G-402 人肾平滑肌瘤细胞系

"G-402 人肾平滑肌瘤细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
【细胞培养中支原体、黑蛟虫、真菌的污染情况总结】支原体：黑色的，好象多为多形，培养液一般培养液一般会浑浊，原体感染，国内血清很多都没有做支原体阴性检测，而支原体是牛血清中最常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后，细胞病变不很明显，只是慢慢死去。用泰乐菌素，兽用支原体病的药，但可用于细胞培养，无任何不良反应。如果作为常用的抗生素的话, 建议用８ug/ml的浓度；黑蛟虫：可以穿透滤膜，也可以通过空气传播，低倍下为黑色点状，高倍下可看见黑色的小虫游来游去，培养液也是不浑的，一般不会太影响，细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好，且观测到的运动物无明显增多，且培养液颜色、透明度无明显变化，可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响，在细胞增殖旺盛之后会自然消失，除更换血清外无须特殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话，可以增加细胞的种板密度，以提高细胞的生存率；真菌：一般培养液清亮，不变色，镜下有丝状物，有些真菌开始很像死细胞碎片，只是它很多很多的小块很清楚，象珊瑚状，不象细胞碎片分不清，慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢，不象细菌那么容易被发现，但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了，也很难救活了。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
G-402 人肾平滑肌瘤细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
细胞培养更好经验详解：1)收到细胞，首先要镜检：观察细胞形态是否正常，对于贴壁细胞则要注意看贴壁情况是否很好，观察细胞密度，有疑议及时咨提供细胞的技术人员。 由于运输的时间或者温度的变化，很多贴壁细胞在盛满培养基的瓶子里生长的状态和平时会有点不一样，主要是贴壁牢固问题。比如293T，平时贴壁就不是很牢，在装满的培养基瓶子里面，会发生大片的脱落，细胞聚集在一起，但是细胞生长还是正常的，通过离心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的贴壁生长。2)当通过上一步的观察，细胞初步没有问题时，进行下一步操作。当收到的细胞密达到80%左右时，则处理如下：弃除瓶中大部分培养基，仅保留5到10mL培养所需的常规培养基；或更换新鲜的培养基，置于培养箱中，随后每天观察。 细胞在低于正常生长温度情况下，会调整为静止期，或者慢速生长期，恢复37度的环境至少3个小时左右，才能重新调整到接近对数生长期的状态，在对数生长期进行细胞的传代会大大增加传代的成功率，和细胞的存活率。3)如果经步观察发现细胞密度超过90%，并且细胞状态很好时，则复温后2个小时需要立即传代。传代的比例应依据不同的细胞而定。对于生长比较快，状态稳定，不易受外界影响的细胞可以一次多传几瓶；对于生长较慢，细胞比较薄，状态容易波动的细胞类型，一次少传些，每瓶细胞密度大些，便于稳定生长。至于一些比较陌生的细胞，次处理也可以依照第二种情况。 
细胞传代方法：１：２-１：６传代，每周２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁生长 
G-402 人肾平滑肌瘤细胞系
细胞传代培养(消化法)标准操作规程【原理】细胞在培养瓶长成致密单层后，已基本上饱和，为使细胞能继续生长，同时也将细胞数量扩大，就必须进行传代(再培养)。传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以，而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。【材料和试剂】１)无菌生理缓冲液(PBS)；２)胰酶-EDTA溶液(０.０５%胰酶-０.５３mM EDTA-４Na): 以１０ml分装于１５ ml无菌离心管中，保存于–２０℃，使用前放在３７℃水槽回温；３)新鲜培养基；４)无菌吸管/离心管/培养瓶【传代前准备操作】１)预热培养用液：把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入３７℃水浴锅内预热；２)用７５％酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手；３)正确摆放使用的器械：保证足够的操作空间，不仅便于操作而且可减少污染；４)点燃酒精灯：注意火焰不能太小；５)准备好将要使用的消毒后的空培养瓶；６)取出预热好的培养用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内；７)从培养箱内取出细胞：注意取出细胞时要旋紧瓶盖，用酒精棉球擦拭显微镜的台面，再在镜下观察细胞；８)打开瓶口：将各瓶口一一打开，同时要在酒精灯上烧口消毒。 
细胞形态特性：上皮细胞样 
PANC 203细胞系相关产品：TE4细胞、WEHI-3细胞、L-WRN细胞 
ECC 10细胞系相关产品：LC1-Sq细胞、HCC-2218细胞、HEEpiC细胞 
HBL100细胞系相关产品：PLB985细胞、Mel RM细胞、SU-DHL-10细胞 
U266 Bl细胞系相关产品：H1651细胞、TM4细胞、SU.86.86细胞 
COS-7细胞系相关产品：U-87MG细胞、HS-695T细胞、TE-9细胞 
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aTC1 Clone 6细胞系相关产品：D407 RPE细胞、NCTC 1469细胞、4T1细胞 
251 MG细胞系相关产品：2BS细胞、NCIH1618细胞、Hep G2/C3A细胞 
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TPC1细胞系相关产品：TE-4细胞、Mono Mac 1细胞、U-373MG细胞 
H-35细胞系相关产品：KP 4细胞、SUDHL2细胞、BSC1细胞 
IMR-90细胞系相关产品：LC1细胞、WILL2细胞、MIN6细胞 
H810细胞系相关产品：C-6细胞、L-929细胞、SW 756细胞 
MSC细胞系相关产品：CALU1细胞、GT38细胞、ARPE-19细胞 
RWPE1细胞系相关产品：Walker-256细胞、mIMCD3细胞、P3-X63-Ag8.653细胞 
HT clone H9细胞系相关产品：AsPC-1细胞、KU-19-19细胞、NCI-H2081细胞 
BNL.CL2细胞系相关产品：TFK-1细胞、MA-104细胞、NCIH244细胞 
THLE-3细胞系相关产品：Human podocyte细胞、SKMES细胞、95D细胞 
NCI-H2195细胞系相关产品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞、HEK 293 EBNA细胞、VMCUB1细胞 
G-402 人肾平滑肌瘤细胞系
H1436细胞系相关产品：Hep 2细胞、NRK clone 49F细胞、D6P2T细胞 
SV-HUC-1细胞系相关产品：Neuro 2a细胞、NCI-UMC-11细胞、NCI-SNU-475细胞 
HepaRG细胞系相关产品：Sp2/O细胞、HRVEC细胞、HEMCSS细胞 
U118-MG细胞系相关产品：SV-HUC细胞、brain-derived Endothelial cells.3细胞、GH 3细胞 
FHs74 Int细胞系相关产品：HRC-99细胞、Med 283细胞、LO2细胞 
KCL22细胞系相关产品：GC9811-P细胞、EC-GI细胞、Hs27F细胞 
PC-3M-2B4细胞系相关产品：GBC-SD细胞、HUT125细胞、Jurkat77细胞 
Transformed Human Liver Epithelial-3细胞系相关产品：NRCC细胞、TE-1细胞、S.B.细胞 
PA-1细胞系相关产品：Becker细胞、NUGC-2细胞、NCIH1819细胞 
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Nittby-Salford 1细胞系相关产品：FAK+/+细胞、H-1522细胞、Dx5细胞 
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TK-1细胞系相关产品：TM3细胞、PC-3M细胞、GLC-15细胞 
293-H细胞系相关产品：NCI/ADRRES细胞、SKNAS细胞、Vero E-6细胞 
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