L6 大鼠骨骼肌成肌细胞系

"L6 大鼠骨骼肌成肌细胞系
细胞背景资料：该细胞是Yaffe在甲基胆蒽存在的情况下从大鼠大腿肌原代培养的最初两代细胞中分离得到的；在培养基中融合形成多核的肌管和横纹肌纤维，细胞融合的程度随着代数的增加而下降，因此细胞应低代次冷冻并周期性地重新克隆以选择融合能力强的细胞。鼠痘病毒阴性。该细胞应在达汇合状态前传代，以延缓细胞分化能力的丧失。 
细胞形态：上皮细胞样 
细胞接收操作说明：请仔细阅读本操作说明及相应的细胞说明书。本公司细胞发货有四种形式：T２５培养瓶(一般是贴壁细胞使用，悬浮细胞也可以)、离心管(悬浮细胞使用多，当然，有些公司也会用这种离心管形式发贴壁细胞，但是，长期经验来说，贴壁细胞容易发生形态变化，估计是细胞培养空间狭小，血清不足导致(最主要是怕运输延误导致这些情况发生)，个人不建议用离心管形式发贴壁细胞)及干冰(冻存细胞用，主要是冬天天气冷，温度低于４℃的地方，都要考虑冻存细胞)。T２５培养瓶：是用T２５细胞培养瓶直接发货的形式。收到细胞后，拆开包装T２５培养瓶的自封袋，不拆封口膜，表面喷７５%酒精消毒后显微镜观察细胞状态(有条件可以拍下此时细胞照片)。将细胞放入３７度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将T２５中培养基取出装好备用，如细胞密度高于８０%，可以直接消化传代，相反则加入５-６ml培养基放回培养箱继续培养即可。离心管：是用１５ml离心管发货的形式，只用于悬浮细胞发货。收到细胞后消毒处理及将细胞放入３７度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将T２５中培养基取出装好备用(如果实验室没有T２５培养瓶，可以暂时T７５培养瓶，加入１０-１５ml培养基，建议１０ml培养基，也可以使用T１７５培养瓶，加入５０-６０ml培养基，培养瓶越大，需要的培养基越多。当然如果刚接收到细胞密度不够的话，不用大瓶子，先用小瓶子养起来再换大的，不然会长得很慢，严重的，会导致细胞死亡等危险)，平衡完成后，离心(１０００rpm，３min)收集细胞，弃上清，用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中，放回培养箱继续培养。干冰：是用本公司冻存液冻存细胞后，直接用干冰将冻存的细胞冷冻发货的形式。收到细胞后按照细胞复苏的步骤操作即可。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
L6 大鼠骨骼肌成肌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不好、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不好》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。 
细胞传代方法：１：２传代 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁生长 
L6 大鼠骨骼肌成肌细胞系
常规的细胞实验(增殖，凋亡，迁移，分化之类的)，受消化影响不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用润洗的方法消化的话(难消化细胞例外)。但少数实验，比如病毒包装，对细胞代数，对细胞状态要求极高。这个时候，胰酶消化，就是润洗，都会对细胞包装病毒的能力有影响，传代次数一多，细胞包装能力就会逐渐下降(当然也有其它因素影响包装效率)。这个时候都不用胰酶消化，用一些盐溶液(不是EDTA液)即可。这些盐溶液通过影响ECM相关酶的活性，来使得细胞脱离基质附着表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。许多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA联合作用。这里要明白，trypsin切割ECM的一些负责粘连和附着的蛋白，而EDTA通过螯合Ca离子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加温和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者对付特别难消化的细胞，添加多一些EDTA，就是这个道理。一般不要试图延长消化时间(如果１０min还消化不彻底的话)，而应该想其它办法；PBS洗涤。消化之前用PBS洗涤，是常见的操作，因为Serum含有抑制trypsin的蛋白。但这里面也有学问可以讲，对于一些难消化细胞，那么可以配制不含Ca，Mg离子的PBS，因为这些离子也会抑制trypsin的活性。但对于绝大部分胰酶或者EDTA溶液润洗即可消化的细胞，不需要配制如此溶液。 
