HSC-6 人口腔鳞癌细胞系

"HSC-6 人口腔鳞癌细胞系
细胞背景资料：口腔鳞癌 
细胞形态：上皮细胞样 
购买细胞注意事项：１)收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系；２)仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等；３)用７５%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次；４)建议客户收到细胞后前３天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和公司技术部沟通交流。【细胞传代操作步骤】一、贴壁细胞传代：１)提前将培养基、PBS放入３７℃水浴锅内预热，用７５%酒精擦拭后再放入超净台内；２)吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞；３)加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，３７℃孵育，每隔２~３min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用；４)用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡；５)将细胞悬液分别接种到另外的２~３个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置３７℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。二、悬浮细胞传代：１)将细胞悬液转移到无菌离心管内，１０００rpm离心５min；２)弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液；３)将细胞悬液分别接种到另外的２~３个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置３７℃温箱培养。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
HSC-6 人口腔鳞癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞建议只吹打，不消化）其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁 
HSC-6 人口腔鳞癌细胞系
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系，大部分的细胞都是要成片生长的，尤其是对于贴壁细胞，单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话，传代后细胞是不能贴壁的，这样抱团的细胞就会死亡。所以，消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态，这个啊是非常考究你的功夫的！细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个，因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开，受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊，这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来，又不能太过，一吹就整片脱落，要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-２细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到７０%左右的时候就要传代了，一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞，你在洗的时候如果是用无血清１６４０去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样，用１６４０培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话，可以用PBS来洗，洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的，对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清，防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先，是很关键的一点。先补充这么多，还会后续更新。再补充一点：传代时PBS洗是很重要的一步，最近发现，用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置１０-１５分钟，有些需要更长的时间，等到细胞一个个分离开来的时候，就可以直接吹打下来，但是和胰酶消化一样，要控制好时间，不能时间太过了，要不然损伤细胞，细胞不容易成活，状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候，或者临时没有胰酶了，可以选用此方法。不过一定要试试，看是否适合你的细胞。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
AR42J细胞系相关产品：COR-L88细胞、TI-73细胞、HeLa S 3细胞 
NBL-4细胞系相关产品：UMRC-2细胞、Simpson细胞、NCI-H498细胞 
Hs 863.T细胞系相关产品：CHO-Lec1细胞、A431细胞、WEHI-231细胞 
SCL2细胞系相关产品：MD Anderson-Metastatic Breast-415细胞、4175细胞、TFK-1细胞 
22Rv-1细胞系相关产品：SGC7901细胞、HCC-70细胞、Monomac-1细胞 
Ra #1细胞系相关产品：PC-10细胞、MDAMB157细胞、H-1781细胞 
HEL9217细胞系相关产品：Kato-III细胞、H1836细胞、TE 85.T细胞 
KMY1022细胞系相关产品：OCILY-19细胞、CT26.CL25细胞、HCC0095细胞 
MC-26细胞系相关产品：HCC-1428细胞、C3A细胞、Hs 683细胞 
SK-MEL5细胞系相关产品：HemECs细胞、HUT-28细胞、SW 403细胞 
HuT 78细胞系相关产品：LS 174T细胞、SKMEL3细胞、ST细胞 
KYSE-30细胞系相关产品：95-D细胞、NCTC929细胞、3T3 L1细胞 
U251n细胞系相关产品：IM-9细胞、NCIH748细胞、H-1672细胞 
H2108细胞系相关产品：MES-13细胞、H-2405细胞、NCIH69细胞 
WERI-Rb-1细胞系相关产品：HDLM-2细胞、RT112细胞、UM-UC-1细胞 
MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞系相关产品：Ketr-3细胞、HAPI细胞、C-6细胞 
SKRC20细胞系相关产品：C32 mel细胞、SV40-HCEC细胞、CCD-112CoN细胞 
PL 45细胞系相关产品：RK 13细胞、HC-11细胞、Human Embryo Lung-1细胞 
C-4I细胞系相关产品：BMF细胞、YH-13细胞、Pa18C细胞 
HPB/ALL细胞系相关产品：SP-2/0-AG14细胞、H-1299细胞、HGBEC细胞 
HSC-6 人口腔鳞癌细胞系
AG06814-M细胞系相关产品：J774 A.1细胞、SNU-761细胞、Walker/LLC-WRC256细胞 
Clone M-3细胞系相关产品：MDA-MB435细胞、MOPC细胞、SNU-368细胞 
TOV21细胞系相关产品：H-1563细胞、MDA-231细胞、OCI-Ly18细胞 
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SKMES1细胞系相关产品：MG63细胞、NU-GC-4细胞、SW-982细胞 
H-209细胞系相关产品：253J-BV细胞、UCLA RO-81A-1细胞、KS-1 [Human glioblastoma]细胞 
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Functional Liver Cell-7细胞系相关产品：OK-WT细胞、BC-3H-1细胞、CAMA1细胞 
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Psi2-DAP细胞系相关产品：Ca759细胞、UACC812细胞、TC-1[JHU-1]细胞 
Namalwa细胞系相关产品：A 253细胞、CV-1 in Origin Simian-7细胞、Mc Ardle 7777细胞 
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Medical Research Council cell strain-9细胞系相关产品：NCIH441细胞、T24(ECV304)细胞、H4-II-E-C3细胞 
A 2780 CP细胞系相关产品：SW-620细胞、SKNBE-1细胞、NCI-H1838细胞 
MDA361细胞系相关产品：HCC0038细胞、RCC 786-O细胞、QG56细胞 
Huh-7.5细胞系相关产品：HEK 293-H细胞、NCI-H510细胞、MA104细胞 
HSC-6 人口腔鳞癌细胞系
HSC3细胞系相关产品：Panc3_27细胞、NCI-H498细胞、HuTu-80细胞 
NCI-H2009细胞系相关产品：CHP 212细胞、LS 174T细胞、WEHI3细胞 
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ACC-3细胞系相关产品：4T1-LUC细胞、HRA 19细胞、SUM-149细胞 
BNL-CL.2细胞系相关产品：NW-MEL-38细胞、HSF细胞、P31-FUJ细胞 
H-2073细胞系相关产品：Sf21细胞、KMB17细胞、Huh-7细胞 
REC 1细胞系相关产品：HCC-4006细胞、U266B1细胞、HOS (TE85, Clone F5)细胞 
OCI/AML5细胞系相关产品：ACC3细胞、Panc 8.13细胞、B16 F10细胞 
H1651细胞系相关产品：OVSAHO细胞、LC-2-Ad细胞、SkChA1细胞 
RGM-1细胞系相关产品：RCC_7860细胞、BCPAP细胞、MIN6细胞 
H.Ep. #2细胞系相关产品：H1792细胞、ND7/23细胞、ChaGo-K1细胞 
Hs 852.T细胞系相关产品：IR 983F细胞、RD 2细胞、CEM-CCRF细胞 
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