LN-382 人脑胶质瘤细胞系

"LN-382 人脑胶质瘤细胞系
细胞背景资料：胶质瘤；男性 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞传代注意事项：①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材；②每天观察细胞形态，掌握好细胞是否健康的标准：健康细胞的形态饱满，折光性好，生长致密时即可传代；③如发现细胞有污染迹象，应立即采取措施，一般应弃置污染的细胞，如果必须挽救，可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗，随后培养基中加入较大量的抗生素，并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持：细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的特点，要做好建系的维持必须记录好细胞档案,换液传代和做好细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
LN-382 人脑胶质瘤细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁 
LN-382 人脑胶质瘤细胞系
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞（绝大部分１min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-３细胞），吹打不超过２０次后（一般１０次即可），成小规模聚集（１０个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法５min还不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
PASMCS细胞系相关产品：138MG细胞、P3 88 D1细胞、DLD1细胞 
Ra #1细胞系相关产品：PC-10细胞、MDAMB157细胞、H-1781细胞 
NCI-H719细胞系相关产品：Ca 9-22细胞、HLEC细胞、JG细胞 
DHL5细胞系相关产品：B16 BL6细胞、HCC-366细胞、PL-12细胞 
Capan 2细胞系相关产品：CHO-K1细胞、NCI-H128细胞、ACC-3细胞 
SNK1细胞系相关产品：H1882细胞、NCI-H847细胞、Human Hepatocyte Line 5细胞 
Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8细胞系相关产品：L 540细胞、RMC细胞、P3-X63-Ag8-653细胞 
HCC4006细胞系相关产品：KAT-5细胞、HCC-94细胞、H-1184细胞 
Ball 1细胞系相关产品：KM-H2细胞、HMEC1细胞、GM03569B细胞 
A-101D细胞系相关产品：OCI/AML-3细胞、FRTL-5 Cl 2细胞、TE-15细胞 
PC 61-5-3细胞系相关产品：GM637细胞、NIH-3T3细胞、BNL.CL2细胞 
H-2073细胞系相关产品：Sf21细胞、KMB17细胞、Huh-7细胞 
EB3 [Human Burkitt lymphoma]细胞系相关产品：Okayama University Medical School-27细胞、H929细胞、SW480E细胞 
HKBML细胞系相关产品：HL-1细胞、8226细胞、SW 962细胞 
NCI N87细胞系相关产品：MGC-803细胞、MV4-11细胞、NCIH208细胞 
BE2M17细胞系相关产品：LLC-PK-1细胞、KU 19-19细胞、Ketr-3细胞 
BE2M17细胞系相关产品：LLC-PK-1细胞、KU 19-19细胞、Ketr-3细胞 
Cor L51细胞系相关产品：NU-GC-3细胞、8305C细胞、MeSoTheliOma-211H细胞 
PANC-1细胞系相关产品：HIEC-6细胞、HIT T15细胞、Leghorn Male Hepatoma cell line细胞 
AgC11x3A细胞系相关产品：Cloudman M3细胞、SUM 102细胞、NTera 2/cl.D1细胞 
LN-382 人脑胶质瘤细胞系
KMH2细胞系相关产品：SKNBE(2)细胞、ARIP细胞、PG-4 (S+L-)细胞 
ECC-12细胞系相关产品：RCC10细胞、SCL1细胞、Lec1细胞 
BLO 11细胞系相关产品：COR-L105细胞、HEK-2细胞、MKN28细胞 
H-35细胞系相关产品：KP 4细胞、SUDHL2细胞、BSC1细胞 
OVCAR 420细胞系相关产品：Panc 02.03细胞、GM01232细胞、Hs675T细胞 
QBC-939细胞系相关产品：RC13细胞、TSUpr1细胞、P31/Fujioka细胞 
