KYSE-140 人食管鳞癌细胞系

"KYSE-140 人食管鳞癌细胞系
细胞背景资料：食管鳞癌细胞；男性 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞传代注意事项：①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材；②每天观察细胞形态，掌握好细胞是否健康的标准：健康细胞的形态饱满，折光性好，生长致密时即可传代；③如发现细胞有污染迹象，应立即采取措施，一般应弃置污染的细胞，如果必须挽救，可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗，随后培养基中加入较大量的抗生素，并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持：细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的特点，要做好建系的维持必须记录好细胞档案,换液传代和做好细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
KYSE-140 人食管鳞癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞建议只吹打，不消化）其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁 
KYSE-140 人食管鳞癌细胞系
细胞培养过程中相关问题总结：悬浮性细胞应如何继代处理？一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞，其离心速率一般为３００xg(约１,０００rpm)，５-１０分钟，过高之转速，将造成细胞死亡；细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因；细胞冷冻培养基之成份为何？动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成；DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO等级，必须为Tissue culture grade之DMSO，其本身即为无菌状况，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于４°C，避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质，并可减少污染之机会。若要过滤DMSO，则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜；冷冻保存细胞之方法？冷冻保存方法一：冷冻管置于４°C ３０~６０分钟→ (-２０°C ３０分钟)→-８０°C １６~１８小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase长期储存。-２０°C不可超过１小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？冷冻管内细胞数目一般为１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤细胞则以５x１０(６)cells/ml vial为宜；应如何避免细胞污染？细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之方法；如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？直接灭菌后丢弃之。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
NCI N87细胞系相关产品：MGC-803细胞、MV4-11细胞、NCIH208细胞 
NH-6细胞系相关产品：SKNBE-2细胞、HS0578T细胞、SK-MES1细胞 
KYSE-70细胞系相关产品：HEK/293细胞、NCI-H82细胞、Nthy-ori 3.1细胞 
H1105细胞系相关产品：CHP 126细胞、SW579细胞、D-324MED细胞 
BC3 H1细胞系相关产品：Hs-27细胞、Los Angeles Prostate Cancer-4细胞、LAC细胞 
Human Pancreatic Duct Epithelial细胞系相关产品：293H细胞、MDA415细胞、HPAC细胞 
OVSAHO细胞系相关产品：WM-266-mel细胞、Hs683T细胞、UWB1.289+BRCA1细胞 
hs 68细胞系相关产品：MSB1细胞、MOLP-2细胞、RBL2H3细胞 
OCI-AML-2细胞系相关产品：PSN1细胞、DMS79细胞、KLE细胞 
NCIH1092细胞系相关产品：RCC-JF细胞、D283细胞、SK-OV-433细胞 
H-1437细胞系相关产品：H-64细胞、L02细胞、PA-TU S细胞 
OCI-AML3细胞系相关产品：HCC0078细胞、UPCI:SCC90细胞、P3X63Ag8.653细胞 
RDES细胞系相关产品：RC-4B/C细胞、CD 18细胞、BT 549细胞 
8505C细胞系相关产品：BGC823细胞、NCI-H1930细胞、Danio rerio Gill细胞 
OVCA5细胞系相关产品：PANC-10-05细胞、ML2细胞、MDA-MB-134-VI细胞 
WEHI 164细胞系相关产品：HFLS-OA细胞、H-250细胞、Neuro-2a细胞 
WEHI 164细胞系相关产品：HFLS-OA细胞、H-250细胞、Neuro-2a细胞 
NRK52E细胞系相关产品：HCC-1500细胞、SK-MEL-2细胞、SKNEP1细胞 
Colo699细胞系相关产品：H-2330细胞、H-661细胞、HCT116/L细胞 
