HuLEC-5a 人肺微血管内皮细胞系

"HuLEC-5a 人肺微血管内皮细胞系
细胞背景资料：肺微血管；内皮细胞；SV４０转化 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞传代培养的胰酶消化法：传代培养：是指细胞从一个培养瓶以１：２或１：２以上的比例转移，接种到另一培养瓶的培养。传代细胞，可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代，部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代，或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤：①入无菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒双手；②倒置显微镜下观察细胞形态，确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液３７℃下预热；③超净台台面应整洁，用７５%酒精棉球擦拭清洁；④打开超净工作台的紫外灯照射台面２０min左右，关闭紫外灯，打开风机清洁空气除去臭氧；⑤点燃酒精灯;取出无菌试管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内；⑥将培养用液瓶口用７５%酒精消毒，过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上；⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去残留的就培养基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每个大培养瓶加入１ml胰酶，小培养瓶用量酌减，盖好瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶，使细胞脱离胰酶，然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鲜培养基，反复吹打消化好的细胞使其脱壁并分散，再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成细胞悬液，然后分装到新培养瓶中。盖好瓶盖，适度拧紧后稍回转，以利于CO２的进入，将培养瓶放回CO２培养箱；⑩对悬浮培养细胞，步骤７-９不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清，加入新鲜培养基，然后分装到各瓶中。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
HuLEC-5a 人肺微血管内皮细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
公司细胞库冻存并保种有2300多种各类细胞系。针对每种不同的细胞系，公司摸索并积累了大量细胞培养条件和优化参数，为您的细胞实验保驾护航。细胞培养是生命科学研究中最基础、也是最常用的实验手段。从冻存→复苏→传代→实验，在每一次细胞培养的过程中我们都是精心呵护，小心培养，心里都是默默承诺：我要护你一世周全！可是可是……无数次细胞都因污染而离我而去，投入的不只是我们貌美如花的青春，还有那一去不复返的经费！在细胞生物学，生物化学，免疫学，神经生物学，病理学……只要涉及细胞的研究领域，都面临着支原体污染的威胁。在众多污染物中，也就属支原体最狡猾了，他最善于隐藏自己，因为被支原体污染的细胞不会马上死亡，但会改变细胞的新陈代谢，甚至会改变细胞的基因表达谱，我们就这样被欺骗了无数次，谁让我们就是个看“颜值”的花痴了。可是我们通过被虐了几百次的经验中总结出来，当你的细胞出现了这些症状时：生长速率改变；活性减弱；形态改变；染色体畸变；转染效率显著降低；细胞复苏后存活率降低……。那你就得千万小心了，也许你的细胞已经被支原体欺凌了！ 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁 
HuLEC-5a 人肺微血管内皮细胞系
细胞培养过程中相关问题总结：悬浮性细胞应如何继代处理？一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００xg(约１,０００rpm)，５-１０分钟，过高之转速，将造成细胞死亡；细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因；细胞冷冻培养基之成份为何？动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成；DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO等级，必须为Tissue culture grade之DMSO，其本身即为无菌状况，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于４°C，避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质，并可减少污染之机会。