SW1463 人结肠腺癌细胞系

"SW1463 人结肠腺癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
解冻细胞出现大量细胞碎片的可能原因及推荐解决方案如下：１)冷冻时细胞密度过低：推荐的解决方案：缩短解冻过程中的时间。将细胞取出后，立即将冻存管浸入在３７℃的水浴中，并震荡至全部融化，然后迅速地转移到预热的培养基中；２)不适当的冷冻过程：推荐的解决方案：解冻不同冷冻室总的试管。确保在冻存过程中采用的适当的技术，并确保使用了适量和适合的冷冻液。出现生长缓慢的可能原因及推荐解决方案如下：１)培养瓶的大小：一般解决方案是一些细胞在培养基中倾向于维持一定的密度。将培养物转移到较小的培养瓶中，使细胞密度上升；如，根据培养基的体积，从T７５培养瓶转移到２或３个T２５培养瓶中；２)细胞密度过低：通常解决方案是提高未来冷冻物种细胞的冻存密度，或使用较小的培养容器，或解冻多个试管来进行培养。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
SW1463 人结肠腺癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
传代的操作步骤注意事项：1)操作前要洗手，进入超净台后手要用75%酒精或0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦试。2)点燃酒精灯，操作在火焰附近进行，耐热物品要经常在火焰上烧灼，金属器械烧灼时间不能太长，以免退火，并冷却后才能夹取组织，吸取过营养液的用具不能再烧灼，以免烧焦形成碳膜。3)操作动作要准确敏捷，但又不能太快，以防空气流动，增加污染机会。4)不能用手触已消毒器皿的工作部分，工作台面上用品要布局合理。5)瓶子开口后要尽量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。贴壁细胞传代的操作步骤：1)吸除培养瓶内旧培养液。2)向瓶内加入胰蛋白酶和EDTA混合液少许，以能覆满瓶底为限。3)置温箱中2-5分钟，当发现细胞质回缩，细胞间隙增大后，立即终止消化。4)吸除消化液，向瓶内注入Hanks液数毫升，轻轻转动培养瓶，把残余消化液冲掉。注意加Hanks液冲洗细胞时，动作要轻，以免把已松动的细胞冲掉流失，如用胰蛋白酶液单独消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液冲洗，直接加入培养液。5)用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。6)计数板计数后，把细胞悬液分成等份分装入数个培养瓶中，置温箱中培养。悬浮细胞传代的操作步骤：1)吸出细胞培养液，放入离心管中，离心1000rpm5分钟。2)吸掉上清液，加入适量之新鲜培养基，混和均匀后，依稀释比例转移至新的培养瓶中，以正常培养条件培养。 
细胞传代方法：１：３—１：８传代，每周换液１-２次 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁生长 
SW1463 人结肠腺癌细胞系
其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞(绝大部分１min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的(比如Calu-３细胞)，吹打不超过２０次后(一般１０次即可)，成小规模聚集(１０个细胞左右)，是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。 
细胞形态特性：上皮细胞 
P3 NS1 Ag4/1细胞系相关产品：OLN93细胞、Panc 2.03细胞、H-740细胞 
HFSF细胞系相关产品：526-mel细胞、C4-I细胞、TE15细胞 
RCC-JF细胞系相关产品：HUVEC-C[HUVEC]细胞、T47D细胞、EFM19细胞 
HL-60细胞系相关产品：Panc-813细胞、CX-1细胞、KNS62细胞 
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S.B.细胞系相关产品：BEL7402细胞、HEK-293-EBNA细胞、DU 145细胞 
SK-N-BE2细胞系相关产品：SNT8细胞、NCI-H676B细胞、SUM159细胞 
PC14细胞系相关产品：LMTK-细胞、Sup T-1细胞、HOPC细胞 
Lewis lung carcinoma line 1细胞系相关产品：MDA157细胞、IPEC-1细胞、SNU119细胞 
SK Mel 24细胞系相关产品：Earle's L cells细胞、SNK-6细胞、Mono Mac 6细胞 
RCK-8细胞系相关产品：University of Arizona Cell Culture-893细胞、WC00079细胞、RPMI 7666细胞 
SW1783细胞系相关产品：HCT-GEO细胞、HuH-1细胞、LNCaP-C4-2细胞 
Chang liver细胞系相关产品：COS-7细胞、IB-RS2细胞、L-6TG细胞 
RT4-D6-P2T细胞系相关产品：CAKI.1细胞、H-2196细胞、AR-42J细胞 
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SUM 52PE细胞系相关产品：OKa-C-1细胞、HT 1376细胞、NCI-H2198细胞 
SW1463 人结肠腺癌细胞系
PL5细胞系相关产品：PSN-1细胞、JM-Jurkat细胞、SK-N-FI细胞 
MDCKII细胞系相关产品：NCI-H774细胞、EoL-1-cell细胞、HCE细胞 
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BHK-21细胞系相关产品：QGP 1细胞、U266-B1细胞、SUM-190细胞 
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M3 Clone M-3细胞系相关产品：HMy2.CIR细胞、HN-6细胞、T/G HA-VSMC细胞 
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