KMBC 人胆管癌细胞系

"KMBC 人胆管癌细胞系
细胞背景资料：胆管癌；男性 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞培养无菌操作的演示：凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精灯火焰操作。器皿使用前必须过火灭菌，继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在高处，使用时仍要过火。各种操作要靠近酒精灯，动作要轻、准确，不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自来水刷洗，除去灰尘。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小时以除去脏物、铅、等物。刷洗、烘干：１２小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲干净后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清洁液浸泡１２小时，然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗１５次，最后蒸馏水冲洗３-５次和用双蒸水过３次。烘干、包装：洗干净后先烘干，然后用牛皮纸(油光纸)包装。高压消毒：包装好的器皿装入高压锅内盖好盖子，打开开关和安全阀，当蒸气成直线上升时，关闭安全阀，当指针指向１５磅时，维持２０-３０分钟。高压消毒后烘干。二、旧的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中，泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清洁液(酸液)，１２小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗)，再用蒸馏水冲洗３次。烘干、包装：洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
KMBC 人胆管癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞建议只吹打，不消化）其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁 
KMBC 人胆管癌细胞系
细胞培养相关问题总结：冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后，须立即放入３７°C水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在１分钟内全部融化，并注意水面不可超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管之爆裂；细胞冷冻管解冻培养时，是否应马上去除DMSO？除少数特别注明对DMSO敏感之细胞外，绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞），在解冻之后，应直接放入含有１０-１５ml新鲜培养基之培养角瓶中，待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可，如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题；可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活；培养细胞时应使用５%或１０%CO２？或根本没有影响？一般培养基中大都使用HCO３-/CO３２-/H+作为pH的缓冲系统，而培养基中NaHCO３的含量将决定细胞培养时应使用的CO２浓度。当培养基中NaHCO３含量为每公升３.７g时，细胞培养时应使用１０%CO２；当培养基中NaHCO３为每公升１.５g时，则应使用５%CO２培养细胞。何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上之更换时间，按时更换培养基即可。培养基中是否须添加抗生素？除于特殊筛选系统中外，一般正常培养状态下，培养基中不应添加任何抗生素。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
SaOS细胞系相关产品：EA.Hy926细胞、RPMI #8226细胞、CWR22R-V1细胞 
HCT-8细胞系相关产品：NCI-H-295细胞、CNE1细胞、SK.MEL.28细胞 
MODE-K细胞系相关产品：RC-4B细胞、GM03190A细胞、H-69细胞 
Pa17C细胞系相关产品：H-345细胞、2B4-L细胞、HT 1197.T细胞 
CTLL(2)细胞系相关产品：KU-19-19细胞、SLMT-1细胞、MC9细胞 
MEC-1细胞系相关产品：HPAF-I细胞、HCC-2935细胞、NCI-H889细胞 
SK-RC 39细胞系相关产品：TE-15细胞、HT1080细胞、NCI.H23细胞 
HcerEpic细胞系相关产品：H-596细胞、Hepa1-6细胞、hUC-MSC细胞 
Jurkat, Clone E6-1细胞系相关产品：H2452细胞、HEYA8细胞、MC3T3E1细胞 
