DBTRG-05MG 人脑胶质母细胞瘤细胞系

"DBTRG-05MG 人脑胶质母细胞瘤细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍 
细胞形态：上皮细胞样 
【细胞培养中细菌、霉菌的污染情况总结】细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在高压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！可在培养液中加相应的抗生素处理；霉菌：培养液是清亮的，倒置显微镜下无杂质，３７度孵箱培养２-３天，仍清亮，但出现絮状杂质，镜下可见呈细丝状的团状漂浮物，可看到明显的菌丝，细胞仍可生长，但时间长之后，细胞的活力状态变差，用酸铜溶液擦拭CO２孵箱内，再把水盘里也加上饱和量的酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒二钠高盐液体,可以防止霉菌污染。CO２孵箱被霉菌污染后，可把所有细胞暂时转移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱内一个小时，使其蒸汽弥漫。待的气味消散后，再移入细胞。孵箱应定期清洁(２月左右)，尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是：用８４液擦洗－清水擦洗－７５%酒精擦洗－紫外灯照。预防霉菌污染，可在培养基里加３u/ml的两性霉素或制霉菌素或D或双抗；但细胞一旦污染，很难挽救，制霉菌素或D或双抗都于事无补，建议舍弃该污染细胞，将环境彻底消毒，如果所有细胞都污染，可能是系统污染，检查一下培养基和器材，如果只是个别污染，可能是操作问题，就要注意操作。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
DBTRG-05MG 人脑胶质母细胞瘤细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不好、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不好》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。 
细胞传代方法：１：４-１：６传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁生长 
DBTRG-05MG 人脑胶质母细胞瘤细胞系
细胞传代培养(消化法)标准操作规程【原理】细胞在培养瓶长成致密单层后，已基本上饱和，为使细胞能继续生长，同时也将细胞数量扩大，就必须进行传代(再培养)。传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以，而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。【材料和试剂】１)无菌生理缓冲液(PBS)；２)胰酶-EDTA溶液(０.０５%胰酶-０.５３mM EDTA-４Na): 以１０ml分装于１５ ml无菌离心管中，保存于–２０℃，使用前放在３７℃水槽回温；３)新鲜培养基；４)无菌吸管/离心管/培养瓶【传代前准备操作】１)预热培养用液：把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入３７℃水浴锅内预热；２)用７５％酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手；３)正确摆放使用的器械：保证足够的操作空间，不仅便于操作而且可减少污染；４)点燃酒精灯：注意火焰不能太小；５)准备好将要使用的消毒后的空培养瓶；６)取出预热好的培养用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内；７)从培养箱内取出细胞：注意取出细胞时要旋紧瓶盖，用酒精棉球擦拭显微镜的台面，再在镜下观察细胞；８)打开瓶口：将各瓶口一一打开，同时要在酒精灯上烧口消毒。 
细胞形态特性：成纤维细胞 
HPAF细胞系相关产品：Hs 729细胞、SKMEL-24细胞、SNK1细胞 
AML12细胞系相关产品：MC-3T3-E1细胞、PIG3细胞、Panc-08.13细胞 
FRTL-5 Cl 2细胞系相关产品：P3X63Ag8.653细胞、HUCEC细胞、MCF-7/AdrR细胞 
EM3细胞系相关产品：WISH细胞、BRL3A细胞、Mino细胞 
H292细胞系相关产品：SNU620细胞、BALB/3T3 clone A31细胞、NCI-H157细胞 
HCC1954-BL细胞系相关产品：HEK-A细胞、SK-MEL-3细胞、MyLa 2059细胞 
MDA-MB-175细胞系相关产品：293T/17细胞、MDA-MB-453细胞、UCH-1细胞 
Cloudman S91 melanoma细胞系相关产品：COLO 206细胞、CAL39细胞、NCI-522细胞 
COLO-320-DM细胞系相关产品：GEO细胞、KYSE-520细胞、SW1353细胞 
HCC 70细胞系相关产品：Nthy-ori 3-1细胞、SK-MEL28细胞、AC16 [Human hybrid]细胞 
NCI-H2073细胞系相关产品：Gerner 7666细胞、HS-68细胞、B35细胞 
