NCI-H498 人结直肠腺癌细胞系

"NCI-H498 人结直肠腺癌细胞系
细胞背景资料：结肠腺癌；男性 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞传代注意事项：①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材；②每天观察细胞形态，掌握好细胞是否健康的标准：健康细胞的形态饱满，折光性好，生长致密时即可传代；③如发现细胞有污染迹象，应立即采取措施，一般应弃置污染的细胞，如果必须挽救，可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗，随后培养基中加入较大量的抗生素，并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持：细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的特点，要做好建系的维持必须记录好细胞档案,换液传代和做好细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
NCI-H498 人结直肠腺癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
冻存和复苏的原则：慢冻快融》当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序：采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时，1~2℃/min；当温度达-25℃以下时，5~10℃/min；当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中。2.简易程序：将冷冻管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱布袋系以线绳，通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口，按每分钟温度下降1~2℃的速度，在40min内降至液氮表面过夜，次晨投人液氮中。3.传统程序：冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时（或隔夜）→液氮槽长期储存。细胞冻存方法：1.预先配制冻存液》（1）8%DMSO+细胞生长液（92%血清）2.取对数生长期细胞，经胰酶消化后，加入适量冻存液，用吸管吹打制成细胞悬液（1×10(6)~5×10(6)细胞/ml）。3.加入1ml细胞于冻存管中，密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法：1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，轻轻摇动冷冻管，使其在1分钟内全部融化（不要超过3分钟）。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养，24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液，以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂特别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂，然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：半贴壁 
NCI-H498 人结直肠腺癌细胞系
细胞培养过程中相关问题总结：悬浮性细胞应如何继代处理？一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００xg(约１,０００rpm)，５-１０分钟，过高之转速，将造成细胞死亡；细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因；细胞冷冻培养基之成份为何？动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成；DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO等级，必须为Tissue culture grade之DMSO，其本身即为无菌状况，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于４°C，避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质，并可减少污染之机会。若要过滤DMSO，则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜；冷冻保存细胞之方法？冷冻保存方法一：冷冻管置于４°C ３０~６０分钟→ (-２０°C ３０分钟)→-８０°C １６~１８小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase长期储存。-２０°C不可超过１小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？冷冻管内细胞数目一般为１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤细胞则以５x１０(６)cells/ml vial为宜；应如何避免细胞污染？细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法；如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？直接灭菌后丢弃之。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
SKNMC细胞系相关产品：KU812-F细胞、BC-028细胞、CAL 39细胞 
ARO-81细胞系相关产品：CT-26细胞、RCC4细胞、SK-N-BE(1)细胞 
TE-7细胞系相关产品：Human Intestinal Epithelial Cell-6细胞、MGH-UI细胞、H2291细胞 
Panc_03_27细胞系相关产品：A2780/Taxol细胞、Strain KB细胞、GP293细胞 
NCIH2029细胞系相关产品：16-HBE细胞、CFPAC1细胞、Transformed Human Liver Epithelial-3细胞 
HT细胞系相关产品：WM35细胞、MIHA细胞、SNU1细胞 
HUTU80细胞系相关产品：SK-LMS-1细胞、IPECJ2细胞、PCI-SG231细胞 
B16-F0细胞系相关产品：Hs737T细胞、AK细胞、HOEC细胞 
SV-HUC-1细胞系相关产品：Neuro 2a细胞、NCI-UMC-11细胞、NCI-SNU-475细胞 
MC-26细胞系相关产品：HCC-1428细胞、C3A细胞、Hs 683细胞 
NCIH661细胞系相关产品：YTMLC-90细胞、H1618细胞、HUVEC-C[HUVEC]细胞 