若要过滤DMSO，则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜；冷冻保存细胞之方法？冷冻保存方法一：冷冻管置于４°C ３０~６０分钟→ (-２０°C ３０分钟)→-８０°C １６~１８小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase长期储存。-２０°C不可超过１小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？冷冻管内细胞数目一般为１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤细胞则以５x１０(６)cells/ml vial为宜；应如何避免细胞污染？细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法；如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？直接灭菌后丢弃之。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
CORL23细胞系相关产品：DoTc2细胞、Madin Darby Bovine Kidney细胞、RF/6A细胞 
SUM 159细胞系相关产品：C8-D1A细胞、IALM细胞、NCI-H2066细胞 
H-441细胞系相关产品：769-P细胞、OVCAR 5细胞、SUM-190PT细胞 
CHO细胞系相关产品：MT-2细胞、EVSAT细胞、HECCL-1细胞 
NCI/ADRRES细胞系相关产品：118 MG细胞、WiDr/S细胞、ACCM细胞 
Jijoye细胞系相关产品：D283细胞、SRA 01/04细胞、Mo 59J细胞 
CMT 167细胞系相关产品：LLC-PK(1)细胞、VERO76细胞、RL95-2细胞 
McA-RH 7777细胞系相关产品：H157细胞、Gerner 7666细胞、COR-L279细胞 
M109细胞系相关产品：JAR细胞、RGC5细胞、Hs895.T细胞 
JM细胞系相关产品：NCI-H929细胞、Pro-5WgaRI3C细胞、GM03190A细胞 
SR细胞系相关产品：RPMI 1788细胞、CaEs17细胞、MALME.3M细胞 
Centre Antoine Lacassagne-39细胞系相关产品：Mv 1 Lu (NBL-7)细胞、High 5细胞、CD 18细胞 
RCC4细胞系相关产品：KM933细胞、NCI-SNU-423细胞、HEK 293-F细胞 
CTLL2细胞系相关产品：HeLa-S3细胞、CCRF SB细胞、NCI-H125细胞 
LC-1-sq细胞系相关产品：RH35细胞、P30OHK细胞、Panc_03_27细胞 
MOLT 16细胞系相关产品：R.K.13细胞、HANK1细胞、NS20-Y细胞 
A549ATCC细胞系相关产品：H-1435细胞、SJCRH30细胞、RGB细胞 
RSC96细胞系相关产品：PG [Human lung carcinoma]细胞、H-322细胞、Y 1细胞 
G-Olig2细胞系相关产品：C3H10T1-2细胞、SNUC1细胞、Calu 6细胞 
NCI-H460细胞系相关产品：SK Mel28细胞、NCI-H1793细胞、SW 480细胞 
HuLEC-5a 人肺微血管内皮细胞系
786.O细胞系相关产品：NCIH2347细胞、Caov-3细胞、NCIH1838细胞 
MDA-MB-453细胞系相关产品：H-2444细胞、C57 Mouse Tumor 64细胞、HS-729细胞 
MDA231-LM2-4175细胞系相关产品：CSQT-2细胞、Leukemia L1210细胞、HCT-FET细胞 
NOZC-1细胞系相关产品：F442A细胞、MFE-280细胞、Hs 636.T细胞 
KYSE-140细胞系相关产品：MDA-MB-453细胞、PCI-SG231细胞、BV-2细胞 
MOLT-4细胞系相关产品：HEL92.1.7细胞、RGC-5细胞、SNU668细胞 
CCK81细胞系相关产品：HLE-B3细胞、IOSE29细胞、NCI H23细胞 
TE-14细胞系相关产品：A-20细胞、C33A细胞、HEC1A细胞 
CoCL2细胞系相关产品：HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞、143BTK-细胞、J774A.1细胞 
Soleus clone 8细胞系相关产品：Rat Glomerular Endothelial细胞、HT 1080细胞、OCI-LY-10细胞 