细胞形态特性：成肌细胞样 
IMR90细胞系相关产品：Natural Killer-92细胞、Line 522细胞、COLO684细胞 
COLO 684细胞系相关产品：NCI-SNU-620细胞、AtT-20细胞、SKMEL2细胞 
OSRC2细胞系相关产品：GL261细胞、Hep 3B2.1-7细胞、CA-OV-3细胞 
NFS-60细胞系相关产品：Hs-600-T细胞、MeSoTheliOma-211H细胞、293 H细胞 
SR786细胞系相关产品：NOR-10细胞、NCIH1944细胞、639-V细胞 
C22细胞系相关产品：OVCAR 420细胞、Ca759细胞、NCIH1417细胞 
DanG细胞系相关产品：207细胞、TGW细胞、T2(174 x CEM.T2)细胞 
U266-B1细胞系相关产品：PANC0403细胞、SK-MEL-5细胞、Super Tube细胞 
COV 434细胞系相关产品：HEK/EBNA细胞、SKNBE2C细胞、HT1197细胞 
CL-34细胞系相关产品：MDA134细胞、IOSE-29细胞、Hep 3B细胞 
NCI-H1672细胞系相关产品：BL2141细胞、Turbot Embryonic Cell line细胞、OVCA432_Bast细胞 
343 MG细胞系相关产品：SUD6细胞、alpha-TC1.6细胞、H-747细胞 
HAVSMC细胞系相关产品：HCC95细胞、P3/NS1/1-Ag4-1细胞、Colon-38细胞 
Jurkat E6-1细胞系相关产品：CLL-CII细胞、Colon-26细胞、HB 611细胞 
SJ-RH30细胞系相关产品：SCC-7细胞、ZR75-1细胞、HFB细胞 
PT-67细胞系相关产品：Sp 2/0-Ag 14细胞、C666-1细胞、NCI-SNU-620细胞 
PT-67细胞系相关产品：Sp 2/0-Ag 14细胞、C666-1细胞、NCI-SNU-620细胞 
NTera2/D1细胞系相关产品：PK13细胞、LOUNH91细胞、HEK293A细胞 
786-0细胞系相关产品：NCIH716细胞、TOG细胞、NCIH2291细胞 
RCK8细胞系相关产品：HCC-1954BL细胞、NCI H929细胞、C3H 10T1/2细胞 
L6 大鼠骨骼肌成肌细胞系
Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞系相关产品：CHP-212细胞、Caco2BBe细胞、MDA330细胞 
RT4P细胞系相关产品：Hep 3B2细胞、DMS153细胞、FRhK-4细胞 
HOP62细胞系相关产品：UM-RC-2细胞、SK-OV-3细胞、Ku812F细胞 
HcerEpic细胞系相关产品：H-596细胞、Hepa1-6细胞、hUC-MSC细胞 
D-407细胞系相关产品：HTR-8细胞、138 MG细胞、SNU1040细胞 
NCI-BL1339细胞系相关产品：Neuro-2a细胞、Tb 1-Lu细胞、NCTC1469细胞 
HLE-B3细胞系相关产品：2PK-3细胞、HTSMC细胞、RPE-hTERT细胞 
NCIH1869细胞系相关产品：H2.35细胞、NCI-H345细胞、NCI-H-295细胞 
Hs822T细胞系相关产品：BL6细胞、HR-1细胞、HLE细胞 
MARC 145细胞系相关产品：CoCL2细胞、CP70细胞、T-T细胞 
NCI-H719细胞系相关产品：Ca 9-22细胞、HLEC细胞、JG细胞 
Ca Ski细胞系相关产品：Tb 1 Lu (NBL-12)细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14细胞、D-407细胞 
H-1651细胞系相关产品：A431/P细胞、SC1细胞、LTEP-sm细胞 
KATOIII细胞系相关产品：NCI-841细胞、Z310细胞、NIH:OVCAR-4细胞 