KMM1细胞系相关产品：RMS1598细胞、SACCLM细胞、Hs-578T细胞 
NCI-H841细胞系相关产品：BNL.1ME A.7R.1细胞、NOZAWA细胞、Colo16细胞 
G 401细胞系相关产品：PC-9细胞、HO8910细胞、HEB细胞 
H187细胞系相关产品：NCI-H748细胞、TE-7细胞、H2342细胞 
ML2细胞系相关产品：HARA-B细胞、H-526细胞、SGC996细胞 
SK-RC 42细胞系相关产品：SW 13细胞、Hs 870.T细胞、USMC细胞 
MKN-45细胞系相关产品：SHSY-5Y细胞、HPB/ALL细胞、MCF-7细胞 
rHSC-99细胞系相关产品：624细胞、Onda 11细胞、Panc327细胞 
COLO-16细胞系相关产品：OUMS27细胞、P3-X63-Ag8.653细胞、SW900细胞 
WM115-mel细胞系相关产品：L-Wnt3A细胞、SK-MES1细胞、Pt K1细胞 
H82细胞系相关产品：FRTL-5细胞、H596细胞、OCM-1细胞 
KMBC 人胆管癌细胞系
MC-3T3细胞系相关产品：CESS细胞、A-172MG细胞、RFL 6细胞 
JHH-7细胞系相关产品：GM03671细胞、Hs_578t细胞、HBE 135-E6E7细胞 
IMR 32细胞系相关产品：RenCa细胞、MDA-MB-134 VI细胞、H1048细胞 
SKRC-52细胞系相关产品：VA-ES-BJ细胞、Ly19细胞、Sci-1细胞 
HUT28细胞系相关产品：COLO 320 HSR细胞、KS-1 [Human glioblastoma]细胞、QSG7701细胞 
SKNMC细胞系相关产品：KU812-F细胞、BC-028细胞、CAL 39细胞 
HuT 102细胞系相关产品：CAKI 1细胞、GM15452细胞、SW954细胞 
A-20细胞系相关产品：EFM192A细胞、NPA 87细胞、SN4741细胞 
NTERA-2细胞系相关产品：TCMK1细胞、FD-LSC-1细胞、NCI-H378细胞 
DrG细胞系相关产品：H1373细胞、OAW42细胞、JB6 clone 30, subclone 7b细胞 
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JG细胞系相关产品：SCC9细胞、High5细胞、MFE-296细胞 
Huh7.5.1细胞系相关产品：H716细胞、MM96L细胞、LoMeT-ccRcc细胞 
CCD18Co细胞系相关产品：HLE B-3细胞、NCI-H1385细胞、HBL 100细胞 
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WILL2细胞系相关产品：H-128细胞、CORL279细胞、OVCAR-4细胞 
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CNE1-LUC细胞系相关产品：TE3A细胞、C643细胞、H-889细胞 
Sf21细胞系相关产品：U-251_MG细胞、NHRF细胞、HT-3细胞 
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KG1A细胞系相关产品：Colon-26细胞、UWB1.289+BRCA1细胞、Anip973细胞 
L cells (TK-)细胞系相关产品：Karpas 422细胞、H1882细胞、OV-CA 432细胞 
RetroPack PT67细胞系相关产品：MAD109细胞、CAL78细胞、T84细胞 
Vertebral Cancer of the Prostate细胞系相关产品：CT26.WT细胞、JTC-39细胞、MMVECs细胞 
DU 145细胞系相关产品：Fetal Human Lens-124细胞、McA-RH 8994细胞、U118-MG细胞 
HFB细胞系相关产品：SNU484细胞、SUSM-1细胞、BA/F3细胞 
KMBC 人胆管癌细胞系
U-343MG细胞系相关产品：NCI-SNU-601细胞、SW480E细胞、DB细胞 
KU-812细胞系相关产品：PC14细胞、2008细胞、NKT细胞 
NHEK细胞系相关产品：MDA 435细胞、526 mel细胞、OCI-Ly 18细胞 
Rat Fetal Lung-6细胞系相关产品：JB6 [Mouse]细胞、HUV-EC-C细胞、SK-MEL-2细胞 
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GS9L细胞系相关产品：Mouse INsulinoma 6细胞、RAMOS2G64C10细胞、RGE细胞 
Hs 729T细胞系相关产品：MDA175细胞、3T3-F442A细胞、SW1463细胞 
MDA-MB-231 #4175细胞系相关产品：REC 1细胞、EBNA293细胞、ROS17/28细胞 
NCI.H460细胞系相关产品：THP-1(ATCC)细胞、P3J HR-1细胞、NS-I/1细胞 
BE(2)-C细胞系相关产品：NCI-H209细胞、ST486细胞、Hs 832(C).T细胞 
HTR8svn细胞系相关产品：HCC-9204细胞、Nb 2细胞、MDA-MB-468-RED细胞 
MODE-K细胞系相关产品：RC-4B细胞、MILE SVEN1细胞、CEM C7细胞 
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