HCT-FET细胞系相关产品：KYSE 50细胞、H3255细胞、HCT-8细胞 
MS-751细胞系相关产品：H-1184细胞、COLO.205细胞、H847细胞 
LMTK-细胞系相关产品：ECV细胞、MUM2B细胞、MOLM-13细胞 
Factor Dependent Continuous-Paterson 1细胞系相关产品：Capan-1细胞、HIT.T15细胞、MB 157细胞 
Ramos 2G6.4C10细胞系相关产品：NSI/1-Ag4-1细胞、Hx147细胞、no.11细胞 
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MHCCLM3细胞系相关产品：HCC0095细胞、H2110细胞、SNU-719细胞 
SW 1783细胞系相关产品：BEL7404细胞、P-388细胞、LTPA细胞 
SW 780细胞系相关产品：Hs-695-T细胞、H82sclc细胞、H-1734细胞 
DBTRG-05MG 人脑胶质母细胞瘤细胞系
MDA.MB.435细胞系相关产品：B-cell with DC Morphology细胞、PCI-4.2细胞、Liver-02细胞 
LCLC-103H细胞系相关产品：Mouse Forestomach Carcinoma细胞、RPMI 7666细胞、PA-TU-8988S细胞 
CCRF/CEM-C7细胞系相关产品：SLMT-1细胞、COLO206细胞、SCCVII/St细胞 
MCA 38细胞系相关产品：MeSoTheliOma-211H细胞、NSI/1-Ag4-1细胞、GC-1spg细胞 
Walker/LLC-WRC 256细胞系相关产品：GM05384细胞、Panc8.13细胞、HCT 8细胞 
SKLMS-1细胞系相关产品：NTERA2D1细胞、ASPC1细胞、16-HBE14o细胞 
McCoy B细胞系相关产品：SNU16细胞、NCIH1373细胞、BEL-7405细胞 
HEP-3B2细胞系相关产品：CNE-2Z细胞、OCLY8细胞、KMM-1细胞 
L-cells细胞系相关产品：UPCI-SCC-090细胞、HCT 116细胞、Hopkins-92细胞 
SW 48细胞系相关产品：HCe-8693细胞、MFHL-2细胞、Detroit-562细胞 
MHCC97L细胞系相关产品：MESSADX5细胞、COLO 741细胞、CEM-C7细胞 
RPMI-8226细胞系相关产品：Human Epithelioma-2细胞、CCRF-CEM细胞、Turbot Embryonic Cell line细胞 
LAN-6细胞系相关产品：H82sclc细胞、207细胞、CFPAC细胞 
CACO2细胞系相关产品：PCI:SG231细胞、HFB细胞、GBCSD细胞 
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JS1细胞系相关产品：786-O RCC细胞、GM07404A细胞、CHP-126细胞 
Hs 822.T细胞系相关产品：SK-N-MC细胞、CV 1细胞、GCT0404细胞 
143 B细胞系相关产品：NCI-SNU-407细胞、ARO-81细胞、SKM-1细胞 
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CPA47细胞系相关产品：C3H10T1/2细胞、U251-MG细胞、AR4IP细胞 
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COR-L23/P细胞系相关产品：RKO-E6细胞、AtT 20细胞、NALM-6细胞 
COLO-320细胞系相关产品：AML-12细胞、LLCMK2细胞、SSP-25细胞 
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U-251细胞系相关产品：Hs 606细胞、293E细胞、CT26-clone 25细胞 
SW839细胞系相关产品：RC-2细胞、Kit 225 K6细胞、SNU182细胞 
OCI-Ly8细胞系相关产品：FRTL5细胞、LCMS细胞、NCI-H69细胞 
Panc 05.04细胞系相关产品：KMST6细胞、CMEC/D3细胞、NUGC-4细胞 
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N-Tera-2细胞系相关产品：RBL-2H3细胞、IEC 18细胞、PC-3M IE8细胞 
Anip973细胞系相关产品：WI-38细胞、COLO-320-DM细胞、MDCKII细胞 
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PK-136细胞系相关产品：NCI-H1876细胞、NCI-H295细胞、DHL-8细胞 
TE 32细胞系相关产品：Pro-5 Lec1.3c细胞、T-ALL 1细胞、NCI-H23细胞 
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C26细胞系相关产品：LS123细胞、TNC-1B12B4细胞、H9c2细胞 
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