H526细胞系相关产品：PLCPRF5细胞、HMy2.CIR细胞、GTL-16细胞 
EC9706细胞系相关产品：EA hy 926细胞、COR-L 105细胞、McA-RH 8994细胞 
HCC-1937细胞系相关产品：RBMEC细胞、OE21细胞、MDAMB330细胞 
PLA-801C细胞系相关产品：FHL124细胞、BTT739细胞、PC-3细胞 
MDA-MB231细胞系相关产品：SF-126细胞、NCI-H1184细胞、TW-039细胞 
NCI N87细胞系相关产品：MGC-803细胞、MV4-11细胞、NCIH208细胞 
PIGI细胞系相关产品：GTL 16细胞、HS-683细胞、Y3细胞 
SVG p12细胞系相关产品：NCI-H1688细胞、HEP3B2细胞、CAL78细胞 
GC-1细胞系相关产品：Normal Rat Kidney-52E细胞、Hs 695T细胞、GM05372E细胞 
Mono Mac6细胞系相关产品：138 MG细胞、KATOIII细胞、SCC-9细胞 
Hela-mock细胞系相关产品：LS-123细胞、HCV 29细胞、Hs 578.Bst细胞 
PC3-M细胞系相关产品：Hs 611.T细胞、H-647细胞、HO-8910细胞 
CAL 120细胞系相关产品：CV-1.K细胞、D562细胞、MRC9细胞 
SNU-C2A细胞系相关产品：AAV293细胞、SNU-354细胞、SNU-5细胞 
CAL-27细胞系相关产品：CAL-51细胞、My-La 2059细胞、NCI-747细胞 
C33A细胞系相关产品：NCIH1770细胞、HCC2157细胞、Chinese Hamster Ovary细胞 
BT-20细胞系相关产品：Ramos (RA 1)细胞、H-1694细胞、MC-4细胞 
BRL 3A细胞系相关产品：PFSK细胞、UO.31细胞、HCC1954BL细胞 
SK-N-BE(2)-M17细胞系相关产品：MAntle cell VERona-1细胞、Mono-Mac-1细胞、J111细胞 
MDA-MB-231 #4175细胞系相关产品：REC 1细胞、EBNA293细胞、ROS17/28细胞 
FOX-NY细胞系相关产品：A-875细胞、C8161细胞、MLO-Y4细胞 
BNL.1ME A.7R.1细胞系相关产品：NCI-H740细胞、NCI-SNU-C1细胞、3T3-Swiss albino细胞 
CAL-85-1细胞系相关产品：SW837细胞、WIL2 Secreting细胞、NCI-H1688细胞 
U-251_MG细胞系相关产品：SKGT4细胞、MDA-MB-134VI细胞、A673细胞 
SF-763细胞系相关产品：CCRF SB细胞、RH8994细胞、L cell line细胞 
AR-42J细胞系相关产品：SCC4细胞、RAEC细胞、RCC_7860细胞 
NCIH1573细胞系相关产品：CT26细胞、KYSE50细胞、MOVAS细胞 
L6 大鼠骨骼肌成肌细胞系
GM03571细胞系相关产品：Fetal Rhesus Kidney-4细胞、HCC-1395细胞、SU86.86细胞 
NCI-322细胞系相关产品：H-2171细胞、H226细胞、NCI-H460细胞 
HSC5细胞系相关产品：SW 900细胞、AR42J细胞、H-510A细胞 
CAL 33细胞系相关产品：HO1-N1细胞、HOP 92细胞、KM932细胞 
Hep-G2细胞系相关产品：Emory University-2细胞、FK81细胞、CCC-HSF-1细胞 
HCC2157细胞系相关产品：IMR-32细胞、Panc10.05细胞、OV433细胞 
MIN6细胞系相关产品：NCIH1568细胞、10RGB细胞、LS 123细胞 
H-1618细胞系相关产品：PCI:SG-231细胞、JROECL 33细胞、BC-019细胞 
NCIH1793细胞系相关产品：D-324 Med细胞、GM04154B细胞、NCIH82细胞 
U 266细胞系相关产品：SUDHL-4细胞、H322T细胞、CO115细胞 
OCI-LY-7细胞系相关产品：HEC-251细胞、H-510细胞、OCI-Ly 19细胞 
OSRC2细胞系相关产品：GL261细胞、SUM 52细胞、FU-MMT-1细胞 
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