BERH-2细胞系相关产品：MM1-S细胞、HL-7702细胞、Roswell Park Memorial Institute 2650细胞 
NCIH64细胞系相关产品：Colo-201细胞、HL-1细胞、HOP62细胞 
NCIH2170细胞系相关产品：Karpas-422细胞、Roswell Park Memorial Institute 8226细胞、OCILY7细胞 
BCP1细胞系相关产品：M4e细胞、SK-CO-1细胞、IOSE29细胞 
TALL-104细胞系相关产品：Mino细胞、LTEP-sm 1细胞、HEK-293-EBNA细胞 
Ball 1细胞系相关产品：KM-H2细胞、HMEC1细胞、GM03569B细胞 
EBNA293细胞系相关产品：HSC-I细胞、OV-1063细胞、MiaPaCa2细胞 
A-1847细胞系相关产品：SL-29细胞、HuTu-80细胞、6-T CEM细胞 
NeHepLxHT细胞系相关产品：SNU-C2A细胞、SLMT1细胞、SNU449细胞 
NCI-H660细胞系相关产品：SK-MEL5细胞、GM03573细胞、LS 1034细胞 
PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞系相关产品：SHSY5Y细胞、QBI-293A细胞、NCIH1623细胞 
H1666细胞系相关产品：Hs 888.Lu细胞、H-2122细胞、LA795细胞 
NP-69细胞系相关产品：H-4-II-E细胞、Huh7.5细胞、NCIH1105细胞 
LLCMK2细胞系相关产品：L615细胞、Hs888Lu细胞、Hs_578t细胞 
PIG3细胞系相关产品：HT 29细胞、786-O RCC细胞、JURKAT E-61细胞 
RAW-264.7细胞系相关产品：HCC1937细胞、G361细胞、NCIH2029细胞 
H-716细胞系相关产品：CHL-IU细胞、KYSE140细胞、MGH-U3细胞 
NCI-H748细胞系相关产品：ARH 77细胞、Embryonic Bovine Tracheal cells细胞、COR-L26细胞 
B95-8细胞系相关产品：TE 32.T细胞、CoC1细胞、118MG细胞 
Highly Aggressively Proliferating Immortalized细胞系相关产品：THP 1细胞、IGR-OV1细胞、BHK-21细胞 
HK2细胞系相关产品：OCI-Ly 10细胞、2E8细胞、H-4-II-E细胞 
SG231细胞系相关产品：K7M2细胞、32Dc3细胞、MRMT-1细胞 
HCGC细胞系相关产品：BC3H-1细胞、PG-BE1细胞、OCUM-1细胞 
FDCP1细胞系相关产品：RT4P细胞、CCRF/CEM细胞、COR-L23细胞 
Vero C1008细胞系相关产品：COLO 206F细胞、SU 86.86细胞、TW01细胞 
SW260细胞系相关产品：OVCAR-10细胞、PLMVEC细胞、PG-4(S+L-)细胞 
NL-20细胞系相关产品：RERF-LC-MS细胞、9L细胞、Hs832.Tc细胞 
2BS细胞系相关产品：alphaTC1 Clone 6细胞、NCI-H2030细胞、H69细胞 
SKG IIIa细胞系相关产品：HS578T细胞、NIH:OVCAR-3细胞、WEHI 3细胞 
FLC-7细胞系相关产品：B16 F10细胞、B95-8细胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1细胞 
MC9细胞系相关产品：CCD1112Sk细胞、KYSE-180细胞、0V-1063细胞 
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Pan02细胞系相关产品：OVCAR.5细胞、JTC-28细胞、EHEB细胞 
SNU638细胞系相关产品：NIH:OVCAR3细胞、SP2-0-Ag14细胞、AD293细胞 
LLC-WRC 256细胞系相关产品：HuNS1细胞、HEEpiC细胞、MHCC-LM3细胞 
Caco-2/BBe 1细胞系相关产品：SW620细胞、RA-FLSs细胞、SK HEP-1细胞 
SK-MES1细胞系相关产品：G519细胞、MCF7-CTRL细胞、MB468细胞 
RIN14B细胞系相关产品：CFSC-8B细胞、SCC-15细胞、LC-1-sq细胞 
TB1 Lu细胞系相关产品：SK_HEP1细胞、P3HR-1细胞、LA-N-1细胞 
H2081细胞系相关产品：hFOB细胞、NCI-H2171细胞、CP70细胞 
MDAPC2B细胞系相关产品：M07e细胞、H2106细胞、SF539细胞 
JHH-7细胞系相关产品：GM03671细胞、NCI-H1954细胞、RMS1598细胞 
H661细胞系相关产品：ABC1细胞、WML2细胞、V 79细胞 
H-378细胞系相关产品：SW839细胞、SK-MEL2细胞、Leukemia L1210细胞 
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