SNU-16细胞系相关产品：2E8细胞、JurkatE6-1细胞、X63-Ag8.653细胞 
KYSE-140 人食管鳞癌细胞系
MEG01细胞系相关产品：OVCAR4细胞、Hs706T细胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4细胞 
MES 23.5细胞系相关产品：C2A细胞、Mono Mac6细胞、P3/ag细胞 
Tissue Culture-1细胞系相关产品：CA-46细胞、HCC1419细胞、WC00059细胞 
PaTu 8988s细胞系相关产品：22Rv1细胞、HK2细胞、NCTC 929细胞 
NCI/ADR-RES细胞系相关产品：FM-88细胞、DC 2.4细胞、L-cell细胞 
SUIT 2细胞系相关产品：K562/ADR细胞、P-3J细胞、SUDHL5细胞 
MKN28细胞系相关产品：TOV112细胞、D324细胞、SKLU1细胞 
NOMO-1细胞系相关产品：786-O细胞、CII细胞、HEK293T/17细胞 
KP-N-RT-BM细胞系相关产品：HCT-116细胞、190PT细胞、VERO C 1008细胞 
NCIH1435细胞系相关产品：CHG-5细胞、293-GP细胞、JIII细胞 
NCI-UMC-11细胞系相关产品：WM-115细胞、H1623细胞、NK-92 MI细胞 
BrCL15细胞系相关产品：Hep II细胞、Cates 1B细胞、P388-D1细胞 
FF-WT-BJ细胞系相关产品：hTERT-HPNE细胞、R 2 C细胞、H-4细胞 
NCI-H23细胞系相关产品：HEL-92细胞、H676细胞、VSMC细胞 
UCLA SO M14细胞系相关产品：H-220细胞、CEF细胞、C2BBe 1细胞 
X63.Ag8.653细胞系相关产品：NCIH211细胞、GC9811-P细胞、NCI-BL1339细胞 
KMS-11细胞系相关产品：NOR10细胞、NCIH2106细胞、BT细胞 
Roswell Park Memorial Institute 6666细胞系相关产品：BC-019细胞、UM2细胞、LU-65M细胞 
AG06814-J细胞系相关产品：BAC1.2F5细胞、Pt K2细胞、LWnt-3A细胞 
RMC细胞系相关产品：NBL-2细胞、NCI-H1355细胞、Hs343T细胞 
SDBMSC细胞系相关产品：hSCC-25细胞、HSAS4细胞、VMM39细胞 
EHEB细胞系相关产品：KYSE-270细胞、SK-N-DZ细胞、Rh30细胞 
MCF-10A细胞系相关产品：NALM6细胞、Human Embryo Kidney-2细胞、MCF7-CTRL细胞 
130 T细胞系相关产品：H2106细胞、3396细胞、MDAMB231细胞 
NeHepLxHT细胞系相关产品：SNU-C2A细胞、SLMT1细胞、SNU449细胞 
32D/cl3细胞系相关产品：H4-II-E-C3细胞、Hs746-T细胞、EM-3细胞 
hCMEC/D3细胞系相关产品：SACC-83细胞、EBTr细胞、MN9D细胞 
Panc05.04细胞系相关产品：HCPEpiC细胞、SW.620细胞、AtT20细胞 
Panc_08_13细胞系相关产品：CCD-112CoN细胞、Jurkat 77细胞、PCI-4M细胞 
HG2855细胞系相关产品：P116细胞、H-735细胞、MLE-12细胞 
UCLA RO-81A-1细胞系相关产品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2细胞、Hep3B细胞、M14-MEL细胞 
REC细胞系相关产品：JROECL21细胞、SUD6细胞、C4-2B细胞 
KU-812细胞系相关产品：PC14细胞、2008细胞、NKT细胞 
Tn 5B1-4细胞系相关产品：H2029细胞、OV1/P细胞、Centre Antoine Lacassagne-78细胞 
NCI747细胞系相关产品：N87细胞、KYSE0520细胞、NCI-H735细胞 
Nb2a细胞系相关产品：CEM clone 7细胞、PIGI细胞、Kato-III细胞 
NUGC2细胞系相关产品：SuDHL 1细胞、GM05887A细胞、P3/X63/Ag8.653细胞 
P1-Raji细胞系相关产品：RCC-10RGB细胞、MG-HU-3细胞、OCI-AML-5细胞 
CHG5细胞系相关产品：BE2-M17细胞、OCI-Ly1细胞、UCLA-SO-M20细胞 
HCS2/8细胞系相关产品：SUSM-1细胞、CHP126细胞、H-2227细胞 
NCI-SNU-1细胞系相关产品：HCC-78细胞、MGSMC细胞、MH7A细胞 
KYSE-140 人食管鳞癌细胞系
RBL.2H3细胞系相关产品：BT20细胞、HCC 70细胞、GM346细胞 
TKB1细胞系相关产品：Anip[973]细胞、GM05862细胞、NCI-H1694细胞 
KY180细胞系相关产品：SW1353细胞、SW 1088细胞、RKO-E6细胞 
RPMI 1846细胞系相关产品：AMC-HN8细胞、CMT64细胞、TE85细胞 
CEM/C1细胞系相关产品：H-2106细胞、DH-82细胞、NK-92.05细胞 
ZYM-SVEC01细胞系相关产品：EB-1细胞、HOS-143B细胞、KTCTL-140细胞 
H1734细胞系相关产品：H-250细胞、211H细胞、BE2C细胞 
MDA-MB-330细胞系相关产品：U-226AR1细胞、SNU-216细胞、HLE B-3细胞 
DLD-1细胞系相关产品：HCC1419细胞、BGC-823细胞、LS1034细胞 
JVM-2细胞系相关产品：3T3-L1 ad细胞、GM04678细胞、HS-683细胞 
RPMI.8226细胞系相关产品：NCIH250细胞、RTE细胞、GM02131细胞 
KYSE520细胞系相关产品：TE-85细胞、CMT64细胞、HPDE细胞 
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