OCI-AML5细胞系相关产品：JURKAT E-6.1细胞、HCe-8693细胞、GM07404A细胞 
H2342细胞系相关产品：HGE细胞、3AA细胞、MC 3T3-E1细胞 
HRVEC细胞系相关产品：CCK-81细胞、COLO_320DM细胞、L-6细胞 
P3-X63-Ag8.653细胞系相关产品：IMR 32细胞、SMMC 7721细胞、HCC-15细胞 
293A细胞系相关产品：WC00044细胞、A-2058细胞、4175细胞 
NCI-H2195细胞系相关产品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞、HEK 293 EBNA细胞、VMCUB1细胞 
SK-RC-20细胞系相关产品：CT 26细胞、L 1210细胞、TE 32.T细胞 
PAI细胞系相关产品：UPCISCC090细胞、MS751细胞、H1404细胞 
HS688AT细胞系相关产品：OPM2细胞、COV 504细胞、Adeno 293细胞 
MFE-280细胞系相关产品：HSAS3细胞、JB6Cl30细胞、L- cell细胞 
VMCUB1细胞系相关产品：H-508细胞、CEMC1细胞、PANC0403细胞 
HEM细胞系相关产品：SW 1116细胞、KASUMI6细胞、NCI-446细胞 
A549ATCC细胞系相关产品：H-1435细胞、SJCRH30细胞、RGB细胞 
SJCRH30细胞系相关产品：SBC-3细胞、RCC-10RGB细胞、NCI660细胞 
WERI细胞系相关产品：OV3121细胞、AHH1细胞、HAC-84细胞 
6T-CEM细胞系相关产品：SNU-449细胞、MALME 3M细胞、Cattle chondrocytes细胞 
Hs 729细胞系相关产品：SK Hep1细胞、YES-2细胞、JB-6 Cl 30细胞 
HT-1197细胞系相关产品：766T细胞、GA-10 (Clone 4)细胞、HCT-8/V细胞 
SF 763细胞系相关产品：GM2131细胞、RD细胞、HT-29细胞 
U-2-OS细胞系相关产品：AM-38细胞、NCI-H2087细胞、SUM149-PT细胞 
NCI-H1703细胞系相关产品：LC1sq细胞、NH-6细胞、OVCAR3细胞 
NCIH647细胞系相关产品：Kit 225-K6细胞、Tca-83细胞、CX1细胞 
H-522细胞系相关产品：HEK-293-F细胞、HTR8/SVneo细胞、H-1703细胞 
MIMVEC细胞系相关产品：A2780细胞、CCLP1细胞、SW-780细胞 
SK-ChA-1细胞系相关产品：CHL细胞、PC-3细胞、TOV-112D细胞 
MM-1S细胞系相关产品：C12细胞、Human Embryonic Skin细胞、G 292 Clone A 141B1细胞 
AZ 521细胞系相关产品：A72细胞、H1651细胞、U-343-MG细胞 
5637细胞系相关产品：2T细胞、H292细胞、SUP T1细胞 
H-1563细胞系相关产品：NCI-H2023细胞、MIN6细胞、NCIH1568细胞 
hFOB细胞系相关产品：H.Ep. No. 2细胞、NCI-446细胞、COV 504细胞 
HG2855细胞系相关产品：P116细胞、H-735细胞、MLE-12细胞 
PC-14细胞系相关产品：SW 982细胞、DV90细胞、C33A细胞 
BNCL-2细胞系相关产品：CAKI 2细胞、QGY-7701细胞、A72细胞 
UCH1细胞系相关产品：HBZY1细胞、H-650细胞、P3J HR1-K细胞 
Neuro-2a细胞系相关产品：HBSMC细胞、IOSE80细胞、Madin Darby Bovine Kidney细胞 
LN-382 人脑胶质瘤细胞系
hs 68细胞系相关产品：MSB1细胞、MOLP-2细胞、RBL2H3细胞 
H526细胞系相关产品：PLCPRF5细胞、HMy2.CIR细胞、GTL-16细胞 
IALM细胞系相关产品：DMS273细胞、COS7细胞、C28/I2细胞 
ST486细胞系相关产品：GalK1细胞、BNCL-2细胞、CHP100细胞 
EAC-E2G8细胞系相关产品：OVCAR3细胞、TM-3细胞、A9 (Hamprecht)细胞 
RCF细胞系相关产品：HA细胞、Malme-3 M细胞、MRASMC细胞 
NBL-4细胞系相关产品：UMRC-2细胞、Simpson细胞、NCI-H498细胞 
SP2-0-Ag14细胞系相关产品：KNS-81细胞、Toledo细胞、MHH-CALL2细胞 
293T细胞系相关产品：CMT-64细胞、HL-60 clone15细胞、SMA560细胞 
Caco-2 BBe细胞系相关产品：RPMI 6666细胞、CCC-ESF-1细胞、3T3 L1细胞 
JB6 [Mouse]细胞系相关产品：NRK49F细胞、NCI-SNU-182细胞、HARA-B细胞 
NCI-H719细胞系相关产品：Ca 9-22细胞、hEM15A细胞、HCC1954 BL细胞 
"