NCI-H2108细胞系相关产品：COLO 684细胞、D6P2T细胞、University of Arizona Cell Culture-893细胞 
GM17219细胞系相关产品：SUM159细胞、BT483细胞、Hs-852-T细胞 
526细胞系相关产品：SK-RC-52细胞、LUDLU-1细胞、H548细胞 
U266B1细胞系相关产品：OV433细胞、EO771细胞、OV1063细胞 
Hs 636 T细胞系相关产品：SNG-M细胞、Hs.27细胞、A-101D细胞 
Hs 636 T细胞系相关产品：SNG-M细胞、Hs.27细胞、A-101D细胞 
H-1355细胞系相关产品：CCC-HIE-2细胞、BERH-2细胞、UCLA NPA871细胞 
OVCAR10细胞系相关产品：U 937细胞、LS-180细胞、SAOS 2细胞 
N-9细胞系相关产品：PK15细胞、MSF细胞、CG4细胞 
NCI-H498 人结直肠腺癌细胞系
SBC-3细胞系相关产品：HCC4006细胞、NCIH716细胞、RM-1细胞 
293S细胞系相关产品：CL-34细胞、LC1sq细胞、RBL-2H3细胞 
A375细胞系相关产品：LOUNH91细胞、NTC-200细胞、Lewis Lung Cancer细胞 
C3H/10T1/2 CL8细胞系相关产品：MT4细胞、NUGC3细胞、MCF.10A细胞 
NCI-H2330细胞系相关产品：SW 403细胞、NCI-H820细胞、MFC细胞 
SNU638细胞系相关产品：NIH:OVCAR3细胞、SP2-0-Ag14细胞、AD293细胞 
HCC0044细胞系相关产品：C-4 I细胞、Hs 852.T细胞、VERO76细胞 
AU 565细胞系相关产品：Det 562细胞、OCM1细胞、WC00097细胞 
Bat lung细胞系相关产品：LTEP-sm细胞、SHI1细胞、H-187细胞 
WERI细胞系相关产品：OV3121细胞、AHH1细胞、HAC-84细胞 
OCLY8细胞系相关产品：PF-382细胞、Hs940T细胞、U251MG细胞 
Mc Ardle 7777细胞系相关产品：PLC-PRF-5细胞、MBMEC细胞、SUDHL-6细胞 
2PK-3细胞系相关产品：OC-3-VGH细胞、MLA 144细胞、A 2780 CP细胞 
ZR7530细胞系相关产品：Caco2-BBE细胞、293-F细胞、H-1092细胞 
HCC2157细胞系相关产品：IMR-32细胞、Panc10.05细胞、OV433细胞 
SCC 25细胞系相关产品：NCI-H1650细胞、hESC细胞、PAN 02细胞 
HCC2185细胞系相关产品：BEL-7402细胞、CCD-33Co细胞、B16/F0细胞 
L细胞系相关产品：PMVEC细胞、DU-4475细胞、NCI-SNU-668细胞 
MM.1S细胞系相关产品：HCC-1419细胞、C-4I细胞、F36P细胞 
H1954细胞系相关产品：Eca109细胞、HEK-293-FT细胞、EAC细胞 
SCCVII细胞系相关产品：U-373MG ATCC细胞、Vx-2细胞、SiHa细胞 
MDA-436细胞系相关产品：RKOAS451细胞、BNL-CL.2细胞、HUT28细胞 
TK-10细胞系相关产品：Panc 03.27细胞、FLC-7细胞、Hep2细胞 
RPMI8226/S细胞系相关产品：HFL-1细胞、SMA-560细胞、BEL7404细胞 
KATO 3细胞系相关产品：WTRL1细胞、L929细胞、HCC1438细胞 
H1666_DA细胞系相关产品：RK13细胞、NCI-SNU-387细胞、ARO细胞 
CTLA4Ig-24细胞系相关产品：HEK293-H细胞、NCTC-929细胞、A2008细胞 
A2780CP细胞系相关产品：SNK6细胞、HRIF细胞、H508细胞 
MDA PCa 2b细胞系相关产品：COLO357细胞、NCI-H78细胞、HCT/FU细胞 
EST50细胞系相关产品：CCD-1095Sk细胞、GLRK 13细胞、SKES1细胞 
NFS 60细胞系相关产品：CHO细胞、NCI-SNU-761细胞、Malme3M细胞 
Panc-3_27细胞系相关产品：WiDr细胞、SUIT 2细胞、PC3M-2B4细胞 
Ramos (RA)细胞系相关产品：BALB/3T3 clone A31细胞、H19-7细胞、Nb-2细胞 
H650细胞系相关产品：K1细胞、SK HEP 01细胞、RLE-6TN细胞 
SNU16细胞系相关产品：CAL39细胞、FL 62891细胞、RIN14B细胞 
HEC1-B细胞系相关产品：HConEpic细胞、HT 1376.T细胞、GDM-1细胞 
CD 18细胞系相关产品：KU1919细胞、Earle's L cells细胞、HR-8348细胞 
KNS-81细胞系相关产品：H-1876细胞、RS1细胞、BRL 3A细胞 
CAKI1细胞系相关产品：Anip 973细胞、159 PT细胞、HTR8svn细胞 
NCI-H647细胞系相关产品：HCCLM6细胞、SPC-A-1细胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6细胞 
H-EMC-SS细胞系相关产品：BSC-40细胞、HS 683T细胞、U-373 MG细胞 
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TE9细胞系相关产品：GM03569细胞、NCIH838细胞、RPMI-6666细胞 
CaSki细胞系相关产品：HSF2细胞、EL 4细胞、KMS26细胞 
PC-3M-2B4细胞系相关产品：GBC-SD细胞、HUT125细胞、Jurkat77细胞 
HCCC9810细胞系相关产品：Hs 840.T细胞、MEL细胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a细胞 
HFF-1细胞系相关产品：MHCC 97-L细胞、McARH7777细胞、HCC827细胞 
THP-1细胞系相关产品：OVCAR420细胞、P388-D1细胞、High Five细胞 
PG-4细胞系相关产品：SuDHL 5细胞、786-O细胞、Karpas299细胞 
MM1细胞系相关产品：MV 4;11细胞、Tregs细胞、NIH-3T3细胞 
Hs1.Tes细胞系相关产品：hCMEC/D3细胞、UT7细胞、RPTEC/TERT 1细胞 
G-401细胞系相关产品：NCIH889细胞、Merwin Plasma Cell tumor-11细胞、NCI-H1672细胞 
MDA 231-LM2-4175细胞系相关产品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14细胞、HBdSMC细胞、8305C_1细胞 
TE-7细胞系相关产品：Human Intestinal Epithelial Cell-6细胞、SNU739细胞、Michigan Cancer Foundation-10A细胞 
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