T84 人结肠腺癌肺转移细胞系

"T84 人结肠腺癌肺转移细胞系
细胞背景资料：T８４细胞株是从一位７２岁男性结肠癌患者的肺转移灶建立的可移植人类癌细胞株。 肿瘤组织皮下接种于BALB/c裸鼠，并连续进行移植。 [２６０７２］ 在裸鼠身上的移植过程中，细胞株始终保持结肠癌的原始组织性状。 [２６０７２］ 在无胸腺小鼠中传代２３代后建立了T８４细胞株。 这些细胞单层生长到饱和并在接触细胞间展现出紧密连接和桥粒。 [１１５５] 有很多关于多肽类激素和神经递质并维持定向电解质传输的受体。 [１１５５］ 这株细胞展现了接触细胞中的紧密连接和桥粒。 [１１５５］ 角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性。 
细胞形态：上皮细胞样 
【细胞培养中原虫的污染情况总结】原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不好，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，最终形成恶性循环。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等关于培养基的无菌状况，取培养基至培养瓶中(不加细胞)，３７度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长就是操作的问题。也可以在培养基中事先加入双抗(酸链霉素和苄青霉素)。但双抗有时会影响细胞的状态，所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗，以避免影响实验结果。１)孵箱应定期用三氧机消毒或者紫外光照射，并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水；２)超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素；３)超净台的风机不能过大，风机到６-８格。否则也可能能致霉菌污染；４)无菌室经甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的喷洒中和，约几小时即可进入操作。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
T84 人结肠腺癌肺转移细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
悬浮细胞不容易转染：悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次，脂质体试剂的毒性较大，这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外，悬浮细胞不易培养，易死亡，也给细胞转染造成了一定的困难。为了提高悬浮细胞的转染效率，可以使用非脂质体的转染试剂，如纳米材料的。也可以使用电转染方法，针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的，电击对细胞有一定的损伤，选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂，可以将电击对细胞的伤害降到最低，悬浮细胞不易转染，选对试剂及良好的细胞培养环境才是关键。 
细胞传代方法：１：２-１：４传代；每周２次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁生长 
T84 人结肠腺癌肺转移细胞系
细胞冻存知识普及：细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-１９６℃液氮中低温保存，可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来，这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞，可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种，起到了细胞保种的作用。除此之外，还可以利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。细胞冻存时向培养基中加入保护剂--终浓度５%.１５%的甘油或二甲基亚砜(DMSO)，可使溶液冰点降低，加之在缓慢冻结条件下，细胞内水分透出，减少了冰晶形成，从而避免细胞损伤。 采用""慢冻快融""的方法能较好地保证细胞存活。标准冷冻速度开始为-１到-２℃/min，当温度低于-２５℃时可加速，到-８０℃之后可直接投入液氮内(-１９６℃)。 
细胞形态特性：上皮细胞，多角 
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T84 人结肠腺癌肺转移细胞系
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