品：PK(15)细胞、WM115细胞、PC 61-5-3细胞 
MKN-45细胞系相关产品：SHSY-5Y细胞、HPB/ALL细胞、MCF-7细胞 
TGW-nu细胞系相关产品：SKNEP细胞、OCI Ly10细胞、TE-85细胞 
SNUC1细胞系相关产品：HSC3细胞、PY8119细胞、AML-EOL-1细胞 
L540细胞系相关产品：MES-SA/Dx5细胞、P31 FUJ细胞、RS(4;11)细胞 
Kuramochi细胞系相关产品：OCI-AML-4细胞、OP9细胞、SNU-C1细胞 
N-2a细胞系相关产品：SUDHL16细胞、B16-BL6细胞、NCI.H226细胞 
PC9细胞系相关产品：CNE1细胞、HME-1细胞、SU-DHL-6细胞 
NCI-H1105细胞系相关产品：NCI-H1694细胞、RKO-E6细胞、Sup T-1细胞 
OV 2008细胞系相关产品：FOXNY细胞、HFF-1细胞、NCI-H78细胞 
HeLa/S3细胞系相关产品：Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1细胞、NCTC1469细胞、GP-293细胞 
MDA-kb2细胞系相关产品：COLO-699细胞、ketr 3细胞、P3/NS1/1-Ag4-1细胞 
L-132细胞系相关产品：CAL851细胞、EVSA/T细胞、OCI/AML5细胞 
U266细胞系相关产品：MV-4-11细胞、H1993细胞、AZ-521细胞 
R2C 大鼠睾丸间质细胞系
LNCaP C4-2细胞系相关产品：SW480E细胞、DI TNC-1细胞、NK92细胞 
H-1930细胞系相关产品：PaCa2细胞、HS-294-T细胞、253J-BV细胞 
AU 565细胞系相关产品：Det 562细胞、OCM1细胞、WC00097细胞 
HL-60 Clone 15细胞系相关产品：HHUA细胞、Roswell Park Memorial Institute 7666细胞、TE-6细胞 
NCIH820细胞系相关产品：HBE细胞、SNU-668细胞、SKBr3细胞 
SEG1细胞系相关产品：NCI H929细胞、MDA-435细胞、Jurkat E6细胞 
GM17219细胞系相关产品：SUM159细胞、BT483细胞、Hs-852-T细胞 
A498细胞系相关产品：H-196细胞、C2-C12细胞、OSC19细胞 
U031细胞系相关产品：HEL299细胞、NCIH1385细胞、CCF-STTG1细胞 
ACC-2细胞系相关产品：NCIH226细胞、Tb 1 Lu (NBL-12)细胞、OE19细胞 
Centre Antoine Lacassagne-27细胞系相关产品：MDA435细胞、Tokyo Medical and Dental university 8细胞、Mv1Lu细胞 
MASMC细胞系相关产品：MDA-MB-468-RED细胞、NIH/3T3细胞、NCI-H1963细胞 
"